猕猴桃AdCCS1基因的克隆及其表达调控

采用RT-PCR法从‘米良1号’猕猴桃中分离到1 066 bp的铜锌超氧化物歧化酶分子伴侣蛋白基因AdCCS1,登录号为KY471361。AdCCS1的开放阅读框为984 bp,编码327个氨基酸,包含3个典型结构域（N端结构域、中间结构域和C端结构域）和2个保守的金属结合位点（MXCXXC和CXC）。基因结构分析显示AdCCS1由6个外显子和5个内含子组成。系统进化分析表明AdCCS1聚在双子叶植物分支中,与茶树CsCCS的亲缘关系最近。此外,AdCCS1的5′端调控区存在多种光响应、胁迫响应和激素响应应答元件。定量PCR分析显示,AdCCS1在猕猴桃叶片中的表达量最高,其次是成熟果、花、幼果和茎,在根中的表达量最低。猕猴桃果实中AdCCS1在4 ℃低温贮藏过程中的表达量均比25 ℃贮藏中同期的低,说明低温抑制AdCCS1的表达。脱落酸和赤霉素处理后AdCCS1的表达下调,但二者的应答模式不同。     

Response of CREG1 promoter to serum starvation in human vascular cells

AIM: In order to explore the regulatory mechanisms of the human cellular repressor of E1A-stimulated genes (hCREG1) in vascular smooth muscle cells (VSMCs)-HITASY and in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), we clone and construct hCREG1 promoter vector to detect its expression in different vascular cells. METHODS: With the results of biological information, the fragments including -3 677 bp, -2 310 bp and -945 bp upstream sequences of hCREG1 were amplified respectively using human genomic DNA template by PCR. The products were inserted into pMD18-T vector, and then were subcloned into pEGFP-1 report vector to obtain the pEGFP-hCREG1-promoter vectors. The pEGFP-hCREG1-P3677, pEGFP-hCREG1-P2310 and pEGFP-hCREG1-P945 vectors were transfected into HITASY cells and HUVECs transiently and the expression of green fluorescent protein (GFP) was detected respectively by Western blotting and fluorescent microscope. RESULTS: It was confirmed that all three PCR fragments inserted into vectors were corrected by sequencing analysis. However, the expression of GFP was different significantly in both types of vascular cells. The expression of GFP in HUVECs was higher than that in HITASY cells. Meanwhile, the expression of GFP in HITASY cells with 0.5% FBS was increased obviously compared to that in HITASY cells with 10% FBS. CONCLUSION: The reporter vectors of hCREG1 promoter are constructed successfully in which the core promoter region might be located in -945 bp-0 bp of 5′ upstream sequences. This study will provide an experimental basis for exploring the regulation of hCREG1 expression.     

苹果6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Md6PGDH1的克隆和功能分析

以‘嘎拉’苹果为材料,克隆了6–磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因Md6PGDH1(序列号:MDP0000279299)全长。序列分析显示,该基因包含一个长为1 047 bp完整的开放阅读框,编码347个氨基酸,分子量为36.430 k D,预测等电点为9.24。同源性分析表明Md6PGDH1还有另外3个同源基因;功能域分析表明Md6PGDH蛋白含有两个保守的绑定域;亚细胞预测表明Md6PGDH定位存在差异。分析Md6PGDH1启动子发现存在多个响应非生物胁迫的顺式作用元件。定量分析显示,Md6PGDH1在苹果的不同组织中都有表达,且受非生物胁迫诱导。原核诱导Md6PGDH1蛋白并进行蛋白酶活的测定,为后续蛋白功能鉴定奠定了基础。Md6PGDH1在苹果愈伤组织中过量表达,提高其抗盐胁迫的能力。     

黄花菜胚囊受精前后的超微结构观察

 应用透射电镜技术研究黄花菜（Hemerocallis citrine Baroni）助细胞、卵细胞、中央细胞、 合子与初生胚乳核的超微结构特征。结果如下：助细胞有高度发达的丝状器;一个助细胞在花粉管进入 后退化;宿存助细胞在合子期退化。受精前,卵细胞、助细胞合点端无壁,细胞膜完整;受精后,合子 被完整的细胞壁包围。受精前超微结构特征显示卵细胞代谢活动低,合子期的代谢活性被激活;中央细 胞、初生胚乳核代谢活性较高。卵细胞质中的精核由双层核膜包被,染色质高度凝聚,核孔数少。助细 胞、卵细胞、中央细胞缺乏中央大液泡是黄花菜成熟胚囊的显著特征。     

花椰菜新品种雪剑一号的选育

雪剑一号是以福建地方品种经7代连续自交选育出的优良自交系CH19为父本,以雄性不育系02-9-10为母本配制成的早熟秋花椰菜一代杂种,生育期60d左右;植株生长势较强,株型直立紧凑,外叶深绿色、蜡质中等,叶柄较短,内叶合抱自护球;花球雪白、紧实、高圆形,单球质量1.12kg左右,每667m2产量2600kg左右。     

不同保鲜膜对草莓果实贮藏品质的影响

以草莓"红颜"为试材,以PVC(聚氯乙烯)膜为对照,研究了PE(聚乙烯)膜、PHM(多层PE系)膜、纳米银膜、PVDC(聚偏二氯乙烯)膜等5种保鲜处理在(4.0±0.6)℃贮藏条件下对草莓果实失重率、硬度和可溶性固形物、维生素C、可溶性糖含量及感官品质的影响。结果表明:相较于PVC保鲜膜,PVDC膜与PHM膜能够较好的保持草莓果实的贮藏品质。其中PVDC膜包装可以有效地减少果实水分散失,保持草莓的硬度以及果实可溶性固形物含量;PHM膜包装可以较好的保持草莓果实可溶性固形物、维生素C、可溶性糖含量,维持果实的营养成分。     

不同种质沙棘在干旱条件下营养生长适应性的研究

在干旱条件下,不同种质沙棘的营养生长适应性差异较大,中国沙棘和杂交沙棘的营养生长适应性显著强于俄罗斯良种沙棘,后者各品种间的营养生长适应性有差异;干旱缺水是影响不同种质沙棘的主导因素,年降水量少于400mm时,无灌溉或地下潜水补给的沙棘,营养生长适应性将大受影响,造林建园时应给予充分重视。     

球孢白僵菌BD-B015可湿性粉剂配方的筛选

研究了甜菜夜蛾高毒力球孢白僵菌BD-B015菌株的可湿性粉剂配方,通过孢子粉萌发率、菌落生长速率、产孢量、润湿时间、相容性和分散时间等试验,筛选确定出载体、湿润剂和分散剂种类,并对制剂的各项指标进行了检测。配方结果如下：孢子粉30%,载体高岭土60%,润湿剂拉开粉BX 5%,分散剂HK-2302 5%。可湿性粉剂各项指标为：含孢量400亿孢子/g,润湿时间69 s,有效成分悬浮率94.6%,干燥减重1.7%,98.4%通过200目标准筛,均达到国家标准GB/T25864-2010。     

七种农药对茴香薄翅野螟防效研究

用喷雾法防治油菜田茴香薄翅野螟,结果表明：0.5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂、4.5%高效氯氰菊酯乳油、2.5%高效氯氟氰菊酯乳油和200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂4种农药对茴香薄翅野螟的防效随着施药次数增加而增加;40%灭多威可溶性粉剂和25%杀虫双水剂的防效随着施药次数的增加防效逐渐下降; 48%毒死蜱乳油在不同施药次数下防效变化幅度较小,平均防效在95.85%左右;上述7种农药喷施1次后, 以48%毒死蜱乳油和40%灭多威可溶性粉剂的防效最好,分别达96.03%和94.82%。4.5%高效氯氰菊酯乳油、2.5%高效氯氟氰菊酯乳油和48%毒死蜱乳油喷施2次和3次时的防效都在95.70%左右。     

昆虫病原线虫共生菌5-5B培养特性及杀虫活性研究

对一株昆虫病原线虫共生菌5-5B菌株的发酵条件进行的研究结果表明,最适温度为28℃,最适起始pH7.3～7.8,最佳振荡频率160r/min,250ml三角瓶内装液40ml,接菌量为4%。5-5B菌株发酵液对小菜蛾初孵幼虫的杀虫活性研究表明,250ml三角瓶内装液40ml时,校正死亡率为62.78%;接菌量4%时,校正死亡率63.84%;起始pH7.3时,校正死亡率65.49%。