鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性

为研究鸭源鸡杆菌(G.anatis)体外黏附和侵袭细胞的能力,选择HeLa细胞为感染模型,分别以细菌黏附和侵袭HeLa细胞数量为指标,借助革兰和姬姆萨染色及电镜观察来研究2株不同来源的鸭源鸡杆菌对HeLa细胞的黏附和侵袭特性。结果显示:黏附计数表明鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG能高水平黏附HeLa细胞,菌株感染30、60、90、120、150min后每细胞黏附的细菌数分别为0.84、4.68、8.52、9.27、8.2个,而菌株F149T对HeLa细胞有较低的黏附作用。侵袭试验表明Yu-PDS-RZ-1-SLG有低度侵袭力,侵袭的细菌数在150min时达到最大,约8.27·1 000细胞-1,随后细胞破碎,细胞逐渐脱落,而菌株F149T未检测到侵袭力。染色及电镜试验进一步证实鸭源鸡杆菌Yu-PDS-RZ-1-SLG可黏附于HeLa细胞表面并侵入细胞内部。菌株经胰蛋白酶处理后,细菌的黏附率显著降低,表明细菌的表面蛋白参与黏附。黏附和入侵特性是鸭源鸡杆菌定殖在组织表面重要的能力,该细胞模型的建立为进一步研究其致病机制提供了条件。     

抗鸽IgG单克隆抗体的制备及鉴定

鸽卵黄经硫酸铵盐析、酒精沉淀及凝胶（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００）柱层析后,得到较纯的鸽ＩｇＧ,以其免疫ＢＡＬ Ｂ／Ｃ小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）进行细胞融合,经过酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）筛选,得到两株能稳定分泌抗鸽ＩｇＧ的单克隆抗体（以下称单抗）,分别命名为１Ｅ５和４Ｃ２。经亚类鉴定,该类抗均为ＩｇＧ１亚类。在鸽ＩｇＧ包被的９６孔板上用间接用ＥＬＩＳＡ方法测定单抗腹水的ＥＬＩ     

丙酸咪唑苯脲的研制及其对梨形虫病的治疗试验

以苯甲腈为起始原料 ,经硝化、环化、还原、缩合、成盐等五步反应合成抗梨形虫病新药丙酸咪唑苯脲 ,用 IR、UV、MS、1HNMR、13 CNMR、元素分析等对其化学结构进行了确证。UV法测定牛血药浓度及组织残留量。小白鼠 i P丙酸咪唑苯脲 ,LD50 =84.4± 1 3.5mg/kg。该药无致突变性和无致畸效应。用其治疗家畜梨形虫病 ,临床治愈率为 75%～ 1 0 0 %;预防水牛巴贝西虫病 ,试验组和对照组的发病率分别为 0 .72 %和 1 0 %,两组差异特别显著 ( P<0 .0 1 )     

Vero E6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

To seek out proteins which interact with structural proteins of porcine epidemic diarrhea virus （PEDV） in Vero E6 cells and study the mechanisms of viral infection.We created a Vero E6 cDNA yeast hybrid library. The total RNA of Vero E6 was extracted using Trizol method, and double strands cDNA was synthesized by SMART technique. We created a Vero E6 cDNA library by using homologous recombination in yeast. The results showed that the titer of cDNA library was 9.7×10⁸ CFU with the average of inserted fragments about 1.6 kb, and the recombination rate was 87%. These data indicated that the yeast two-hybrid cDNA library of Vero E6 was successfully constructed and might be useful for screening the host proteins interacting with structure protein of PEDV.     

NaCl胁迫下黑麦草种子萌发过程中DNA甲基化与基因表达分析

为了解黑麦草（Lolium perenne）种子在正常条件与NaCl胁迫下萌发过程中DNA甲基化动态变化以及重要盐胁迫相关基因的表达。运用甲基化敏感扩增多态性技术分析对照和150 mmol·L^-1 NaCl处理下黑麦草种子萌发过程（0,1,2,4,7 d）的DNA甲基化水平及动态变化,并通过实时荧光定量 PCR（QRT-PCR）检测8个重要的盐胁迫相关基因的表达情况。结果表明：黑麦草种子萌发过程中甲基化水平呈下降趋势,以双链甲基化方式为主,甲基化变化同时发生在编码序列和非编码序列中。NaCl处理下DNA甲基化程度高于CK,而去甲基化程度低于CK,最终导致NaCl处理下基因组净的甲基化位点数目增加。黑麦草种子耐盐萌发过程中代谢增强,8个盐胁迫相关基因表达量呈上升趋势,而NaCl胁迫延缓了种子萌发进程,在大多数时间点的基因表达低于对照。     

蜀宣花牛体型外貌、线性评定及生理指标测定

[目的]为了充分了解牛群的体型外貌及生理指标情况,我们对牛群体型外貌进行了评定、同时对牛群的毛色、肤色、踢、角及生理指标进行了调查研究。[方法]通过对牛群生理指标测定、体型外貌评定及毛色、肤色、踢、角颜色和形状分析。[结果]表明:蜀宣花牛肉用指数公母牛分别为5.3769和4.0725,低于国外专门化肉牛品种,但也明显高于国内几个比较有名的地方牛品种,由此说明,蜀宣花牛的肉用指数界于专用型肉牛和肉役兼用型牛之间。毛色以黄白花和红白花为主,占90.16%;皮肤颜色以纯粉色和粉色有斑点的为主,占96.92%;蹄质颜色以纯蜡黄色为主,占86.28%;角型以照阳角为主,占93.94%。成年母牛的生理指标分别为:体温平均38.38℃、心跳74.56次/min、呼吸18.74次/min和瘤胃蠕动2.84次/2min;体型外貌线性评定分析表明,蜀宣花牛母牛的14个性状中,除后房宽度、尻角度和乳房底部3个性状平均分略低于75分,强壮度、后房高度、乳头位置和乳静脉4个性状的平均分高于80分外,其余7个性状的平均分都在75~80分之间。[结论]从乳用性能的角度看,牛群的平均体型尚处在较理想型和理想型之间,还有待进一步选育提高。     

饲用燕麦和草木樨混播栽培技术

为了提高单位面积土地的利用效率,增加单位面积经济效益,采用饲用燕麦和草木樨混播技术,不仅可以合理、有效地利用空间、光照、热量和水分等资源,增加牧草产量,提高牧草品质,还可以进行营养互补;草木樨还可以改善土壤结构、提高土壤肥力。通过开展饲用燕麦和草木樨混播栽培技术等方面的综合研究,明确了饲用燕麦和草木樨混播栽培选地、种子准备、播种、田间管理、收获等关键技术指标,为大田生产的规范化、标准化、产业化、市场化提供了技术支撑。     

规模化肉鸭场污水污染物排放及其影响分析

为了解规模化肉鸭场污水污染物排放及其对水环境污染现状,本试验选择河南省5个有代表性的规模化肉鸭场,对其所排放污水以及附近水体中的化学需氧量(COD)、五日生化需氧量(BOD5)、氨氮(NH3-N)、总磷(TP)、悬浮物(SS)等污染物含量进行了分析,并利用单因子污染指数法对其污染程度进行评价.结果表明:鸭场排放污水中COD、BOD5、NH3-N、TP、SS的平均含量均超出《畜禽养殖业污染物排放标准》.其中COD、BOD5、NH3-N、TP属于较严重污染,而SS属于严重污染.鸭场下游水体中COD、BOD5、NH3-N、TP的平均含量均高出《地表水环境质量标准》,其中COD、BOD5、TP污染较严重,而NH3-N为严重污染.因此,规模化肉鸭场污水排放污染物指标全部超标,并且排放的污水对周围水环境造成不同程度的污染.     

羊白细胞介素-18成熟蛋白的酵母表达和生物学活性研究

为了研究重组羊白细胞介素(gIL)-18在酵母系统中的高效表达,进一步阐明该重组蛋白的生物学活性,以含有gIL-18基因的重组质粒为模板进行PCR扩增,构建重组表达质粒pPICZ-gIL-18,转化于毕赤酵母GSll5,以甲醇诱导表达,经sDS-PAGE和western blot分析证实了重组蛋白的表达,分泌的重组gIL-18表达量为100 mg/L.经纯化后用MTT法和MDBK-VSV法检测表达的重组IL-18体外生物活性,利用免疫试验检测了重组蛋白对羊痘疫苗的免疫增强作用.实验结果表明,该蛋白具有诱导MDBK细胞分泌IFN-γ和刺激PBMC增殖的生物学活性,比活性为1.5×105 u/mg.体外具有增强羊痘疫苗的活性.毕赤酵母分泌表达的重组gIL-18具有良好的生物学活性,为gIL-18作为免疫佐剂和免疫治疗剂的大规模应用奠定了基础.     

《牛生产学》教学实习的探索

对西藏目前《牛生产学》教学实习中存在的主要问题进行了分析和讨论,并提出了相应的对策,同时进行了教学实习实践效果的总结,以切实达到《牛生产学》教学实习的目的,旨在为西藏培养畜牧业所需要的应用型人才奠定基础。