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牡丹泛素延伸蛋白基因ubiquitin克隆及其作为内参基因的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以牡丹品种‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘Luoyanghong’)为试验材料,采用RT-PCR方法获得一个牡丹泛素延伸蛋白基因Psubiquitin(PsUBI),其cDNA开放阅读框(ORF)长度为447 bp,编码148个氨基酸,GenBank登录号为KP742952。序列比对发现,该基因与其他23种植物泛素延伸蛋白核苷酸序列的相似性均在81%以上,氨基酸序列的相似性达96%。进化分析表明,牡丹泛素延伸蛋白与棉花泛素延伸蛋白的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,在牡丹不同组织器官中,相对于其他5个常用看家基因(GAPDH、GAPDH1、tubulin、tubulin2、18S rRNA),ubiquitin的PCR扩增曲线的CT值最为恒定,尤其是在不同花器官中的CT值完全一致。进一步分析发现该基因在牡丹的根、茎、叶片、花、雄蕊和心皮组织中均恒定表达,特别是花器官中的表达量几乎完全一致。以ubiquitin作为内参基因探讨控制花器官发育的基因PsAG的表达情况,结果显示PsAG的表达模式与其作用位点相吻合,ubiquitin更适宜作为牡丹花器官研究的内参基因。 相似文献
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RAO Fang XUE Yu-mei DENG Chun-yu YU Xi-yong XIAO Ding-zhang CHEN Shao-xian LIN Qiu-xiong YANG Hui KUANG Su-juan LIU Xiao-ying ZHU Jie-ning WU Shu-lin 《园艺学报》2015,31(11):1986-1991
AIM: To investigate whether the association of connexin 43(Cx43) and L-type calcium channel involved in the pathogenesis of atrial fibrillation (AF). METHODS: The biochemical assays and whole-cell patch-clamp technique were used to study the expression of Cx43 in human atrial tissue. The co-localization of Cx43 and L -type calcium channel, and the regulation of L-type calcium current in atrial myocytes were investigated. RESULTS: The expression of Cx43 at mRNA and protein levels was decreased in human atrial tissues of AF patients. In cultured atrium-derived myocytes (HL-1 cells), knockdown of Cx43 significantly inhibited the mRNA expression of L-type calcium channel α1c subunit, as well as L-type calcium current. Co-localization of Cx43 with L-type calcium channel α1c subunit in mouse atrial myocytes was observed. CONCLUSION: The decrease in Cx43 is involved in the pathogenesis of AF, probably through reducing the L-type calcium current in atrial myoctyes by co-localization with L-type calcium channel, thus representing the potential pathogenesis in atrial fibrillation. 相似文献
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农杆菌介导霞多丽葡萄胚性细胞系遗传转化条件的优化 总被引:2,自引:1,他引:2
为建立葡萄(Vitis vinifera)遗传转化技术体系,以霞多丽葡萄(Chardonnay)胚性细胞系为靶组织,采用GUS检测法,对影响农杆菌介导葡萄遗传转化效率的主要因素进行了研究。结果表明,超声波处理时间长短对转化效率有较大影响,在所试的0.5、1、5、10 min 4种不同时间的超声波处理中,以5 min时转化效率较好,平均达到9.11个蓝色斑点;AS浓度对转化效率有明显差异,当浓度为50μmol/L时,平均蓝色斑点数为8.89个,100μmol/L时,达到12.44个;DTT质量浓度对转化效率也有较大影响,在所试的3种质量浓度(1,2,3 mg/L)中,以3 mg/L为最佳,有16.67个蓝色斑点。通过GUS瞬时表达检测,确立了农杆菌介导葡萄胚性细胞系遗传转化的几个最适影响因素,从而为葡萄遗传转化技术体系的建立奠定了基础。 相似文献
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低温胁迫对甜瓜幼苗膜透性及膜脂过氧化物的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以早金和伊丽莎白为试材,在人工气候箱控制条件下,研究了不同温度下(30℃/20℃(昼/夜,下同)、21℃/12℃、15℃/8℃)及低温持续时间对2种甜瓜幼苗叶片细胞膜透性、膜脂过氧化及保护酶系统的影响.结果表明:低温造成了甜瓜细胞膜伤害,15℃/8℃条件下,甜瓜的细胞膜伤害率、MDA含量高于30℃/20℃、21℃/12℃,细胞膜透性大,膜脂过氧化程度高;早金SOD、POD、CAT活性变化复杂,一定范围内随低温程度高而增强,超过一定范围后则随低温程度加剧而下降;各温度条件下,伊丽莎白膜伤害率、MDA含量和保护酶系统比早金稳定,因而具有较强的低温耐受性. 相似文献
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黄土丘陵沟壑区植被自然恢复过程中土壤种子库特征 总被引:3,自引:0,他引:3
采用野外调查取样和室内实验相结合的方法,研究了黄土丘陵沟壑区植被自然恢复过程中土壤种子库的物种组成、密度、物种多样性以及相似性特征.结果表明:阴、阳坡10个样地中,共萌发了55种2203株幼苗,隶属于23科48属;总密度达到5 505±625.537粒/m2,且0~5 cm土层远远大于5~10 cm土层的土壤种子库密度,约是其4.6倍;丰富度、多样性、均匀度指数均未与恢复年限达到显著相关水平,但生态优势度随恢复年限的增加呈上升趋势,且阳坡上升的趋势比阴坡明显;组成成分相似性系数变化范围为0.0952~0.7143,恢复年限相距越大,其相似性越小,说明植被恢复演替的过程也是土壤种子库空间异质性加大的过程. 相似文献
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为了提高生防菌株莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis ZA1)液体发酵的生物量,利用单因素试验设计与响应曲面试验设计相结合的方法对ZA1摇瓶发酵条件进行了优化。结果表明,ZA1的最佳培养基配比为氯化铵14.25 g、玉米粉19 g、马铃薯237 g、水1000 mL,最佳发酵条件为pH 7.7、培养温度28℃、转速180 r/min及发酵时间36 h,ZA1优化后活菌数为4.12×1010 CFU/mL。通过中心组合试验设计确定ZA1在10 L发酵罐中的最佳溶氧量为60%和转速为180 r/min;最优条件下,发酵ZA1的放罐时间确定为36 h,活菌数达到1.59×1011 CFU/mL。该结果为利用ZA1开发生防制剂奠定了基础。 相似文献