猪结合珠蛋白基因的克隆、原核表达及单克隆抗体制备

本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)制备特异性单克隆抗体.以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达栽体pGEX-KG和pET-32a上,转化至E.coli BL21中,IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白.用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠,用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株,制备单克隆抗体.结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B4和3C8.Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性.     

宽幅机械直播对黏土地稻茬小麦出苗质量与产量的影响

苏北黏土地区光温资源不足,为抢稻茬小麦积温、提高播种出苗质量、控本增效,开展了宽幅机械直播对小麦生长发育与产量的影响试验.结果表明:宽幅机械直播处理的浅播(2 cm以内播种深度)比例、出苗率、3叶期单株分蘖和基本苗均远高于常规复式播和履带播,宽幅机械直播处理的稻茬小麦产量(8731.5 kg/hm2)分别较常规复式播和履带播高216.0、892.5 kg/hm2,因此宽幅机械直播更利于提高稻茬小麦播种和出苗质量,并能通过降低播种量获得适宜基本苗,改善群体结构,从而改善产量结构,提高稻茬小麦产量.相对于常规复式播和履带播,宽幅机械直播播幅分别高2.2倍、3.6倍,作业成本分别降低195、270元/hm2.因此,采用宽幅机械直播能提高作业效率,达到稻茬麦抢时早播的目的,并能进一步降低机械作业费,实现控本、增产、提质、增效的目标.     

ELISA法对禽蛋中氯霉素残留量检测

试样中残留的氯霉素与氯霉素酶标记物共同竞争氯霉素抗体,形成有酶标记或无酶标记的抗原抗体复合物而被吸附于微孔底板。用酶标仪在波长450 nm处测定吸光度,根据吸光度得出样品中氯霉素的残留量。对禽蛋中氯霉素残留量进行测定,并对其加标回收率、再现性、重复性进行了分析研究,均能够达到国际氯霉素残留量的检测要求。     

印度农业基础设施建设的经验及其启示

印度的农业生产条件比我国要恶劣的多,但也正是因为印度积极加强农业基础设施建设,才在农业的很多方面超越了中国。印度农业设施建设的基本经验,对于我国加快社会主义新农村建设,促进农业向集约化现代化转变提供了极其重要的借鉴和启示。     

Genetic Analysis and Mapping of TWH Gene in Rice Twisted Hull Mutant

A mutant with twisted hulls was found in a breeding population of rice (Oryza sativa L.). The mutant shows less grain weight and inferior grain quality in addition to twisted hulls. Genetic analysis indicated that the phenotype of mutant was controlled by a single recessive gene (temporarily designated as TWH). To map the TWH gene, an F2 population was generated by crossing the twh mutant to R725, an indica rice variety with normal hulls. For bulked segregant analysis, the bulk of mutant plants was prepared by mixing equal amount of plant tissue from 10 twisted-hull plants and the bulk of normal plants was obtained by pooling equal amount tissue of 10 normal-hull plants. Two hundred and seven pairs of simple sequence repeat (SSR) primers, which are distributed on 12 rice chromosomes, were used for polymorphism analysis of the parents and the two bulks. The TWH locus was initially mapped close to the SSR marker RM526 on chromosome 2. Therefore, further mapping was performed using 50 pairs of SSR primers around the marker RM526. The TWH was delimited between the SSR markers RM14128 and RM208 on the long arm of chromosome 2 at the genetic distances of 1.4 cM and 2.7 cM, respectively. These results provide the foundation for further fine mapping, cloning and functional analysis of the TWH gene.     

鸡冠花新品种‘彩虹鸡冠花’

‘彩虹鸡冠花’是从‘早水鸡冠花’航天诱变的种子后代中选育出的新品种。株高33.37 cm,冠幅25.23 cm,花序枝8.75条,穗状花序鸡冠状,出冠整齐一致,花冠排列平整,冠长8.17 cm,冠宽4.95 cm,冠色紫红,花期长,达74 d以上。群体整齐性好,适合夏季露地栽培。     

皱纹盘鲍人工育苗的初步研究

为探讨近三十年来我国皱纹盘鲍养殖模式对群体遗传结构产生的影响,利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基 (COⅠ)基因和细胞色素b (Cytb)基因分析了定殖漳州的群体、大连培育蓬莱越冬群体、荣成培育福建越冬群体及长山列岛 (砣矶岛、大钦岛、南隍城岛)皱纹盘鲍群体的遗传多样性与群体遗传结构。结果显示,在259个个体730 bp的COⅠ序列片段中检测到48个变异位点和30个单倍型,6个群体的单倍型多样性为0.586~0.897,核苷酸多样性为0.0056~0.0081。259个个体730 bp的Cytb序列片段中检测到59个变异位点和32个单倍型,6个群体的单倍型多样性为0.605~0.909,核苷酸多样性为0.0077~0.0120。基于COⅠ和Cytb基因的群体间F_st值以及AMOVA结果表明,绝大部分群体之间存在显著的遗传分化,并且遗传变异主要来源于群体内。现行的皱纹盘鲍北鲍南养模式加强了不同群体之间的基因交流,使不同遗传背景的种群二次接触,导致皱纹盘鲍6个群体均具有较高的单倍型多样性和核苷酸多样性;而各养殖群体中的不同选育条件则可能是造成显著遗传分化的重要原因。本研究对分属南北沿海的6个皱纹盘鲍群体的遗传评估将为我国皱纹盘鲍资源的合理利用以及养殖模式对遗传结构的影响提供科学依据。

     

漂白紫胶固定床干燥动力学研究

研究了在固定床干燥条件下,不同温度时漂白紫胶中含水率的变化情况,建立了固定床干燥条件下的拟合方程.实验结果表明,预测值和实测值的一致性较好,所建立的数学模型可以用于描述该条件下漂白紫胶的干燥.     

猪脐静脉血管内皮细胞的分离及体外培养研究

为建立一种操作简单并且能获得大量猪血管内皮细胞的分离培养方法,本研究采集新生健康长白猪脐带,取其脐静脉血管,灌注0.1%的Ⅰ型胶原酶,于37℃水浴消化10 min后收集内皮细胞,培养于含20%胎牛血清的M199培养基中,长满单层后用胰酶消化传代培养。并对培养的细胞形态学、相关抗原和其他特征以及对病毒的易感性进行鉴定。结果表明,Ⅰ型胶原酶消化后可获得大量内皮细胞,细胞培养后的形态学观察显示细胞贴壁生长良好,呈典型的铺路石状排列;第Ⅷ因子相关抗原和细胞摄取乙酰化低密度脂蛋白均呈阳性,内皮细胞比率可高达100%。传3代后的生长曲线显示细胞传代后延迟期小于1 d,对数生长期约3 d,第5 d进入平台期,第7 d开始脱落死亡。病毒感染试验表明所获得的内皮细胞对猪瘟病毒高度易感,病毒生长与常用的PK-15没有区别。上述研究结果表明本研究建立的血管内皮细胞分离培养方法简便有效,为大量制备原代血管内皮细胞提供了可靠的方法。     

禽白血病病毒J亚群诱导蛋鸡群多种肿瘤

2009年8月,山东泰安某海兰褐商品蛋鸡场,开产后产蛋率只有60％～70％,31周龄时,死亡率突然增加,最高达20％.患病鸡经大体剖检、病理组织学、PCR和免疫组织化学检测确诊为J亚群禽白血病.病理组织学检测发现送检鸡除了髓细胞瘤外,还存在明显的纤维肉瘤、组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤等肿瘤.纤维肉瘤单独存在,组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤分别和髓细胞瘤混合存在,本文详细描述了各肿瘤的组织学特点.ALV-J从肉种鸡传向商品蛋鸡后引起肿瘤谱扩展的原因和机制值得进一步研究.