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猪肺炎支原体黏附因子基因R1R2区的克隆及表达 总被引:4,自引:0,他引:4
根据GenBank登录的猪肺炎支原体232株P97基因和J株黏附因子基因设计了1对引物,以我国猪肺炎支原体Z株(强毒株)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后,重新设计了1对带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物,并经引物的定点突变,PCR扩增了Z株黏附因子的R1R2区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体pET-32(a) 中。该重组质粒经酶切鉴定后,将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,37℃下经IPTG诱导表达,得到相对分子质量约29000的融合蛋白,表达量约为11%。 相似文献
43.
小鹅瘟PCR诊断方法的建立和初步应用 总被引:11,自引:0,他引:11
根据发表的鹅细小病毒B株VP3基因序列 ,设计合成了 1对寡聚核苷酸引物。以国内分离的小鹅瘟病毒为摸板 ,筛选了 (PCR)最佳反应条件 ,并进行了敏感性、特异性和初步应用试验。结果表明 ,在 4 0 μL体积中 ,PCR最佳系统组成为 2uTaq酶、0 5mol/LdNTP和 2 0 pmol引物 ;最佳反应参数为 96℃变性 4 0s ,5 4℃退火 1min ,72℃延伸 1min ,30个循环。本方法可检出 2 5× 10 -1 5EID50 小鹅瘟病毒 ,并且仅能从小鹅瘟病毒的鹅胚培养物中扩增出与设计值大小相同的 375bp核苷酸片断 ,对照病毒扩增结果为阴性。通过对 6份临床病料的检查 ,2份呈阳性 ,其中 1份来自有典型小鹅瘟症状的雏鹅 ,1份来自无典型小鹅瘟症状的雏鹅。由此说明 ,本试验所建立的诊断小鹅瘟的PCR方法具有潜在的临床应用价值 相似文献
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45.
本研究对胚胎质量、胚胎移植数量、胚胎发育阶段、冷冻方法、移植方法及饲养管理水平等因素对移植产羔率的影响进行研究,以提高绵羊胚胎移植效率。结果表明:采用1.5mol/L乙二醇做冷冻保护剂对胚胎进行常规冷冻,冻前A级胚胎冷冻/解冻后可用胚率、存活率、降级率均高于B级,差异极显著(P<0.01)。移植1枚冷冻解冻后A级、B级或2枚(A+B)胚胎的受体移植产羔率分别为44.48%、46.84%和44.81%。经χ2检验分析,三者之间无显著差异(P>0.05)。移植双胚的受体双羔率为22(%53/241),以胚胎为单位计算,产羔率仅为33.40%。A级囊胚和桑椹胚的产羔率之间无显著差异(P>0.05)。1.5 mol/L乙二醇常规冷冻保存的体内胚胎移植产羔率高于EFS40玻璃化冷冻保存,但经统计学分析,二者无显著差异(P>0.05)。子宫手术移植和腹腔内窥镜法子宫移植之间产羔率不具统计学差异(P>0.05)。在牧场条件下大规模移植的平均产羔率为43.95%,范围在20% ̄70%之间,受体饲养管理水平对绵羊移植产羔率有较大影响。 相似文献
46.
维生素A水平对生长猪生产性能、肝脏维生素A含量和血清免疫参数的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
试验研究饲粮添加不同水平维生素A(VA) (0、1300、2600、5000、10000、15000IU/kg)对22 -50kg生长猪生产性能、胴体品质、胴体无脂瘦肉增重、肝脏和血浆中VA含量、血清免疫参数的影响。结果表明 ,添加VA1300 -10000IU/kg 提高了日增重 (P>0.05)、极显著地降低料重比 (P<0.01) ;但VA添加水平从1300IU/kg增加至10000IU/kg,料重比显著提高 (P<0.05) ,采食量也极显著提高 (P<0.01)。各组屠宰率、瘦肉率、脂肪率、背膘厚、胴体瘦肉成分都无显著差异 (P>0.05) ,眼肌面积则随VA水平的升高而趋于增大(P>0.05)。胴体瘦肉和无脂瘦肉日增重在添加VA1300IU/kg 和10000IU/kg两组间很接近 ,而且优于其它组 (P<0.05)。随着VA水平的提高 ,肝脏中VA含量极显著提高 (P<0.01) ,至添加VA10000IU/kg组最高 ,之后略下降 ;添加VA有使血浆中VA含量升高的趋势 (P>0.05)。各组血清中IgG、IgA、IgM含量都无显著差异 (P>0.05) ,添加VA使T淋巴细胞中CD3+ 和CD8+ 亚群比例趋于升高 (P>0.05),随着添加VA水平提高 ,血清T淋巴细胞中CD4+/CD8+比值趋于下降 ,至添加VA10000IU/kg 组最低 ,在VA15000IU/kg 组又明显上升 (P>0.05)。以肝脏中VA含量为指标 ,生长猪VA适宜水平为在基础饲料上添加10000IU/kg ,但根据生产性能等其它指标 ,添加1300IU 相似文献
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结合重庆市地形地貌特点和山区农业面源污染发生的因子,提出山区农业面源污染的防治对策。一方面必需结合当地的自然环境条件和经济发展水平提出农业面源污染的防治规划;另一方面必需结合生态农业建设这一主线,使物质、能量在生态系统内良性循环。紧紧抓住产生农业面源污染源的因子——化肥、农药、农田秸杆、畜禽粪便、农村生活废物等,提出科学的防治和减少途径。 相似文献
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本文从吉林省荒地资源的实际出发 ,在荒地资源生态适宜性评价基本理论的指导下 ,采用地理信息系统方法 ,对吉林省荒地资源进行了生态适宜性评价。通过空间数据和属性数据的融合、分析、处理 ,可以直观获得荒地资源的生态适宜度等级 ,从而提高评价效率 ,为荒地资源的合理开发利用提供科学依据。 相似文献