红茶末对淮南麻黄鸡生产及繁殖性能影响

【目的】茶叶加工下脚料—茶末价格低廉,含有多种天然活性及抗氧化物质,试验研究了红茶末对淮南麻黄鸡生产和繁殖性能的影响。【方法】将290日龄淮南麻黄鸡种鸡528只（母鸡480只,公鸡48只）,随机分成4组（每组2个重复）,分别饲喂添加0.0%（对照组）、0.5%、1.5%、2.5%红茶末4种种鸡日粮,试验持续50天。【结果】日粮中添加0.5%的红茶末,除平均蛋重低于对照组0.39g（p<0.01）外,淮南麻黄鸡的产蛋率、饲料利用率、健雏率和出雏公鸡率均有提高的趋势（p>0.05）;种蛋受精率比对照组高6个百分点（p<0.05）;种蛋合格率和雏鸡初生重分别比对照组高4.7和4.8个百分点（p<0.01）。高浓度红茶末（1.5%或2.5%）对淮南麻黄鸡产蛋及繁殖性能有负面影响。【结论】淮南麻黄鸡日粮添加适量红茶末可改善其生产和繁殖性能。     

猪Ghrelin基因的克隆及原核表达

从猪下丘脑、胃等组织中提取总RNA，根据已发表的猪的Ghrelin mRNA序列设计合成引物，通过RT-PCR进行cDNA扩增，获得了282bp的片段。将该片段克隆于pMD-18T载体后进行序列分析，确认PCR产物为Ghrelin cDNA。从阳性克隆中提取质粒，经NheⅠ和XhoⅠ双酶切，回收282bp的目的片段，定向克隆到pET-28a表达载体中，提取质粒并再次转化到BL21（DE3）中，成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌，通过SDS-PAGE检测出猪Ghrelin基因的表达．     

Effect of miR-181b on cell proliferation and expression of Bcl-2 and SP1 in HepG2 cells

AIM: To investigate the role of miR-181b in the expression of Bcl-2 and SP1 at mRNA and protein levels in the human hepatoma G2 cells (HepG2), and to explore the effect of miR-181b on the regulation of HepG2 cell proliferation. METHODS: The synthetic double-strand complementary DNA based on the sequence of miR-181b was inserted into the vector of miRNASelect^TM pEGP-miR. The microRNA high-expression plasmid was cloned, and the sequences were identified. The miR-181b plasmid was transfected into HepG2 cells with liposomes. The stable cell line was screened by puromycin. The mRNA and protein levels of Bcl-2 and SP1 were measured by RT-PCR and Western blotting, respectively. Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) method was used to analyze the proliferation of HepG2 cells. RESULTS: The Western blotting results showed that miR-181b inhibited the protein expression of Bcl-2 and SP1. The result of RT-PCR also indicated that the mRNA expression of Bcl-2 and SP1 was suppressed. Compared with the control, the growth rate of HepG2 with high expression of miR-181b was significantly decreased.CONCLUSION: miR-181b inhibits the proliferation of HepG2, which may be related to the down-regulation of Bcl-2 and SP1.     

基于智能检测的发酵过程测控系统集成及应用

发酵测控系统是发酵过程参数智能检测与优化调控的基础,直接影响着发酵过程的控制性能。该文针对L-乳酸发酵过程的智能检测,提出了一种基于智能检测的发酵过程测控系统集成方法,给出了系统的体系结构及实现方法,集成了基于虚拟仪器技术的PXI总线发酵过程智能测控系统,给出了系统的软、硬件设计。该系统通过建立软测量模型,有效地实现了发酵过程不易测量参量的在线估计与控制,为发酵过程提供了一种新的测控系统。试验研究表明,将该系统应用到L-乳酸发酵过程中,通过在线估计葡萄糖液消耗量,实现了L-乳酸发酵过程补料优化控制,乳酸产量提高23%,提高了发酵产物得率。     

亚热带地区马蹄金草坪播种量的筛选

马蹄金是一种重要的地被植物,然而目前利用的种子依赖于进口,如何减少种子利用是生产中面临的问题。试验以马蹄金作为材料,按10、13、16、19、22g/m2进行播种,采用随机区组设计,通过相对生长速率、盖度、密度及草坪综合质量等指标测定,筛选出适宜亚热带地区的播种量。结果表明:播种量为19g/m2的条件下,生长80d后马蹄金草坪密度达到165.57株/米2,盖度为69.78%;与其他处理相比,播种量为19g/m2杂草发生率少,且盖度增加快,均一性好,综合质量最高(P0.05)。因而,19g/m2可以作为马蹄金在亚热带地区建植草坪时的适宜播种量。     

表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定

笔者以山羊痘病弱毒疫苗毒株TK基因内KpnI为插入位点,构建了表达绿色荧光蛋白和小反刍兽疫（PPR）H基因的重组山羊痘病毒通用转移载体,为今后研究羊痘病毒活载体疫苗奠定基础。     

转EGFP基因猪胎儿神经干细胞的体外分化

 【目的】获得转EGFP基因神经干细胞并监测其自我更新、增殖和多向分化潜能;通过用EGFP对神经干细胞进行标记和体外追踪实验,为EGFP作为示踪标记对神经干细胞进行体内移植研究奠定基础。【方法】利用神经干细胞培养技术体系,从胎龄30 d猪胎儿脑组织中分离培养神经干细胞,通过脂质体介导转染技术,将EGFP基因导入神经干细胞,诱导转基因神经干细胞贴壁分化,观察其体外增殖、分化特点。采用RT-PCR技术检测干细胞和分化细胞表面标志或相关基因。【结果】成功分离培养出神经干细胞,获得转EGFP基因神经干细胞,神经干细胞在表达EGFP的同时仍具有多向分化潜能。神经干细胞中Nestin表达强阳性,NogoA、DCX、CyclinD2、CD133、Hes1、Oct4、CD-90、Nanog和Sox2表达阳性;体外诱导的神经干细胞可以分化为星形胶质细胞(表达GFAP)、少突胶质细胞(表达GalC)和神经元细胞(表达NF、NSE和MAP2);能分化为脂肪细胞(表达LPL和PPARγ-D)、成骨细胞(表达Osteonectin和Osteocalcin)、肌细胞(表达myf-5、myf-6和myoD)、内皮细胞(表达CD31、CD34、CD144和eNOS)和软骨细胞(表达COL2A1)。【结论】从猪胎儿大脑组织分离神经干细胞具有可行性和有效性,转EGFP基因神经干细胞具有自我更新、增殖和多向分化潜能,可以用EGFP对神经干细胞进行标记、追踪,作为示踪标记进行神经干细胞体内移植研究。     

胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及其分子分析

利用根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化体系转化杞果炭疽菌SC2菌株,共获得抗潮霉素B突变体4 680个,平均每转化1.0×106个炭疽菌分生孢子可得到300～980个突变体,且潮霉素抗性在多次传代实验中得到稳定遗传.随机挑取38个突变体进行PCR检测,均可扩增出1条约1.2 kb的目标谱带,说明突变体为T-DNA插入引起:进一步的Southern blot杂交分析结果表明,在随机挑选的20个突变体中,有1个(5%)为三拷贝T-DNA插入,4个(20%)为双拷贝插入,剩余的15个(75%)为单拷贝插入.     

宁夏回族自治区土地整治项目绩效评价

本研究采用AHP（层次分析法）和多层次模糊综合评价法,构建土地整治项目绩效评价体系,并对其进行实证分析。笔者以宁夏回族自治区土地整治项目中的10个试点项目为例,结合项目区实际情况,从资金使用情况、项目执行情况、项目管理情况和项目建设情况4个维度进行评价,旨在为土地整治项目绩效评价提供新的思路与方法。结果表明：宁夏回族自治区土地整治项目绩效等级优良,占81%。建议从设立土地整治绩效评价机构,建立健全信息报备系统,建立电子绩效评价系统3方面入手,建立土地整治项目绩效评价的长效机制。     

动物营养学研究方法进展

综述了动物营养学研究方法的发展历程,即由传统动物营养学向系统动物营养学的发展,以及各学科在动物营养研究方法中的应用。