PCR法克隆紫穗槐4-香豆酸:CoA连接酶全长cDNA

4 香豆酸 :CoA连接酶 (4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶 .该文利用简并寡核苷酸PCR法结合cDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐 4CLAcDNA全长序列 ,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程 .先用简并PCR得到了 4CLA1片段 ,又据此片段设计反向嵌套引物 ,用RACE方法获得未知的 5′和 3′端序列 .所获得的全长 4CLAcDNA ,编码 5 40个氨基酸 .氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的 4CL蛋白 ,含有预计的AMP binding位点、催化反应区和保守的Cys .     

石榴溃疡病害病原学研究

对石榴溃疡病害3菌株所引起的病害症状、病原菌的形态学特征、培养学特性、生理学特性及分子遗传多样性等方面进行比较研究.结果表明:石榴疮痂病与石榴果实上增生型症状的病原菌具有更近的亲缘关系,应为同一病原菌引起,推测该病原菌首先侵染石榴侵染枝干,然后侵染石榴的花萼和果实;而石榴干腐病病原菌主要侵染枝干,是否侵染果实及引起症状特征需要继续进行研究和鉴定.     

姬松茸固体饮料的研究

姬松茸是一种正待开发的药食兼用真菌,因其含有抗肿瘤活性多糖而备受关注。利用现代食品工程高新技术———超微粉技术将姬松茸子实体粉碎,使其组织细胞高度破坏,提高了多糖的溶出率。通过正交实验确定姬松茸固体饮料配方为蔗糖量10%,柠檬酸,糖酸比为33.3∶1。     

杨木前处理对活性染料渗透性的影响

染液在木材中的移动和渗透是木材深度染色的关键.分别采用热水浸提、烧碱、过氧化氢等试剂对染色前的杨木进行染色前处理.实验结果表明:三种方法都可以不同程度提高杨木的染色深度,其中烧碱对提高染液渗透深度影响最大.较优前处理工艺条件为:烧碱用量8 g/L,碱液温度90~95℃,前处理时间2 h.与未进行前处理的试件对照,染料纵向渗透深度提高48.0%,横向渗透深度提高43.7%.     

我国实施森林分类经营中存在的问题

森林分类经营是当前林业界的热点问题之一，国家林业局已将其作为总体推进林业发展的龙头工作和全面推进林业政策的“牛鼻子”工程，但在实施森林分类经营中还存在着一些问题。诸如：林业观念问题、两类林的划分问题、公益林生态效益补偿机制等问题，本文就以上这些问题予以初步探讨。     

硫酸卡那霉素注射液含量测定的不确定度分析

为研究微生物检定法(管碟法)测定硫酸卡那霉素注射液生物效价试验中各因素对结果的影响,采用不确定度分析,将影响因素归纳为称量、稀释、加样、测定、平行试验,量化各不确定度分量,评估各因素的影响因子。结果表明,牛津杯加样体积对测定结果影响最大,提示试验中应尽可能精确控制加样体积。     

饲用酸化剂对1～63日龄黄羽肉鸡生长性能的影响

本试验旨在评估饲用酸化剂对1~63日龄黄羽肉鸡生长性能、肠道损伤和盲肠微生物菌群变化的影响,同时探讨壳寡糖对饲用酸化剂的增效作用。试验采用单因素完全随机区组设计,设对照组(Con.)、饲用酸化剂(Trt.1)和饲用酸化剂+壳寡糖(Trt.2)共3个处理。每个处理5个重复,每个重复50羽。饲养周期为63天。试验结果表明,从零日龄开始持续在黄羽肉鸡日粮中添加饲用酸化剂、饲用酸化剂+壳寡糖后,对1~21d和22~42d阶段黄羽肉鸡生长性能的影响未达显著(P0.05)水平;但在43~63d阶段时,与对照组相比,添加饲用酸化剂、饲用酸化剂+壳寡糖组的耗料增重比分别降低0.11和0.14,具有极大的生产意义;且饲用酸化剂添加组盲肠大肠杆菌/乳酸杆菌值显著(P0.05)低于对照组,饲用酸化剂+壳寡糖添加组盲肠大肠杆菌/乳酸杆菌值显著(P0.05)低于对照组和饲用酸化剂添加组。说明饲用酸化剂可通过维持肠道健康,促进养分消化吸收,从而提高饲料利用率;而壳寡糖在平衡肠道菌群、维持肠道健康方面对饲用酸化剂有增效作用。     

空肠弯曲菌致GBS动物模型的建立

[目的]利用巴马小香猪构建空肠弯曲菌致GBS的动物模型。[方法]选取致人GBS源空肠弯曲菌株,采用3×1012 cfu/m L、3×1011 cfu/m L、3×1010 cfu/m L、3×109 cfu/m L等浓度对4组巴马小型猪灌胃攻毒,每头猪攻毒10m L,同时设立对照组。从第二周开始定期采集组织样及血液样本,通过免疫学检测及组织病理切片判定病变情况。[结果]免疫学检测发现,在16份攻毒组样品中有12份血清中GM1-Ig G抗体检测阳性,阳性检出率为81.25%。但是,并没有显著的攻毒浓度梯度差异。病理组织切片H/E染色显示,抗体阳性试验猪的大脑出现了噬神经元、小血管周围间隙增宽、神经中央染色溶解等现象;切片LFB染色显示,在发病模型动物的小脑白质和腰膨大出现了轻度脱髓鞘现象。[结论]结果表明空肠弯曲菌诱导GBS的浓度在3×109 cfu/m L~3×1012 cfu/m L均可,组织样本及血液采集在攻毒后4~5周较理想。     

四种核酸染料对用LAMP方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的影响

本研究旨在建立一种基于颜色变化的北美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)RT-LAMP检测方法及结果判定方法,方便LAMP技术的现场检测应用。根据Gen Bank中美洲型PRRSV的保守序列设计一套LAMP引物,对反应进行优化后建立了PRRSV LAMP检测方法。对比Dye63、钙黄绿素(Calcein)、SYBR Green I和Picogreen 4种核酸染料对于LAMP反应的适用性。结果显示,只有Calcein、Dye63适于LAMP反应前加入,但对扩增效率均产生一定抑制,造成反应时间延迟:Calcein的延迟作用更强(约10min),Dye63延迟作用较小(约5min)。加入Dye63的LAMP反应灵敏度为2×101拷贝,而加入Calcein的灵敏度要低10倍。经多功能酶标仪对荧光强度的检测,含Dye63的反应阴阳性差异明显,可用于LAMP反应结果的判定。据此建立的基于新型核酸染料Dye63的PRRSV RT-LAMP检测方法操作简单、方便、直观,可大大减少环境污染造成的假阳性。Dye63有望成为继Calcein之后,可用于LAMP反应前加入,反应后闭管判定的一种新核酸染料,方便LAMP检测技术现场应用。     

中东呼吸综合征的流行与研究进展

本文全面介绍了MERS的疾病概况、人间及动物间流行情况,目前该病已经蔓延到全球25个国家,造成1300余人感染、近500人死亡,并有4个国家发现骆驼MERS病例;总结了世界卫生组织（WHO）、世界动物卫生组织（OIE）和联合国粮农组织（FAO）等采取的防控措施,并从病毒来源、能否人际间传播、有效疫苗和药物研制等3个方面对MERS的研究进展进行了概述。目前认为,人类MERS的传染源可能是骆驼, MERS-CoV仅发生了有限的人传人,还没有研制出有效的特异性疫苗和药物。本文还简述了我国的防控情况,并提出了相关防控建议。