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通过构建鸡α干扰素真核表达载体,以获得能够表达鸡α干扰素的酵母工程菌株。首先根据GenBank公布的鸡α干扰素基因序列设计上、下游引物,以略阳乌鸡基因组DNA为模板,PCR扩增鸡α干扰素基因片段。然后,利用基因重组技术将鸡α-干扰素基因插入真核表达载体,通过菌落PCR和DNA测序确定目标载体,构建成功后转化至酿酒酵母AH109,再通过营养缺陷培养、质粒提取和PCR鉴定带JMB440-ChIFN-α载体的重组酵母菌株。最终通过酵母培养、总蛋白收集、SDS-PAGE电泳和Western blot等,确定鸡α干扰素基因能够与酵母菌株重组,并表达α干扰素,蛋白条带大小约为23ku,与预期结果一致,表明成功构建了表达鸡干扰素基因的工程酵母菌株。 相似文献
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本研究旨在选择性能优良的乳酸菌表达载体,为后期研发新型乳酸菌活菌疫苗奠定基础。试验对诱导型和组成型表达的2种侵入型乳酸菌NC8-pSIP409-FnBPA和NC8-pLc23-FnBPA的生物学特性进行研究,从酸耐受性、胆盐耐受性、生长曲线、质粒稳定性、抑菌试验以及药敏试验这6个方面进行鉴定。结果表明,这2种乳酸菌在pH为2.5的酸应激条件下,存活率均达到125%,在质量分数为0.5%的高胆盐溶液中,存活率高达200%。2种类型的乳酸菌均能在9 h时达到平台期,生长性能优良,其中组成型表达菌株NC8-pLc23-FnBPA达到平台期时的D600 nm值为1.3,高于诱导型表达菌株,生长性能优于诱导型菌株。pH生长曲线结果表明,乳酸菌产酸性能无明显性差异,在10 h时,溶液中的pH均降为3.5,产酸能力较强。2种类型乳酸菌的菌体和上清对常见致病菌均有不同程度的抑菌作用,其中菌体的抑菌效果优于上清,且表达FnBPA蛋白的组成型菌体的抑菌效果强于诱导表达型。2种侵入型乳酸菌均对绝大多数的抗生素敏感性高,具有一定的生物安全性。2种类型的乳酸菌的质粒稳定性均>90%。本试验发现诱导型乳酸菌NC8-pSIP409-FnBPA与组成型乳酸菌NC8-pLc23-FnBPA具有相似的生物学特性,其中组成型乳酸菌表达蛋白更方便,无需添加诱导肽便可自主表达,更适合作为新型乳酸菌活菌疫苗的受体菌株,为后期乳酸菌活菌疫苗的研制提供便利。 相似文献
894.
拓展Faulkender 和Wang(2006)模型,引入公司综合治理水平变量,分析了公司综合治理水平和营运资本对公司价值的影响.运用我国A股市场2008~2013年数据进行实证,证实公司综合治理水平与营运资本对企业价值影响显著;边际营运资本价值小于边际现金价值,企业在现有营运资本水平下增加营运资本投资,将降低企业超额收益率,减少企业投资价值;商业性企业比工业性企业、高治理效率企业比低治理效率企业、受融资约束企业比不受融资约束企业具有更高的边际营运资本价值. 相似文献
895.
针对在计算两个非弱整合市场之间的最大定价误差下界时出现的数据水平扭曲问题,基于收缩方法,通过改进数据协方差矩阵的估计值得到收缩估计量,得到两个非弱整合市场的最大定价误差的更精确的下界。此理论可以广泛应用于多个市场间整合度的评估,进而提高定价的准确性。 相似文献
896.
为了研究高原地区不同月龄的藏绵羊生理生化指标的变化规律,试验以饲养于四川省红原县的藏绵羊为研究对象,按生长发育阶段测定其生理生化指标。结果表明:3~24月龄的藏绵羊呼吸、体温和心率的范围分别为(24.60±6.33)~(50.30±21.18)次/min、(39.14±0.28)~(39.61±0.35)℃和(91.00±13.27)~(109.10±6.82)次/min;藏绵羊3,6,15,18月龄白细胞计数(WBC)、血细胞比容(HCT)和红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)等指标相对低于9,12,21,24月龄,3,6,15,18月龄红细胞计数(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)等指标相对高于9,12,21,24月龄,血红蛋白含量(HGB)和血小板计数(PLT)两指标不呈现月龄变化;谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)和总胆固醇(CHOL)等指标在21月龄时达到最大值,碱性磷酸酶(ALKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、血糖(GLU)、胆碱酯酶(PCHE)等指标在3月龄时达到最大值,总钙(CA)、总蛋白(TP)、谷草转氨酶(AST)等指标分别在9,18,24月龄时达到最大值。 相似文献
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899.
针对猕猴桃产业联盟链交易中金额与身份的双重隐私保护问题,提出一种基于+HomElG零知识证明(+HomElG zero knowledge proof,+HomElG-ZKProof)和SM2的猕猴桃产业联盟链隐私交易方案。首先,转账方利用+HomElG加密交易金额后将其发送给接收方,接收方基于SM2签名确认交易后发送给转账方;其次,转账方基于+HomElG-ZKProof对交易金额相关密文生成零知识证明证据,基于SM2可链接环签名对交易金额相关密文和交易双方身份分别生成环签名,与接收方SM2签名一起经系统层Raft共识打包上链;然后,由监管节点验证SM2签名、两次环签名及链接性后确认交易双方身份,用户节点间在应用层使用PBFT共识验证交易金额相关密文、环签名及交易金额相关零知识证明证据后确认交易的有效性;最后,由监管节点将有效交易区块编号经系统层Raft共识上链并更新账户余额。分析表明,该文方案具有抗篡改攻击、抗公钥替换攻击、抗假冒攻击以及匿名性,安全性较高;测试结果表明,该... 相似文献
900.
一次降雪的积雪密实化过程研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对呼和浩特市冬季一次降雪后积雪厚度和积雪密度两个指标的持续测量,研究了观测期18d内的积雪密实化过程,分时段和观测时间点对两个指标的变化过程进行对比分析.结果表明:比较发现积雪厚度具有更好的阶段变化特征,因此依据积雪厚度划分法,将积雪密实化过程分为剧烈变化期(前24h)、快速变化期(24h-48h)和稳步发展期(48h之后)三个阶段.其中剧烈变化期和快速变化期分别完成整个积雪密实化过程的52.63%和12.17%,说明积雪在前期较短时间内快速密实;短期内不同观测时间点的积雪密度由于受气温的主要影响出现小幅波动,14:00测得的积雪密度值最高,8:00和20:00差别不大.相关研究结果可为季节性积雪区积雪资源的估算与利用提供理论依据. 相似文献