β-甘露聚糖酶基因重组整合组成型表达载体的构建

应用PCR方法从P.pastorisGS115染色体中扩增了GAP启动子(PGAP),大小为500bp左右,以其取代诱导型表达载体pPIC9K上的AOX1启动子(PAOX1),构建了组成型表达载体pGAP;再从野生型酵母菌JSY4染色体中扩增出25S rDNA保守序列,大小为1 700bp左右,以其取代组成型表达pGAP上的组氨酸脱氢酶基因(H IS4)片断,构建了整合组成型表达载体pGAP-rDNA。再双酶切重组质粒pT002M anⅠ得编码β-甘露聚糖酶的ManⅠ基因片断插入pGAP-rDNA的多克隆位点(MCS),获得含有目的基因ManⅠ的重组整合组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ。CaC l2法转化感受态大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行质粒PCR鉴定和单、双酶切鉴定。结果表明:成功构建了重组组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ,为下一步野生型酵母菌JSY4中β-甘露聚糖酶的组成型表达打下基础。     

2种头孢氨苄片在比格犬体内的药代动力学及生物等效性试验

【目的】研究头孢氨苄片受试制剂和参比制剂在比格犬体内的生物等效性。【方法】采用双周期和双序列交叉设计,将22只健康比格犬随机分成2组,按30 mg/kg BW分别单剂量口服头孢氨苄片受试制剂Trolevis~?300和参比制剂Rilexine~?300,于给药前(0 h)和给药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、17和24 h从臂头静脉采血。对超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)方法进行特异性、线性、检测限、准确度、精密度、稳定性等方法学考察。利用建立好的UPLC-MS/MS方法测定血浆中的药物浓度,并用WinNonlin^TM 8.1软件对药代动力学参数进行分析计算。【结果】方法学结果显示,在100～5 000 ng/mL浓度范围内相关性良好,相关系数(R²)≥0.99,标准曲线方程为y=10.6828x-176.481;高、中、低3个浓度的相对回收率平均值分别为105.63%、104.35%和102.40%;日内和日间变异系数均<15%;检测限为50 ng/mL,定量限为100 ng/mL。药代动力学结果...     

GPX4失活通过JNK通路缓解LPS诱导巨噬细胞炎症反应

【目的】研究硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidases 4,GPX4)失活如何参与调控脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应及其潜在的分子机制。【方法】体外培养RAW264.7巨噬细胞,以DMSO为对照,使用0.1～5.0μmol/L GPX4抑制剂FIN56处理,通过CCK-8法检测细胞活力和Western blotting检测GPX4蛋白表达水平,确定抑制剂最适浓度。将RAW264.7巨噬细胞分为4组：对照组,添加DMSO培养24 h; FIN56(GPX4抑制剂)组,添加0.5μmol/L FIN56培养24 h; DMSO-LPS组,DMSO培养24 h后使用LPS(100 ng/mL)刺激3 h; FIN56-LPS组,FIN56培养24 h后使用LPS刺激3 h。各组细胞经培养后,利用荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate, H₂DCFDA)检测细胞内活性氧(reactive...     

呼和浩特市城市现代化水平综合评价与分析

城市现代化是城市素质的综合反映,城市现代化水平评价是衡量1个城市综合竞争力的最有效方法。本文根据城市现代化的概念与内涵,构建了呼和浩特市城市现代化评价指标体系与测度模型,运用层次分析法对历年的城市现代化水平进行了综合评价与动态分析。分析表明:自1990年以来,呼和浩特市城市现代化水平呈平稳上升趋势,但总体水平仍然偏低,处于现代化的准备阶段向基本实现现代化阶段的过渡时期。     

山西省苜蓿产业化发展的再思考

大力推进苜蓿产业化发展是我国农业产业结构调整的必然要求,也是“三农”问题研究的重要课题。从分析山西发展苜蓿产业化在自然区位、政策支撑和经济比较三方面的优势出发,重点研究了目前存在的问题,针对性地提出了山西发展苜蓿产业应采取的对策。     

国家农业图书馆文献资源结构分析

对国家农业图书馆2002-2004年中外文馆藏图书以及2002-2005年的中外文原版期刊中的农业科学、生物科学和食品加工三个领域的文献进行了统计与分析。     

我国农村信息服务的特点与模式选择

根据我国农村信息服务现状,分析了我国农村信息服务的主要特点和构成要素,从信息服务主体、信息管理和传递手段、信息运动方向和信息服务对象等角度对我国现行农村信息朋．务模式进行了分析和评价,在此基础上对我国农村信息服务模式选择提出建议。     

五道沟地区1971—2020年地温月尺度变化及其对气温的响应

【目的】研究五道沟地区1971—2020年0～320 cm土层月平均地温变化及其对气温的响应。【方法】利用五道沟水文实验站1971—2020年月平均气温和月0～320 cm(0、10、40、80、160、320 cm)土层地温资料,采用线性倾向估计、M-K检验以及Morlet小波分析等方法,分析了该地区1971—2020年0～320 cm土层温度月尺度变化规律及其对气温的响应。【结果】(1)五道沟实验站1971—2020年各土层地温趋势变化,除6—9月,其余月份均呈增加的趋势,最大增幅在3月,最小增幅在10月;0～160 cm土层地温总体呈上升的趋势,0 cm增幅最大,160 cm增幅最小,320 cm总体呈下降趋势。(2)利用小波分析可知各层年均地温具有明显的3～6、8～12 a和15～25 a周期变化,其中以3～6 a和8～12 a尺度为主周期。(3)M-K突变检验表明,0、10、80、160 cm和320 cm各层年均地温均发生突变,突变的年份分别在2013、2016、2019、2017年和1972年,其中0、10 cm和80 cm土层突变后地温显著性上升。(4)不同深度的月平均...     

网络信息资源在高校教学和科研中的作用

论述了网络信息资源在高校教学和科研中的重要性,并介绍了如何利用网络信息资源进行学习和科学研究。     

国家农业图书馆文献利用率现状分析

以国家农业图书馆为例。对2002-2004年中西文重点学科图书和2004-2005、10的现刊利用进行分学科统计,调查显示：在2002-2004年间,中文图书利用率最高的为食品加工类文献,利用率为55．3％,西文为生物学文献,利用率为8．1％：从中西文重点学科图书借阅重的时间分布上看,图书借阅有两个高峰期,分别为3-4月和9-12月;另外本文还对农业各类文献的利用进行统计分析,发现中文图书利用率最高的是农业综合类图书（S）,达到了25％,西文为盲牧兽医（S8）,达到22％。现刊统计发现。中西文利用频次最高的都是生物学文献,中文2004年阅读频次为18次／册,2005年9．5次／册;西文2004年阅读频次为4．1次／册,2005年3．2次／册。