禽腺病毒流行株FAdV-4-AH-F41的分子特征及对细胞因子的诱导作用

【目的】分析1株血清4型禽腺病毒（FAdV-4）流行株的分子特征及其感染对细胞因子的影响。【方法】采集安徽省某禽类养殖场疑似心包积水 肝炎综合症的鸡肝脏组织样本,用鸡肝癌细胞（LMH）对病原进行分离,采用PCR、透射电镜（TEM）观察和间接免疫荧光试验（IFA）对分离的毒株进行鉴定。采用分段扩增后拼接的方法克隆分离毒株的全基因组,对其进行遗传进化分析和序列重组分析。基于柯赫法则,用分离毒株接种无特定病原体（SPF）鸡,检验其致病性。采用实时荧光定量PCR法,检测分离毒株对LMH细胞天然免疫相关细胞因子环鸟苷酸-腺苷酸（cGAS）、干扰素刺激因子（STING）、白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8、干扰素-α（IFN-α）、IFN-β、干扰素调节因子7（IRF7）、线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）、主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ-α、MHCⅡ-β等11种细胞因子的诱导作用。【结果】分离鉴定到1株FAdV,其在LMH细胞中培养未出现明显细胞病变效应;病毒粒子直径为70~90 nm,符合FAdV-4的结构特征;免疫荧光试验结果显示,在接种分离毒株的LMH细胞内可观察到亮红色荧光,而对照细胞没有荧光;将该毒株命名为FAdV-4-AH-F41。采用分段扩增后拼接的策略获得了FAdV-4-AH-F41全基因组序列（43 708 bp）;遗传进化分析和序列重组分析发现,FAdV-4-AH-F41与FAdV-4株核苷酸相似性为99.6%;存在3个重组事件,第1个重组事件发生在30 453-30 674 bp,第2个发生在36 884-36 988 bp,第3个发生在43 401-43 715 bp。致病性试验显示,FAdV-4-AH-F41是导致鸡心包积水-肝炎综合症的病原。实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照（DMEM/F12处理）相比,用FAdV-4-AH-F41处理后LMH细胞中11种免疫因子的表达量水平均有提升,其中cGAS、IL-6、IRF7、MHCⅡ β差异达极显著水平（P<0.01）,IL-1β、IFN-α、MAVS差异达显著水平（P<0.05）,STING、IL-8、IFN-β、MHCⅠ-α差异不显著。【结论】成功分离1株重组血清4型禽腺病毒,感染LMH细胞会诱导强烈的天然免疫反应。     

福建柏愈伤组织诱导与抗褐化研究

【目的】比较不同抗褐化剂减轻福建柏组织培养过程中褐化现象的效果,以提高福建柏愈伤组织培养的增殖分化能力。【方法】以福建柏鳞叶和茎段为外植体,通过单因素试验,研究0.0～2.5 mg/L NAA和2,4 D及0.0～3.0 mg/L IBA对愈伤组织诱导率与生长状态的影响;以福建柏茎段为外植体,采用单因素和多因素组合试验,研究100～2 000 mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、100～1 000 mg/L活性炭（AC）和V_C以及不同质量浓度VC与AC组合,对愈伤组织污染率、死亡或褐化率及诱导率的影响;以诱导的愈伤组织为材料,采用单因素试验,研究100～1 000 mg/L PVPP、100～300 mg/L V_C、200～1 000 mg/L AC、30～100 mg/L V_B对愈伤组织增殖生长量、增殖率、褐化率及PPO、POD活性的影响。【结果】① 不同质量浓度NAA、2,4-D和IBA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率总体高于茎段,各生长素对福建柏鳞叶和茎段愈伤组织的诱导率均表现为NAA＞IBA＞2,4-D,所有处理中以1.0 mg/L NAA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率最高,为83.33%;以0.5 mg/L NAA对茎段愈伤组织的诱导率最高,为61.11%;愈伤组织生长状态和抗褐化效果优劣依次为NAA、2,4-D、IBA。②仅100 mg/L V_C+200 mg/L AC处理的愈伤组织污染率低于不添加抗褐化剂的对照;死亡或褐化率仅500 mg/L PVPP处理与对照相同,均为0.00%,其余处理均高于对照;诱导率则以不同质量浓度PVPP、1 000 mg/L VC、100 mg/L V_C＋200 mg/L AC处理与对照相当或高于对照,其余处理均低于对照;愈伤组织生长状态总体以PVPP处理表现最优。③仅300 mg/L PVPP、200和400 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率高于对照,增殖生长量仅100和200 mg/L PVPP、100 mg/L V_C、200 mg/L AC处理高于对照;所有处理中以200 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率和增殖生长量最高,分别为70.00%和10.07 g;各抗褐化剂对福建柏愈伤组织增殖效果的优劣依次为PVPP、AC、V_C、V_B。④不同抗褐化剂处理的愈伤组织褐变率均呈先增加后趋于稳定的变化趋势,但变化幅度存在显著差异;各抗褐化剂的抗褐化效果优劣依次为AC、PVPP、V_C、V_B。⑤不同质量浓度PVPP、V_C、AC处理对福建柏愈伤组织PPO和POD活性的影响具有显著差异,但各处理PPO活性均与对照无显著差异,POD活性以500 mg/L AC处理显著高于其他处理。【结论】在福建柏愈伤组织诱导阶段,愈伤组织的褐化与生长素种类有关,生长素NAA、2,4-D适用于福建柏愈伤组织的诱导,IBA诱导的愈伤组织容易褐化,添加适量抗褐化剂能减少愈伤组织的褐化情况。在愈伤组织增殖培养阶段,适宜质量浓度的PVPP、AC作为抗褐化剂能有效减缓福建柏愈伤组织的褐化进程,保持愈伤组织的正常增殖生长,但高质量浓度的抗褐化剂会抑制愈伤组织的生长。     

Mating Systems and Reproductive Success in Hermaphroditic Bay Scallop,Argopecten irradians irradians (Lamarck 1819), Inferred by Microsatellite‐based Parentage Analysis

In this study, we used microsatellite‐based parentage analysis to assess the mating system of a mass spawning bay scallop, Argopecten irradians irradians. Parental assignment was performed on 237 offspring and 14 candidate parents. Overall, 95% of all offspring were unambiguously allocated to their putative parents based on information from six highly polymorphic loci. Offspring from both the self‐fertilization and cross‐fertilization style were observed, the large variation of self‐fertilization rate among individuals displays a mixed mode of mating. The high variances in reproductive success resulted in a decline in effective breeding numbers (N_b/N = 0.71). The self‐fertilization rate was 32.89% for this mass spawning and the coefficient of inbreeding was estimated at around 16.5% per generation. When selfed larvae were removed, the relationship between relatedness and individual reproductive success was proved insignificant between half‐sibings and unrelated, which suggest that selection pressures other than avoidance of inbreeding may be responsible for the evolution and maintenance of the self‐compatible mating system of A. i. irradians. These results lend insight to A. i. irradians cultivation in present China and provide a genetic basis for the development of more effective spawning techniques.     

闽台两地生态旅游资源等级区划分

应用投影寻踪技术与聚类分析相结合的数学手段,通过对福建、台湾的81个县(市、区)的数据处理,对森林景观资源进行了分类区划。结果表明:福建生态旅游资源大致由内陆向沿海递减,即由内陆到沿海分别为第一等级、第二等级、第三等级;台湾生态旅游资源由中部山脉向东西两岸递减,即中部第一等级,东部第二等级、西部第三等级,这与福建及台湾的生态资源的地理分布相似。     

我国营林机械的发展(四)——森林保护机械

介绍了森林保护机械设备的主要种类及其发展,分析了各种机械的特点及适用场合.     

Effects of isorhapontigenin on cell cycle arrest and down-regulation of cyclin D1 expression in bladder cancer cells

AIM：To explore the inhibitory mechanism of isorhapontigenin (ISO) on the proliferation, migration and invasion of UMUC3 bladder cancer cells. METHODS：Human UMUC3 bladder cancer cells were pretreated with ISO, and the proliferation of the cells was observed under phase-contrast microscope and by ATPase assay. The expression of cyclin D1 was determined by RT-PCR and Western blotting. The cell cycle alteration was detected by flow cytometry, and the cell migration was examined by wound-healing assay. RESULTS：Over 20 μmol/L of ISO significantly inhibited the proliferation of UMUC3 cells with the IC50 of (22.5±2.8) μmol/L. The mRNA and protein levels of cyclin D1 in UMUC3 cells were markedly decreased after treatment with ISO. Exposure of UMUC3 cells to low dose (5 μmol/L) of ISO led to significant induction of G0/G1 growth arrest at both 12 h (58.82%) and 24 h (63.94%), compared with the negative control cells (47.33%) without inducing obvious apoptosis. ISO at dose of 5 μmol/L also markedly inhibited the cell migration. CONCLUSION：ISO significantly exhibits inhibitory effects on the proliferation and migration of human bladder cancer cells by down-regulation of cyclin D1 expression accompanying with G0/G1 cell cycle arrest.     

东方百合L_sCCR1基因的克隆及表达分析

百合茎秆的挺度直接关系到百合花采收后的货架寿命等重要商品性状,而这些商品性状与植物茎秆中的木质素的含量高低有关.本文应用RLM-RACE技术,从东方百合索蚌植株中克隆了木质素合成相关基因一肉桂酰辅酶A还原酶,定名为LsCCR1.该基因cDNA全长为1 499 bp,包括完整的阅读框,编码388个氨基酸.多重比对分析发现百合LsCCR1基因与其他植物上已经发现的CCR基因同源性多介于55%～66%之间.利用半定量PCR检测LsCCR1基因在百合不同组织中的表达差异,结果显示LsCCR1基因主要在百合的茎秆中表达,根部次之,叶片、鳞茎及花蕾中表达量较少,其表达模式与拟南芥、桉树及大麦中CCR基因的表达模式类似.     

我国生猪生产的波动性研究

本文针对生猪产量数据存在的问题,对肉类市场放开至第一次农业普查期间的生产数据进行了调整,在此基础上运用趋势分解法描述了改革开放后我国生猪生产的波动情况,进而对历史数据所描述的波动特征表示置疑,认为我国生猪生产存在明显的周期性,最后提出当前我国生猪生产急需采取的一些必要措施,以建立生猪供给安全长效机制。     

不同激素剂量对幼鼠超数排卵及超排卵质量的影响

应用国产激素制剂对３～８周龄昆明种小白鼠进行了超数排卵处理,重点观察了不同激素剂量对幼龄小鼠的超排效果及超排卵质量的影响。实验结果表明,以ＰＭＳＧ与ｈＣＧ各１０ＩＵ剂量超排３～８周龄小鼠,５周龄小鼠的超排效果（平均获卵８３．８±１０．２个）极显著（Ｐ＜０．０１）好于４～８周龄小鼠的超排效果（平均获卵３９．２～４９．８个）,而３周龄小鼠超排卵受精后体外培养的卵裂率（９７．１％）、桑椹胚率（８６．８％）和囊胚率（６５．１％）与４～８周龄超排卵的（分别为８５．５％～１００．０％、９４．９％～１００．０％和６３．２％～８７．７％）相近;以ＰＭＳＧ与ｈＣＧ各５ＩＵ剂量超排３～５周龄小鼠,３周龄小鼠的超排效果（平均获卵５９．０±６．５个）显著（Ｐ＜０．０５）好于４周龄小鼠的超排效果（平均获卵３１．４±４．９个）,并极显著（Ｐ＜０．０１）好于５周龄小鼠的超排效果（平均获卵２１．４±３．３个）;以ＰＭＳＧ与ｈＣＧ各１５ＩＵ剂量超排３～５周龄小鼠,３周龄小鼠的超排效果（平均获卵４８．６±７．３个）显著（Ｐ＜０．０５）好于５周龄小鼠的超排效果（平均获卵２５．２±５．８个）,也好于４周龄小鼠的超排效果（平均获卵４０．２±５．１个     

乳、肉制品中抗生素残留现状及监控对策

介绍了抗生素的定义及分类,我国乳、肉制品中抗生素残留问题的现状,详细分析了抗生素残留的危害和抗生素残留的原因,概述了抗生素残留检测方法的研究进展,并提出了解决抗生素残留的对策和建议。