养猪小区粪便资源化处理工艺设计

影响我国养猪小区健康发展的关键问题是养猪小区的环境控制,降水、污水、粪便混合排放,加剧了养猪小区的环境污染,使粪便资源化处理更加困难。根据现代养猪生产工艺流程,利用工程技术手段,设计了一个现代化示范型养猪小区粪便资源化处理工艺,首先解决天然降水与污水混合排放问题,其次实现污水与粪便有效分离,第三步通过充氧发酵、搅拌干燥最终实现养猪小区粪便资源化开发利用,解决捆扰我国养猪小区健康发展的环境控制问题。     

胡芦巴粉对肉仔鸡生长性能、肉品质、免疫器官指数及血清抗氧化和生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平胡芦巴粉对肉仔鸡生长性能、肉品质、免疫器官指数及血清抗氧化和生化指标的影响。试验选用1日龄爱拔益加肉仔鸡320只,随机分为4个组,每组8个重复,每个重复10只鸡。各组分别饲喂含0(对照)、3%、6%、9%胡芦巴粉的营养水平相同的全价饲粮,试验期42d。结果表明:1)1~21日龄,6%和9%胡芦巴粉组平均体重和平均日增重显著低于对照组(P0.05),9%胡芦巴粉组平均日采食量显著低于对照组(P0.05),3%胡芦巴粉组料重比显著低于对照组(P0.05)。22~42日龄和1~42日龄,饲粮胡芦巴粉水平对肉仔鸡各项生长性能指标均无显著影响(P0.05)。2)9%胡芦巴粉组胸肌滴水损失率和压力损失率显著低于对照组(P0.05)。饲粮胡芦巴粉水平对胸肌pH45min、pH24h、剪切力和蒸煮损失率均无显著影响(P0.05)。3)6%胡芦巴粉组21日龄脾脏指数显著高于对照组(P0.05)。饲粮胡芦巴粉水平对21日龄胸腺指数、法氏囊指数及42日龄胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数均无显著影响(P0.05)。4)9%胡芦巴粉组的21日龄血清总超氧化物歧化酶活性高于对照组(P0.05),且显著高于3%和6%胡芦巴粉组(P0.05);6%胡芦巴粉组的42日龄血清总抗氧化能力显著高于其他各组(P0.05)。饲粮胡芦巴粉水平对21日龄血清总抗氧化能力和丙二醛含量以及42日龄血清总超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量均无显著影响(P0.05)。5)9%胡芦巴粉组的21日龄血清谷草转氨酶活性显著高于对照组(P0.05);3%胡芦巴粉组的42日龄血清谷草转氨酶活性显著高于对照组(P0.05)。饲粮胡芦巴粉水平对21和42日龄血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮含量和白球比及谷丙转氨酶活性无显著影响(P0.05)。由此可见,胡芦巴粉可作为一种蛋白质饲料原料应用于肉仔鸡生产,其具有提高肌肉系水力,促进免疫器官发育,提高抗氧化能力和增强机体蛋白质代谢的作用。胡芦巴粉在肉仔鸡饲粮中的适宜添加水平为:1~21日龄不超过3%,22~42日龄不超过6%。     

桑叶粉对新西兰白兔免疫与抗氧化功能及肌肉风味的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平桑叶粉对新西兰白兔免疫与抗氧化功能及肌肉风味的影响。选用120只35日龄断奶的新西兰白兔,随机分为4组,每组3个重复,每个重复10只(公母各占1/2)。4组试验兔分别饲喂桑叶粉添加水平为0(对照组)、15%(试验Ⅰ组)、20%(试验Ⅱ组)、25%(试验Ⅲ组)的试验饲粮,试验期为35 d。结果显示:试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清酸性磷酸酶(ACP)活性和白细胞介素-6(IL-6)含量均显著高于对照组(P0.05)。随着桑叶粉添加水平的增加,血清溶菌酶(LZM)活性呈上升趋势,且试验Ⅱ组和试验Ⅲ组与对照组差异显著(P0.05)。试验I组血清过氧化氢酶(CAT)活性极显著高于对照组和试验Ⅲ组(P0.01)。血清丙二醛(M DA)含量在各试验组间无显著差异(P0.05),但各试验组均显著低于对照组(P0.05)。随着桑叶粉添加水平的增加,血清总抗氧化能力(T-AOC)呈现上升趋势,且各试验组均显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组背最长肌中肌苷酸含量均显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅱ组和试验Ⅲ组腿肌中肌苷酸含量均显著高于对照组(P0.05)。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组背最长肌和腿肌中必需氨基酸、鲜味氨基酸、总氨基酸以及多不饱和脂肪酸含量均高于对照组(P0.05)。由此得出,桑叶粉在改善新西兰白兔免疫与抗氧化功能及肌肉风味方面有很好的效果,并且以15%~20%添加水平效果较佳。     

串联表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5表位蛋白间接ELISA方法的建立

利用猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）GP5抗原表位串联表达重组蛋白作为包被抗原,建立检测PPRSV抗体的间接ELISA方法。重组蛋白最佳包被浓度为7.5 μg/mL,最佳封闭液为5%脱脂奶粉,37 ℃封闭2 h;血清最适稀释度为1∶100,37 ℃作用2 h;兔抗猪IgG/辣根酶（HRP）（1∶3000）,37 ℃作用2 h;37 ℃避光显色15 min读取D_{450 nm}值。结果经统计学分析得出,S/P值≥0.254为阳性,S/P值≤0.212为阴性。所建立的ELISA方法检测其他5种猪常见病原阳性血清,其D_{450 nm}值均小于0.212。利用建立的ELISA方法对临床免疫勃林格殷格翰猪繁殖与呼吸综合征活疫苗4周后的猪血清70份进行检测,其D_{450 nm}值均大于0.85,表明本研究建立的重组GP5表位蛋白间接ELISA方法可用于临床样品的监测。     

H3、H9亚型禽流感病毒双重荧光定量PCR方法的建立及初步应用

虽然H3、H9亚型禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）是低致病性禽流感病毒,但其具有跨宿主感染哺乳动物的能力,对社会公共卫生安全具有重大的潜在危害,因而对这些亚型病毒的监测极其重要。通过比对GenBank上H3、H9亚型禽流感病毒HA基因序列,设计了分别针对H3 AIV和H9 AIV的特异性探针。特异性试验和标准曲线试验的结果显示,这两个探针仅分别特异性识别H3、H9亚型AIV,且具有较好的扩增效率。通过重组质粒pMD19-T-H3HA和pMD19-T-H9HA 10倍梯度稀释液为模板,进行敏感性实验。结果表明,本研究所建立的荧光定量PCR方法能检测到100个DNA拷贝数H3 AIV和10个DNA拷贝数的H9 AIV,比传统PCR方法敏感性分别提高了100倍和1000倍。此外,本方法还能检测到10 EID50的H3亚型AIV或H9亚型AIV,比传统PCR方法检测敏感性均提高了1000倍。批间和批内试验的变异系数均小于3%,表明本研究建立的方法具有较好的重复性。此外,与传统PCR方法相比,用H3、H9亚型AIV双重荧光定量PCR方法检测人工感染动物的肺组织时,针对H3 AIV的敏感性提高了10~100倍,针对H9 AIV的敏感性提高了100倍。综上所述,本研究所建立的H3、H9亚型禽流感病毒双重荧光定量PCR方法具有较高的特异性和敏感性,对H3、H9亚型禽流感病毒监测具有重要的应用价值。     

出口兔肉备案养殖场追溯体系的建立

从保证动物源性食品安全的角度论述了建立养殖场追溯体系的必要性,以出口兔肉备案养殖场为例,对建立追溯体系的步骤进行了四个方面的探讨。养殖场在设施合理、制度健全的前提下,确定追溯信息的深度、广度和精确度,并作好信息衔接和代码标识,才可使追溯体系有效实施。同时对追溯体系的应用和发展趋势做了基本论述。     

高寒牧区牧鸡鸭治蝗效果试验

在青海湖北岸高寒牧区利用人工饲养的鸡鸭进行放牧防治草原蝗虫。结果表明,在60d的防治期内,牧鸡鸭平均灭治效果达91.4%,为人工利用天敌治虫技术在高寒牧区的应用提供了依据。     

猪生殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因的表达

将猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的M基因和N基因从重组质粒pMD18-T—M—N中亚克隆至pBV220原核表达栽体上，成功构建了重组表达质粒pBVM—N。将pBVM—N转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞．重组菌经温度敏感诱导表达，其细菌裂解物经SDS—PAGE可检测到分子质量约为19ku的目的蛋白，与M基因表达产物一致；经蛋白质分析软件Bandscan分析，其表达量可达19．1％；Western-blotting分析表明，该重组蛋白可被兔抗PRRSV血清所识别，与预期的M基因表达产物相一致，而N基因未获表达。     

育肥猪日粮中通过营养调控和添加益生素或牛至油替代抗生素的研究

本研究旨在通过营养调控、添加益生素或牛至油,探讨替代抗生素,提高猪群抗病、抗应激能力的高效绿色添加剂组合.试验选用平均体重27 kg,健康长×大杂交阉公猪324头,随机分为6组:Ⅰ组(金霉素组,在基础日粮中添加50 mg/kg金霉素)、Ⅱ组(牛至油组,在基础日粮中添加20 mg/kg牛至油)、Ⅲ组(益生素组,在基础日粮中添加1.5 g/kg益生素)、Ⅳ组(营养调控组,提高日粮中维生素E和B族维生素、微量元素zn、Mn和Ⅰ水平)、V组(牛至油+营养调控组)、Ⅵ组(益生素+营养调控组).试验期为90 d.结果表明:V组猪生长速度最快,料重比最低,平均日增重显著高于Ⅳ组和Ⅵ组(P<0.05);血液中白细胞数量Ⅲ组最高,显著高于Ⅳ组和Ⅴ组(P<0.05);淋巴细胞转化率Ⅲ组和Ⅴ组较高,显著高于Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅳ组(P<0.05);Ⅰ组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性最高,Ⅴ组过氧化氢酶(CAT)活性最高;猪瘟、蓝耳病及口蹄疫抗体水平组间差异不显著(P>0.05).本研究结果表明,营养调控同时添加牛至油完全可以替代抗生素,猪的生长性能、抗应激和抗病力超过添加金霉素.     

中国部分地区猪圆环病毒2型的基因型分析

对中国11个省(市)部分猪场收集的812份病料,应用ORF2-PCR进行检测,发现有235份为PCV2阳性病料.利用鉴别PCR方法从235份阳性病料中,检出10份PCV2a基因型和133份PCV2b基因型,检出率分别为4.2%、56.6%.进一步对ORF2-PCR检测阳性的部分模板进行全基因组扩增,构建阳性重组质粒,对插入质粒的片段进行测序鉴定,利用DNAStar进行同源性分析,同GenBank参考毒株绘制系统发育树,从系统发育树中也可分出PCV2a、PCV2b 2种基因型.鉴别PCR和测序结果说明,我国部分地区流行的猪圆环病毒2型以PCV2b基因型为主,少数为PCV2a基因型,也有既非PCV2a又非PCV2b的基因型(PCV2c?).