犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化

[目的]提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量.[方法]研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST - CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST - Sepharose 4B亲和层析柱对GST - CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定.[结果]大肠杆菌BL21 (DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600 =1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8h,GST - CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL.[结论]确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础.     

孕鼠暴露双酚A对仔鼠存活率、生殖激素及相关基因的影响

为了研究孕鼠在孕期暴露双酚A（bisphenol A,BPA）对仔鼠生殖激素及相关基因的影响,试验将40只昆明孕鼠随机分为A、B、C、D共4组,每组10只。其中A组为对照组,饲喂普通鼠粮;B、C、D组孕鼠整个妊娠期（妊娠1 d至分娩）分别按每只鼠每天50、500、2 500 mg/kg体重给予BPA,待孕鼠自然分娩,观察记录仔鼠死亡情况。至仔鼠性成熟（56日龄）剖杀仔鼠,摘取睾丸或卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢或睾丸组织结构的变化,ELISA试剂盒分析仔鼠血清睾酮（T）、促卵泡素（FSH）及雌二醇（E₂）水平,免疫组织化学方法检测仔鼠睾丸或卵巢Bax、Bcl-2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测仔鼠睾丸StAR、CYP11a或卵巢AMH、Kitlg mRNA表达。结果显示,孕鼠暴露BPA极显著增加了仔鼠死亡率（P<0.01）,显著降低了仔鼠睾丸重（P<0.05）。ELISA检测结果表明,孕鼠暴露BPA极显著降低了仔鼠T（♂）及FSH（♀）含量（P<0.01）,极显著升高了仔鼠（♀） E₂水平（P<0.01）。HE染色结果显示,随BPA剂量增加,仔鼠睾丸组织损伤严重,间质细胞减少;卵巢组织结构随BPA剂量增大,空泡逐渐增多,黄体颗粒数量逐渐减少。免疫组化结果显示,孕鼠暴露BPA增加了仔鼠睾丸或卵巢组织中Bax阳性蛋白表达,减少了Bcl-2阳性蛋白表达,显著降低了雄性仔鼠StAR mRNA表达量（P<0.05）;B、D组雄性仔鼠CYP11a mRNA表达量极显著降低（P<0.01）,而C组CYP11a mRNA表达量极显著升高（P<0.01）;C、D组雌鼠Kitlg mRNA表达极显著降低（P<0.01）,AMH mRNA表达量显著升高（P<0.05）。本试验结果表明,孕鼠妊娠期暴露不同剂量BPA增加了仔鼠死亡率,扰乱了生殖激素平衡和睾丸/卵巢中相关凋亡蛋白及生殖基因表达。     

液相色谱串联质谱法测定猪肉中的安定残留

建立了猪肌肉中安定的高效液相色谱-串联质谱检测方法。用乙腈提取猪肌肉组织中的药物,经HLB固相柱净化,采用正电喷雾离子源,在多反应监测(MRM)模式下测定,三对定性离子对(m/z)分别为:285.4>154.0、285.4>193.0和285.4>257.0,定量离子对m/z为285.4>154.0。结果表明:安定在0.1~100 ng/mL内线性良好,相关系数r为0.998 5。在0.5、2、10μg/kg添加水平下,加标回收率为68.2%~97.6%,变异系数(CV)在2.2%~7.8%之间,检测限为0.1μg/kg,定量限为0.5μg/kg。     

甘肃省白龙江林区森林病害初报

从采集的82份标本中鉴定出48种病害,其中有30种为甘肃省新记录种,1种为国内新记录种;这些病害均分布在海拔2040~2920 m的高原林区;发病树木以云杉、冷杉、柳树、落叶松、小檗为主,其次为华山松、铁杉等.     

基于时序高光谱和多任务学习的水稻病害早期预测研究

水稻病害是影响水稻产量的重要因素之一,水稻病害的早期预测对水稻病害防治至关重要。为了实现水稻白叶枯病害的预测,连续采集了从接种病菌到早期发病共7d的白叶枯病害胁迫下的叶片高光谱图像。利用Savitzky-Golay算法对高光谱图像进行预处理,并利用主成分分析（Principal component analysis, PCA）和随机森林（Random forest, RF）算法提取光谱特征,构建多任务学习(Multi-task learning, MTL)与长短期记忆（Long short-term memory, LSTM）网络融合的预测模型,对水稻病害发病率和潜伏期进行预测,并利用鲸鱼优化算法（Whale optimization algorithm, WOA）对MTL-LSTM模型进行优化。实验结果表明：PCA和RF可以有效地从高光谱图像中提取光谱特征,降低高光谱数据维度,且基于光谱特征构建的预测模型性能优于全波段光谱构建的预测模型性能,建模时间降低约98%。基于时序高光谱构建的预测模型对发病率和潜伏期的预测取得了预期效果,基于前10个特征波长构建的WOA-MTL-LSTM模型取得了最优的预测性能,对发病率和潜伏期预测测试集的R2分别为0.93和0.85,RMSE分别为0.34和2.12,RE分别为0.33%和1.21%。通过WOA算法可以提升MTL-LSTM的预测性能,对发病率和潜伏期预测的R2均提升0.05。研究结果表明RF提取高光谱特征能有效表征全波段光谱,基于时序高光谱的WOA-MTL-LSTM模型可以准确预测白叶枯病害发病率和潜伏期,为水稻白叶枯病害的预防提供了技术支持。     

四季秋海棠炭疽病菌生物学特性及生防因子的筛选

以四季秋海棠炭疽病菌(Colletotrichum truncatum)为试验材料,采用菌落生长法和孢子萌发法,研究了不同培养条件对四季秋海棠炭疽病菌菌落生长和孢子萌发的影响;采用生长速率法研究了14种植物提取物对四季秋海棠炭疽病菌的抑制作用,以期明确该病原菌生物学特性,筛选对其具有抑菌活性的植物提取物,为该病害的防治提供参考依据.结果 表明:最适宜该病原菌菌丝生长的温度为25～30℃,pH 7,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为硝酸钠和甘氨酸.分生孢子萌发的最适温度是30～35℃,pH 6～7.丁香、石菖蒲、蛇床子提取物在2.0 mg·mL-1浓度下对菌丝生长具有较好的抑制作用,菌丝生长抑制率分别为100％、92％和90％,其它植物提取物抑制率在20％～85％.     

周年耕作方式对砂姜黑土农田土壤养分及作物产量的影响

为探明适宜于砂姜黑土农田的周年耕作方式, 提升砂姜黑土农田地力及作物产量, 在冬小麦?夏玉米一年两熟种植制度下, 设置多年定位夏玉米季?冬小麦季免耕?旋耕(对照)、免耕?深耕、深松?旋耕、深松?免耕、免耕?免耕5种周年耕作方式田间试验, 在定位处理的第4个周年研究耕作方式对砂姜黑土农田土壤有机碳含量、土壤养分及其对作物产量的影响。结果表明, 在秸秆全量还田条件下, 与试验开始前相比, 各处理0~20 cm土层土壤有机碳、全氮、速效钾含量均有所增加。与对照相比, 其他处理均增加周年内0~20 cm土层土壤有机碳和全氮含量。免耕?深耕、深松?旋耕、免耕?免耕处理显著增加周年内0~20 cm土层土壤有效磷含量, 而深松?免耕处理显著增加冬小麦开花期和收获期0~20 cm土层土壤有效磷含量, 整个周年内对照在20~40 cm土层土壤的有效磷含量均最低。深松?免耕处理增加周年内0~20 cm土层土壤速效钾含量, 而深松?免耕、免耕?免耕处理20~40 cm土层土壤速效钾含量在夏玉米苗期、大口期、开花期和灌浆期显著高于对照处理。深松?旋耕和深松?免耕处理显著增加夏玉米?冬小麦周年籽粒产量, 增幅分别为7.67%和10.21%。综上所述, 在秸秆全量还田基础上, 深松?旋耕和深松?免耕能够改善土壤有机碳和养分状况, 显著提高周年作物产量, 可作为黄淮区砂姜黑土农田相对适宜的周年耕作方式。     

蛇蛔虫及蛇蛔虫病的研究进展

蛇蛔虫是常见的且严重危害蛇健康的一类寄生虫,呈世界性分布,蛇感染后主要造成胃肠道损伤,影响其消化功能。蛇蛔虫的感染可通过流行病学调查、临床剖检以及粪便检查等方法进行诊断。蛇蛔虫病的治疗主要通过服用磷酸左旋咪唑等咪唑类抗寄生虫药。本文对蛇蛔虫病的病原种类、危害、流行概况、分子鉴定研究现状、治疗与预防措施等方面进行综述,旨在为蛇蛔虫病的研究和防控提供参考。     

沙漠地区农业种植技术初探

沙漠地区在没有造林或造林初期防护效益不显著情况下，农业种植受风沙危害比较严重，提高农业种植产量是我们面临的一道难题。本文对中国林科院沙漠林业实验中心井灌区第四实验场风沙环境和三年来的种植情况进行分析，得出农业防风害的措施有以下几个方面：农作物品种的选择；种植时间的调整；以增加起动风速为目的的各项抗风害措施的采用；以减小风沙流强度和目的的阻沙林和固沙工程的建造。这些措施能有效地减小和防止风沙灾害的发     

提高华山松种子园开花结实量试验研究

通过对贵州平坝华山松种子园开花结实量的调查和对其土壤、针叶养分分析,掌握其低产的原因后,采取施N、P、K肥、B肥、去劣疏伐和修枝整形等增长技术措施,可提高种子园种子单产10%以上.