猪结合珠蛋白基因的克隆、原核表达及单克隆抗体制备

本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)制备特异性单克隆抗体.以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达栽体pGEX-KG和pET-32a上,转化至E.coli BL21中,IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白.用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠,用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株,制备单克隆抗体.结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B4和3C8.Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性.     

中华鳖致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

对江西省进贤县某中华鳖养殖场送检的2只患病中华鳖进行细菌分离,且对分离的细菌进行培养特性观察、生化特性鉴定、毒力因子检测、毒力基因PCR检测、实验动物攻毒及体外药敏试验。结果表明,从2只中华鳖肝脏分离到3株菌,均为革兰阴性短杆菌,其中体型稍大中华鳖2株,体型稍小中华鳖1株;经过实验动物感染试验得出3株菌都为强毒力致病菌;通过生化鉴定、毒力因子及PCR检测确定为嗜水气单胞菌;体外药敏试验结果显示,3株菌对头孢曲松都高度敏感,对利福平、甲氧苄啶、氨苄青霉素都不敏感。     

伯氏致病杆菌SN269发酵液中madumycin Ⅱ的分离与纯化

利用硅胶柱层析、凝胶柱层析技术从伯氏致病杆菌SN269发酵液中分离得到化合物D3。通过核磁共振波谱、质谱及旋光度等分析,并结合相关文献,将其鉴定为madumycinⅡ。采用菌丝生长速率法测定了madumycin Ⅱ对植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:madumycin Ⅱ对辣椒疫霉病菌Phytophthoa capsici和番茄灰霉病菌Botrytis cinerea菌丝生长具有明显的抑制作用,其EC50值分别为35.32和35.40 mg/L。     

白来航快、慢羽鸡TVB基因型与产蛋性能的关联分析

为探讨TVB易感-抗性基因型与产蛋性能的相关性,以白来航快、慢羽鸡为试验材料,采用直接测序的方法测定TVB基因型,同时分析TVB不同基因型与生产性能的关系.结果表明:白来航慢羽群体中,禽白血病易感等位基因TVB*S1的频率为0.54,抗B、D、E亚群等位基因TVB *R的频率为0.45,抗E亚群等位基因TVB*S3的频率为0.01;白来航快羽群体中,禽白血病易感等位基因TVB*S1的频率为0.54,抗B、D、E亚群等位基因TVB*R的频率为0.46,而抗E亚群等位基因TVB*S3的频率为0.经SAS GLM分析,检测的白来航快、慢羽两群体中,TVB易感-抗性基因型之间的42周产蛋数、开产日龄、开产蛋重、开产体重及40周龄蛋重等指标均无显著差异(P＞0.05).因此,TVB各基因型群体之间的产蛋性能无差异.     

中国东北松嫩平原丹顶鹤繁殖种群调查(英文)

自2004年至2008年,在白鹤GEF项目的支持下,全国鸟类环志中心于每年5月在东北松嫩平原的4个国家级自然保护区,即黑龙江的扎龙国家级自然保护区、内蒙古的科尔沁国家级自然保护区、吉林的向海和莫莫格国家级自然保护区,开展了繁殖水鸟的地面调查。调查的目的在于了解各个保护区繁殖水鸟的分布和种群动态。丹顶鹤(Grus japonensis)是本调查活动的重要目标物种。通过5年的调查,了解到松嫩平原的扎龙保护区是目前丹顶鹤最为重要的繁殖地,逾90%的繁殖丹顶鹤种群分布在扎龙保护区,但种群数量变动较大,变动幅度介于112–275只之间。良好的芦苇(Phragmites australis)生境是丹顶鹤的繁殖种群保持稳定和增长的首要条件。通过给湿地供水可以缓解丹顶鹤繁殖栖息地的快速退化,但科学合理的供水机制是保证丹顶鹤繁殖成功的前提。     

ACVR1基因对京海黄鸡生长和繁殖性状的遗传效应研究

以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP和DNA测序技术对ACVR1基因外显子多态性进行研究。结果表明,ACVR1基因20190 bp处发生G→A突变,检测到AA、AB和BB 3种基因型。A等位基因频率为0.9075,B等位基因频率为0.0925。基因型与生长和繁殖性状的关联性分析发现,BB基因型鸡的开产体重极显著高于AA基因型鸡(P<0.01),AA基因型鸡300日龄体重显著高于BB基因型鸡(P<0.05)。由此初步推断,ACVR1基因可能对京海黄鸡的产蛋和发育有一定的影响,A为体重的优势基因,B为产蛋的优势基因。     

云南中亚热带禾本科高产饲草引种试验

在云南中亚热带试验点,对8个禾本科饲草栽培种进行引种栽培试验,结果表明墨西哥类玉米、8493墨西哥类玉米、大力士甜高粱、先锋高丹草和M-8IE甜高粱5个栽培种干物质产量高,适应性强,适宜在相似气候条件地区推广种植.     

发酵花生壳对育肥猪生产性能、胴体性状、肉品质及经济效益的影响

本试验旨在研究发酵花生壳对育肥猪生产性能、胴体性状、肉品质及经济效益的影响。选用100头50 kg左右、健康的杜×长×大三元杂交育肥猪,随机分成5组,每组4个重复,每个重复5头猪。对照组饲喂玉米—浓缩料型基础日粮,试验1~4组分别饲喂在基础日粮中添加10%发酵花生壳、20%发酵花生壳、30%发酵花生壳、15%发酵玉米秸秆的试验日粮,试验期66 d。结果表明,对照组及试验2、3组平均日采食量显著高于试验1、4组(P<0.05),对照组和试验3组平均日增重显著高于试验1、4组(P<0.05),各组间料重比差异均不显著(P>0.05),试验1、2、3、4组腹泻频率均极显著低于对照组(P<0.01);各组间胴体质量、屠宰率、背膘厚度、眼肌面积差异均不显著(P>0.05),试验2组瘦肉率显著低于对照组和试验1组(P<0.05);各组间大理石纹、肉色、嫩度、肌内脂肪、失水率及熟肉率差异均不显著(P>0.05),但试验1、2、3、4组失水率低于对照组,差异不显著(P>0.05);根据经济效益分析表明,在育肥猪从50~90 kg阶段,对照组每头猪平均盈利47.60元,试验1、2、3、4组每头猪平均盈利分别为56.40、60.40、78.80、58.80元,其中试验3组最优。综合上述的分析结果可知,发酵花生壳对育肥猪生长性能、胴体性状、肉品质无不良影响,且能有效地降低育肥猪的腹泻频率,提高猪肉的系水力,适当的添加可有效地降低饲养成本,提高经济效益。     

驯鹿生长素Ghrelin cDNA的克隆

从驯鹿皱胃组织中提取总RNA,根据已发表的驯鹿生长素Ghrelin基因序列设计并合成引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得了300 bp的片段,重组到pBlueselect T载体,经限制性内切酶谱分析和DNA序列测定分析,确认PCR产物为Ghrelin cDNA,为进一步研究Chrelin在驯鹿体内的分布及营养因素等对其基因表达的影响奠定基础。     

应用核酸斑点杂交法检测鹅细小病毒(GPV)

利用鹅细小病毒 (GPV)核酸探针 ,设计并建立了核酸斑点杂交法 ,用以检测 GPV核酸。该方法特异性与敏感性均较好 ,其敏感度可达 3pg。应用该方法对 4例病变典型的小鹅瘟患鹅组织器官进行检测 ,结果表明 ,患鹅脏器中 ,小肠、心、肝、胰、脾组织含毒量较高 ,其中小肠组织含毒量最高 ,而脑组织中含毒量较低。应用琼脂扩散试验验证了核酸斑点杂交法的检测结果。