致犊牛腹泻肠道原虫的分子生物学鉴定

为确定导致犊牛腹泻的寄生原虫种类及分子学特性,利用基于隐孢子虫核糖体小亚基RNA、蓝氏贾第虫β-贾第素和毕氏肠微孢子虫内转录间隔区的分子生物学技术对腹泻犊牛的粪便样品进行鉴定。结果表明,引起犊牛腹泻的寄生原虫包括微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫、瑞氏隐孢子虫、E型蓝氏贾第虫和多种基因型的毕氏肠微孢子虫,并且存在多种原虫混合感染。说明原虫是引起犊牛腹泻的重要病原,畜牧业临床中应加强原虫病的防控。     

生物共生理论对构建和谐社会的科学指导意义

在人类居住的“地球村”里，生存着多种多样的生物，他们之间存在着千丝万缕的奇妙关系，生物共生就是这些关系之一。分析生物共生理念的产生根源，回顾生物共生理论的发展轨迹，对目前人类认识的生物共生现象进行了归类阐述，提出生物共生理论资源对构建和谐社会具有科学的指导意义。     

广西猪瘟流行毒株全基因组的克隆与序列分析

参考已发表的猪瘟病毒(CSFV)Shimen株、HCLV株、Paderborn株的核苷酸序列，设计并合成11对引物。应用RT—PcR技术，成功地分11个片段扩增了CSFV广西流行毒株GXWZ02的全基因组，将这11个基因片段克隆，并测定了其核苷酸序列。应用计算机生物软件Vector NT1将11个基因片段进行拼接。确认CSFV GXWZ02株全基因组序列的长度为12296个核苷酸(GenBank收录号AY367767)。将GXXZ02株与国内外已发表的Slhimen、HCLV、39、Brescia、Eystrup、Glentorf、Alfort187、Pader190rn、CS、ALD、GPE、P97、LPC毒株进行全基因组核苷酸序列和推定的氨基酸序列比较，核苷酸同源性分别为85．4％、84．6％、88．7％、85．7％、85．7％、85．3％、85．6％、95．3％、85．7％、85．7％85．4％、83．4％、84．3％，推定的氨基酸同源性分别为92．6％、91．7％、94．2％、93．1％、92．9％、92．3％、93．0％、97．7％、92．6％、93．0％、92．6％、90．5％、90．6％。GXWZ02与Shimen、HCLV的全基因组序列及推定的氨基酸序列有明显差异，表明GXWZ02株在遗传性和抗原性上发生了较明显的变化。系统发育树分析，所比较的14株CSFV被分为2个群：GXWZ02、Paderborn和39这3个毒株被归为群Ⅰ，其余的11个毒株被归为群Ⅱ，GXWZ02与Paderborn的亲缘关系最接近。将GXXZ02与Shimen、HCLV基因组中单个基因分别进行核苷酸及推定的氨基酸序列同源性比较，结果显示，基因E^ms、E2、P7、NS2、NS5A的遗传变异程度大。而NS3、NS4A、NS4B的遗传性则相对保守。     

不同咸蛋腌制温度对禽流感毒灭活的影响

经人工接种H9亚型禽流感病毒(AIV)的鸭蛋,分别在12℃、22℃和32℃条件下按常规方法腌制于饱和盐水中,同时以置饱和盐水中的禽流感病毒和未经处理禽流感病毒样品作为对照,通过MDCK细胞培养、间接免疫荧光方法定期进行禽流感病毒毒力测定,结果在12℃、22℃和32℃条件下腌制鸭蛋中的禽流感病毒分别于49天、27天和4天失去毒力,置饱和盐水中的禽流感病毒分别在27天、9天和2天失去毒力,而未经处理的禽流感病毒分别在92天、29天和17天失去毒力;不同试验温度条件下,以荧光RT-PCR检测腌制鸭蛋和对照样品中的禽流感病毒,在100天后仍可检出病毒核酸(Ct<30)。以上检测结果表明,在腌制鸭蛋时于常温下置饱和盐水腌制40天以上的传统咸蛋生产工艺,可使禽流感病毒完全失去毒力,腌制的鲜咸蛋携带或传播禽流感病毒的风险极低或不存在风险。     

锌贝克、崇高和易斑净对柱花草炭疽病的防效

柱花草炭疽病Stylo anthracnose是严重影响柱花草Stylosanthes guianensis生产的主要病害之一,药剂防治是减轻该类病害的有效措施。试验结果表明：锌贝克、崇高和易斑净对炭疽菌菌落和分生孢子都有抑制作用, 其中锌贝克、崇高随着稀释倍数的增加菌落抑制率降低。药剂处理后5 d,易斑净3个处理梯度的抑菌率均达到和接近100%;锌贝克700倍的抑菌率达到95.45%,崇高10 000倍的药效达到82.13%;随着3种药剂稀释倍数的增加,孢子抑制率降低,在早期的12 h锌贝克700倍、崇高10 000倍、易斑净1 500倍药液处理完全抑制了孢子的萌发。但到了36 h,除易斑净1 500倍仍保持对孢子萌发的完全抑制外,锌贝克和崇高各处理梯度的抑制率均下降,其中崇高的下降幅度最大。盆栽药效试验中3种杀菌剂的稀释倍数均与防效成反比。处理后第7天锌贝克500倍防效为40.20%。易斑净1 000倍防效为36.62%。崇高7 000倍处理的防效达到22.15%。杀菌剂盆栽试验的防效明显低于室内试验.     

河西走廊紫花苜蓿干草调制技术研究

紫花苜蓿(Medicago stativa L.)是为建立河西走廊地区苜蓿干草调制技术,于2004年在河西走廊地区以种植3年的紫花苜蓿为材料,对第2茬苜蓿进行了刈割时期、晾晒时间、打捆时间、翻晒对紫花苜蓿干草质量的影响研究.结果表明:苜蓿干草调制成功与否主要决定于晾晒时间、翻晒和打捆时间,而调制的苜蓿干草质量主要决定于刈割时期和打捆时间;河西走廊紫花苜蓿在初花期刈割,晾晒28 h-32 h,并进行翻晒作业,16:00-17:30打捆,避开过早或过晚打捆,可获得质量好、营养价值较高并可长期贮存的干草产品.该技术的提出对我国北方地区调制优质苜蓿干草提供了科学依据.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒A06株单克隆抗体的制备及鉴定

用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)A06株病毒抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合.经间接ELISA方法筛选,有限稀释法克隆,获得4株稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3D12、4E10、6E2和7G6.其细胞培养上清效价分别为1:256、1:512、1:512和1:256,小鼠腹水效价分别为1:1.024×106、1:2.048×106、1:1.024×106和1:2.048×106.亚型鉴定表明,3D12、4E10、6E2和7G6分别为IgG2b、IgG2b、IgG1和IgG2a.ELISA检测结果显示,4种PRRSV单克隆抗体仅与PRRSV反应,不与其他病毒反应,表明均为抗PRRSV的型特异性单克隆抗体.对单克隆抗体腹水液进行IgG提取纯化,SDS-PAGE电泳验证,仅出现两条清晰条带,无杂带出现,证明纯化效果较好.这4种单克隆抗体的获得,为建立PRRSV检测方法提供了强有力的工具.     

共轭亚油酸对五龙鹅生长发育和脂质代谢的影响

1日龄五龙鹅192只，随机分为4个处理，分别饲喂共轭亚油酸（CLA）水平为0．0、5．0、15．0和25．0g／kg的日粮，通过测定不同生长阶段的体增重（BWG）、采食量（FI）、料重比（F／G）、腹脂率（AFP），以及与脂质代谢有关血清生化指标，研究不同水平CLA日粮对五龙鹅生长发育和脂质代谢的影响。结果表明：在日粮中分别添加5．0g／kg和15．0g／kgCLA，对五龙鹅BWG无显著影响（P〉0．05），能够显著降低FI和F／G（P〈0．05）；显著降低AFP和血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、极低密度脂蛋白（VLDL）含量（P〈0．05或P〈0．01），增加了血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量和高、低密度脂蛋白胆固醇之比（HDL-C／LDL-C）（P〈0．05）。日粮中添加25．0g／kgCLA，极显著地降低了FI和AFP（P〈0．01），对血清TG、TC、HDL-C、VLDL含量和HDL-C／LDL-C的影响差异不显著（P〉0．05）。适宜添加CLA对五龙鹅的生长发育和脂质代谢具有很好的促进和调节作用，即在五龙鹅的整个生长期内，CLA添加量不高于15．0g／kg时，不但能在不影响BWG的前提下提高饲料利用率，而且能够通过降低脂肪沉积和调节脂质代谢起到预防动脉粥样硬化的作用；但过多添加CLA（25．0g／kg）会使五龙鹅的生长发育受到抑制。     

瘤胃微生物生态研究方法评述

瘤胃微生物生态研究方法主要经历了微生物纯培养、混合培养、微生物分子生物学技术[(从瘤胃中提取DNA,进行PCR-16S rDNA(rRNA)技术]、变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术),在不同程度上揭示了瘤胃微生物群落丰富的多样性和生态功能.但由于各种方法本身的局限性,限制了人类对瘤胃微生物的全面了解,现代生物技术和传统微生物研究方法的配合将为瘤胃微生物生态研究提供较好的前景.     

玉米高直链淀粉基因ae的特异性PCR鉴定

根据ae基因序列设计21对引物,对4个常规玉米自交系和4个具有aeae纯合基因型的高直链淀粉玉米自交系及其杂交种进行特异性PCR鉴定。结果表明,引物8可将具有AeAe基因型的普通玉米自交系与具有aeae基因型高直链淀粉玉米区分开来,为将普通玉米自交系快速改良成高直链淀粉玉米自交系提供了一种有效的分子标记检测技术。