Efficient purification of cell culture-derived classical swine fever virus by ultrafiltration and size-exclusion chromatography

Large-scale production of cell culture-based classical swine fever virus (CSFV) vaccine is hampered by the adverse reactions caused by contaminants from host cell and culture medium. Hence, we have developed an efficient method for purifying CSFV from cell-culture medium. Pure viral particles were obtained with two steps of tangential-flow filtration (TFF) and size-exclusion chromatography (SEC), and were compared with particles from ultracentrifugation by transmission electron microscopy (TEM), infectivity and recovery test, and real time fluorescent quantitative PCR (FQ-PCR). TFF concentrated the virus particles effectively with a retention rate of 98.5%, and 86.2% of viral particles were obtained from the ultrafiltration retentate through a Sepharose 4 F F column on a biological liquid chromatography system. CSFV purified by TFF-SEC or ultracentrifugation were both biologically active from 1.0×10^−4.25 TCID₅₀·mL⁻¹ to 3.0×10^−6.25 TCID₅₀·mL⁻¹, but the combination of TFF and SEC produced more pure virus particles than by ultracentrifugation alone. In addition, pure CSFV particles with the expected diameter of 40–60 nm were roughly spherical without any visible contamination. Mice immunized with CSFV purified by TFF-SEC produced higher antibody levels compared with immunization with ultracentrifugation-purified CSFV (P<0.05). The purification procedures in this study are reliable technically and feasible for purification of large volumes of viruses.     

兽用繁殖控制疫苗研究现状

兽用繁殖控制疫苗研究发展迅速,本文阐述了兽用繁殖控制疫苗的研制以及抑制生殖激素的疫苗、抗配子抗原疫苗、增加受精率的疫苗等方面的研究现状,并介绍了相关的商品化产品。     

低温对光籽棉新研9648出苗的影响

研究24 h的持续低温对光籽棉新研9648种子出苗的影响。结果表明:出苗期间遇到低温胁迫对棉花见苗期、出苗期、株高和幼苗感病率都有不同程度的影响,尤其是在种子露白和刚出土时受到低温影响最为明显。但对种子见苗率没有明显的影响。     

遥感植被指数在重点国有林区“三总量”伐区检查中的应用研究——以对鹤立林业局的研究为例

以鹤立林业局为研究区域,以2007年"三总量"检查的TM遥感判读区划结果和抽样现地检查结果为基础资料,分析了同期遥感数据之间、不同年份遥感数据之间采伐地块的植被指数变化,以及不同采伐方式和不同采伐强度与植被指数变化的关系,为利用遥感数据进行"三总量"检查进行了有益的探索和实践。     

今年1—4月我国木浆、纸品出口价值金额大幅下跌

今年1—4月份,发端于美国的金融市场危机,仍然没有触底反弹的迹象,受其影响,全球经济环境缺乏改观动力,发达国家的生产以及消费需求也还没能从萎缩和疲软的状态中解脱出来。     

谷子3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆与结构分析

3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)在谷子盐旱胁迫早期高频率表达,为研究该基因在胁迫反应及其他代谢中的详细功能,本研究利用RACE技术克隆了谷子的GAPDH基因.该基因cDNA全长1328 bp,包括1008bp的开放阅读框,共编码338个氨基酸,肽段的分子量为35911.03Da,极性氨基酸占29.12%.序列比较分析发现,谷子的GAPDH同玉米的同源序列表现了最高的相似性,同水稻和小麦同源序列的相似性次之,同双子叶植物的同源序列则相差较远.     

NaCl胁迫对玉米萌发及幼苗生理的影响

为了解作物盐胁迫下植株体内生理变化,以郑单958和浚单20玉米品种为材料,利用模拟的盐胁迫条件研究了盐胁迫对玉米萌发及幼苗生理变化的影响.结果表明:玉米种子吸水率和萌发率与盐胁迫程度呈负相关,幼苗可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸在重度胁迫下的含量均高于轻胁迫下的含量.不同玉米品种间受盐胁迫影响程度存在差异.     

瓜列当发芽诱导植物的筛选及寄生关系研究

选用部分中草药和新疆本地能产生可观经济效益的栽培作物为研究材料,研究其蒸馏水和甲醇浸提液原液及其50、100、250、500、1000、2500、5000和10000倍稀释液对瓜列当种子发芽的影响及植物幼苗-番茄寄生情况。结果表明,大部分植物浸提原液对瓜列当种子的发芽具有一定的抑制作用,28种植物组织的蒸馏水浸提液和19种植物组织的甲醇浸提液分别在其不同稀释倍数下对瓜列当种子的发芽具有有不同程度的诱导作用;有菌和无菌的室内寄生模拟试验发现,根际环境是除发芽刺激物质外影响瓜列当-寄主寄生关系的另一主要因素。     

茶叶发酵过程中多酚变化规律及抗氧化性研究

通过对茶叶进行单一菌种和混合菌种的人工接种发酵,采用微波辅助浸提茶多酚,来研究茶叶发酵过程中多酚的变化规律及不同菌株发酵产物的抗氧化活性.结果表明,茶叶在发酵过程中多酚的含量随发酵时间的延长而降低,其中接种黑曲霉、酵母菌及接种黑曲霉、酵母菌、根曲霉、青霉的茶叶中多酚含量变化趋势明显,分别从31.16％降到5.32％,3...     

以抗除草剂Bar基因稳定转化谷子技术研究

农杆菌介导的谷子遗传转化效率一直是制约谷子功能基因研究及转基因育种效率的主要因素。本研究以冀谷11谷子幼穗为外植体, 选取0.5~1.0 cm的幼穗, 切成0.5 cm左右的小段, 置改良后的MS培养基上诱导15~20 d形成胚性愈伤组织3120块。愈伤组织侵染转化前用侵染液悬浮浸泡, 并经45°C热激预处理3 min, 可以有效提高26.1%的瞬时遗传转化效率。将转化后的愈伤组织经草丁膦(PPT)筛选后获得513块抗性愈伤组织, 抗性愈伤组织获得率为16.4%。抗性愈伤组织经分化、壮苗培养后获得7株抗性植株, 经PCR和Southern杂交检测得到6株T₀代转基因阳性株, 对T₃代转化植株叶片进行PPT抗性分析, 并结合Bar蛋白抗体试纸条鉴定, 表明Bar基因已稳定整合到谷子基因组中。本研究建立了农杆菌介导转化谷子优良品种的遗传转化体系, 对提高谷子转基因育种效率和谷子模式研究系统的建立有重要意义。