基因重排H1N2亚型猪流感病毒的分离鉴定和生物学特性的研究

本研究对2005年～2006年广西和海南省疑似猪流感(SD)病猪的组织病料进行了病毒分离,并对分离毒株进行了亚型鉴定和生物学特性的研究.结果显示:分离的3株流感病毒均为H1N2亚型猪流感病毒(SIV).能凝集多种动物的红细胞,但凝集谱与以往报道略有不同;为热不稳定型病毒;在电镜下可观察到典型流感病毒粒子.动物试验显示:小白鼠、大白鼠和家兔对分离毒株不敏感,而豚鼠较敏感.能较好地复制出流感症状和病理变化;本体试验动物仅有轻微的临床症状,但能检测到抗体升高的变化,并能从鼻腔和上呼吸道检测和分离到SIV.核苷酸同源性分析显示:分离毒株Sw/GX/17/05、Sw/GX/13/06和Sw/HN/1/05的血凝素(HA)基因分别与基因重排H1N2 亚型SIV A/Swine/lndiana 9K035/99、A/SW/MN/23124-T/01和A/swine/Zhejiang/1/04的核苷酸同源性最高,分别达97.4%、97.0%和95.7%;神经氨酸酶(NA)基因均与基因重排H1N2 亚型流感病毒A/Trurkey/MO/24093/99 的核苷酸同源性最高,达97.2%～98.0%.核苷酸同源性分析进一步证实了分离毒株为基因重排H1N2亚型SIV.     

人工践踏对无土草坪基质的影响

本试验采用人工践踏的方式,研究了不同组合配比的基质对无土草坪耐践踏性的影响。结果表明,良好的无土草坪基质配比及适合的厚度是保证无土草坪优良的耐践踏性及观赏性的关键。本试验中,草坪草生长基质层和弹性材料层均为25 mm,结构合理、厚度适中,克服了现有草坪基质薄、持水力差的缺点。在相同践踏强度下,能维持较高水平的草层高度、草坪盖度和草坪草分蘖数,分别达到了5.14 cm、97.60%和123.97 个·dm-2,且停止践踏后草坪质量能快速恢复。均匀混合的草坪草生长基质层和弹性材料层,在厚度一致的前提下并不耐践踏,实际效果不好。土壤坪床的处理效果最差。因此,具有独立的草坪草生长基质层和弹性材料层且厚度适中的基质,适用于生产耐践踏性好的无土草坪。     

IL-12及其免疫调节作用

IL-12是一种具有多种生物学活性的免疫细胞生长刺激因子,它能促进T淋巴细胞和NK细胞的分化与增殖,调控细胞免疫,提高NK/LAK细胞的杀伤功能和特异性CTL细胞的应答能力,诱导γ干扰素产生;能与其他细胞因子协同成为重要的免疫治疗因子。     

家蚕中肠上皮细胞增殖和分化的初步研究

通过分析家蚕自幼虫期到蛹期发育过程中肠上皮细胞的增殖与分化情况,鉴定家蚕中肠干细胞的潜在定位。采用苏木精和伊红(Hematoxylin and Eosin,H&E)染色与4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色追踪变态和发育时期家蚕中肠的形态结构及细胞组成变化,结果显示,幼虫经历蜕皮及变态时,中肠形态结构以及中肠上皮细胞组成均发生明显变化:在幼虫每个龄期的盛食期肠壁较薄,眠前期(蜕皮前)明显变厚,至眠期其厚度达到峰值;中肠上皮层存在柱状细胞(CC)、杯状细胞(GC)和再生细胞(RC)3种细胞,3种类型细胞随龄期逐渐增多,其中各龄期柱状细胞持续增多,至眠期达到峰值,靠近基底膜的小细胞在眠前期增多。利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxyUridine,BrdU)和磷酸化组蛋白(Phospho-histone H3,PHH3)免疫荧光染色检测到中肠上皮细胞,尤其是中肠上皮层靠近基底膜处的小细胞在幼虫各龄眠前期的增殖率最高。同时通过BrdU滞留标记实验在中肠上皮层靠近基底膜处发现了BrdU滞留阳性信号。研究结果发现家蚕幼虫蜕皮时中肠上皮层靠近基底膜处的小细胞发生快速增殖,推测这些小细胞中存在着潜在的家蚕中肠干细胞。     

益生素雏鸡新城疫疫苗免疫后局部黏膜组织T淋巴细胞数量变化

100只艾维因雏鸡随机分成益生素组、新城疫(ND)疫苗免疫组、益生素ND疫苗组和对照组,采用组织石蜡切片及酸性a-醋酸萘酯酶(acid nonspecifica-naphthyl acetate esterase,ANAE)染色法分别测定ND疫苗首次免疫后第0、7、14、28天和第42天各组雏鸡盲肠扁桃体、哈德尔氏腺、十二指肠和回肠派伊尔结T淋巴细胞数量的动态变化,结果发现:益生素ND疫苗免疫雏鸡,ND疫苗单独免疫雏鸡上述免疫组织T淋巴细胞数量于ND疫苗免疫后14d明显高于未免疫的对照雏鸡和益生素雏鸡;益生素ND疫苗免疫雏鸡又不同程度高于ND疫苗单独免疫雏鸡;益生素单独应用雏鸡上述被检指标高于对照雏鸡.表明益生素可增强雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜组织的细胞免疫及对ND疫苗的免疫应答.     

全混合日粮中添加牛至精油对泌乳期荷斯坦奶牛生产性能和蹄病发生率的影响

本研究旨在探讨向全混合日粮(TMR)中添加牛至精油对日粮温度、荷斯坦奶牛干物质采食量、产奶量和蹄病发生率的影响。选择72头健康荷斯坦奶牛,根据生产性能、泌乳天数和胎次相近原则进行配对试验设计分为试验组[产奶量(29.88±8.55)kg·d-1,TMR中添加牛至精油]和对照组[产奶量(29.15±7.07)kg·d-1,TMR中未添加牛至精油],每组36头牛。试验组奶牛按每天每头0.028 kg添加牛至精油。结果表明,在6月份17:00,7月份13:00、17:00,8月份13:00、17:00试验组TMR日粮温度升高幅度显著低于对照组(P0.05);5月份试验组奶牛干物质采食量显著高于对照组(P0.05),6、7、8月份极显著高于对照组(P0.01);6、7、8、9月份试验组产奶量极显著高于对照组(P0.01)。因此,牛至精油可降低TMR温度、改善适口性、提高新鲜度;同时还可增加奶牛干物质采食量及产奶量,尤其当奶牛处于北方夏季高温天气下,这一效果尤为显著。     

猪囊尾蚴头节单链抗体-PE40重组载体的构建及表达

从绿脓杆菌ATCC27853菌株中提取基因组,PCR扩增PE40基因,与pMD18-T栽体连接并转化感受态大肠杆菌JM109中,构建重组质粒pMD-PE40;经鉴定正确后将PE40基因插入抗猪囊尾蚴头节单链抗体基因重组质粒pMD-ScFv中,构建重组质粒pMD-ScFv-PE40,经酶切、电泳回收目的片段,并亚克隆到表达栽体pET-28a中,构建重组表达载体pET-ScFv-PE40;鉴定后转化E.coli BL21,IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western blotting验证.结果表明,试验成功构建了重组表达载体pET-ScFv-PE40,目的片段约为1800 bp;Western blotting证明重组蛋白具有一定的反应原性,为重组免疫毒素的制备及动物保护性试验奠定了基础.     

马媾疫锥虫SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种特异、快速的媾疫锥虫检测方法,本研究通过PCR方法从马媾疫锥虫动基体基因组中扩增得到395 bp的特异的保守序列,将其克隆到pMD-18T载体中构建重组质粒标准品,以10倍倍比稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立马媾疫锥虫荧光定量PCR的检测方法。结果表明:该方法的检测灵敏度可达到1拷贝/μL,并且与马属动物其他传染病无交叉反应。其组间及组内变异系数分别小于3.183%和3.842%。该方法的建立为快速及特异性检测马媾疫锥虫提供了有效的方法。     

PrP106-126对星形胶质细胞层黏连蛋白和纤黏连蛋白表达的影响

星形胶质细胞增生是朊病毒病早期的主要病理学特征.PrP106-126 (prion protein peptide 106-126)具神经毒性,导致星形胶质细胞增生.层黏连蛋白(laminin,LN)和纤黏连蛋白(fibronectin,FN)是星形胶质细胞胞外基质的主要成分.利用PrP106-126和PrP106-126制备的小胶质条件培养基(condi-tioned medium from microglia,MiCM)分别作用于体外培养的星形胶质细胞,应用RT-PCR和Westernblot技术探讨PrP106-126对星形胶质细胞的增殖及其胞内LN、FN表达的影响.试验分为5个处理(空白对照、Scr对照、PrP106-126、MiCM、MiCMPrP106-126).结果表明,PrP106-126可促进星形胶质细胞增殖、LN和FN的表达,但促增殖和FN表达作用有赖于活化小胶质细胞细胞因子的共同参与.     

果桑丰产栽培配套技术

果桑已成为农业观光采摘园中深受游客喜爱的水果之一,种植面积逐年扩大,生产上普遍存在栽培管理水平低下的问题。本文根据万州区近年果桑种植的实践经验总结出包括合理搭配果桑品种、建园标准、果桑栽植、树形培育、修剪技术、肥培管理、桑果品质提升等内容的果桑丰产栽培配套技术,供广大果桑种植者参考。