基于荧光显色的环介导等温扩增技术(LAMP)检测禽呼肠孤病毒

建立了一种基于荧光显色的禽呼肠孤病毒(ARV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法.该检测方法使用针对ARV的p10基因8个区域的6条LAMP引物,能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低能够检出102个拷贝的病毒,敏感性比普通PCR高100倍,而对其他病毒检测结果为阴性.在荧光显色中分别应用SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素作为显色剂,其结果与琼脂糖凝胶电泳一致.在对80份临床样本的检测中,使用LAMP和PCR检测出阳性样本的数量分别为68份和55份.因此,基于荧光显色的LAMP方法可以应用于ARV的快速检测,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力.     

发酵床垫料饲养荷斯坦牛试验报告

选择饲养密度、品种一致的荷斯坦牛,分为试验组和对照组,对照组砖面平养,试验组采用发酵床垫料,饲养试验中对产量、环境卫生等指标进行测定。结果显示,试验组的产奶量、料奶比等指标明显好于对照组;试验组牛舍NH3浓度低于对照组,粪便降解充分,奶牛均匀躺卧在垫料上。说明建立的试验方法可行,为生物环保养殖技术应用于奶牛生产提供参考依据。     

不同宿主来源犬瘟热病毒的分离及致病相关基因序列分析

利用Vero-DST细胞从死亡犬、狐狸肺、脾内分离到4株犬瘟热病毒-CDV-TM-CC、CDV-Dog-SCh、CDV-Fox-SY、CDV-Fox-WF,在Vero-DST细胞上传5代没有细胞病变,5代细胞培养物经电镜、间接免疫荧光及PCR鉴定为阳性。与本实验室保存的CDV-Monkey-BJ进行基因测序,并对与致病相关的F蛋白、V蛋白进行分析,F蛋白分析5株毒具有6个潜在N-末端糖基化位点,与强毒株同源性在92%～99.7%,与疫苗株不高于93.3%,在F1亚基内有7个特有氨基酸位点,这可能与其对灵长类致病有关。V蛋白分析表明,其与强毒株同源性在94%～99.7%之间,而与疫苗株不高于93.3%,CDV-Monkey-BJ C272R突变使其Zn结合能力丧失。试验结果显示,所有分离株均为强毒株,不同宿主毒株序列存在差异,值得进一步研究。     

用Wood模型拟合南方中国荷斯坦牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率和体细胞评分及其效果分析

旨在了解南方中国荷斯坦牛测定日产奶量、乳脂率、乳蛋白率和体细胞评分(Somatic cell score,SCS)变化趋势,并进行准确预测.利用Wood模型对南方5个大中型奶牛场(2008-2010年1～3胎)中国荷斯坦牛的33 194条测定日产奶量、乳脂率、乳蛋白率和SCS数据进行曲线拟合.结果表明,测定日产奶量为标准泌乳曲线,乳脂率、乳蛋白率和SCS变化与标准泌乳曲线正好相反.Wood模型对乳蛋白率和产奶量变化曲线拟合度最高,各胎次拟合度均为0.99,误差均方也较低;其次为乳脂率,各胎次拟合度均为0.98,而对SCS的拟合度最低,均在0.7以下,同时误差均方也最大.各胎次产奶高峰日出现的时间与乳蛋白率和SCS最低值出现的时间相近,而最低乳脂率出现的时间较晚.一胎牛高峰产奶量相对较低(30.4 kg·d-1),但泌乳后期泌乳持续力及维持低SCS能力较强;二胎和三胎牛高峰产奶量较大,分别为35.9和36.2 kg·d-1,二胎奶牛在泌乳后期同时维持高乳脂率和乳蛋白率的能力较强.Wood模型适合于南方中国荷斯坦牛测定日产奶量、乳脂率、乳蛋白率变化曲线的拟合分析,而不适合于SCS的拟合分析.     

氮磷钾配施对甘草育苗质量的影响

利用“3414”方案进行N、P、K营养液配方设计,在配方营养液浇灌条件下进行甘草育苗质量比较,旨在探寻适宜甘草育苗的施肥配方,为其测土配方施肥和无土栽培育苗提供依据。结果表明,以纯沙石作为育苗基质,在添加Hoagland营养液条件下,不同N、P、K配比营养液对经98%硫酸处理的甘草种子的出苗质量和幼苗生长发育均具有极显著影响。N₂K₂配比下出苗质量均优于空白对照,且随着施磷水平的提高出苗质量呈下降趋势,出苗质量依次为N₂P₀K₂＞N₂P₁K₂＞N₂P₂K₂＞N₂P₃K₂。而出苗活力依次为N₂P₁K₂＞N₂P₀K₂＞N₂P₂K₂＞N₂P₃K₂。N₂P₂K₂和N₂P₁K₂处理均可极显著提高甘草根系活力,为培育壮苗奠定良好基础。单纯缺N、缺K和过量N、P和K肥均不利于甘草出苗和幼苗的生长发育。以上说明在甘草出苗阶段需P量小,但出苗后开始显示其营养效应。从育苗效益和环境保护双重考虑,配方施肥宜采用N₂P₁K₂,即添加80 mg/L NH₄NO₃、89 mg/L KH₂PO₄和298 mg/L KNO₃作为N、P和K营养源,每隔20 d浇1次。需要注意的是浇灌后应及时喷灌适量水,使氨态氮下渗到底部基质,以避免氨的挥发而灼伤幼苗。     

北京鸭(Z4)、樱桃谷鸭和奥白星鸭生产性能对比试验

中国北京鸭(PekingDuck)以体型外貌美观、生长快、抗病力强、适应性广、繁殖率高、肉品质优良而闻名于世,已经成为世界各国肉鸭生产的主导品种。Z型北京鸭是中国农科院畜牧研究所在传统北京鸭基础上经过20多年选育形成的北京鸭新品系,其商品代肉鸭的生长速度和饲料转化率得到了一定的改进。试验的目的是比较英国樱桃谷公司和法国克里莫公司选育的北京鸭(以下简称樱桃谷鸭和奥白星鸭)商品代与Z型北京鸭商品代[北京鸭(Z4)]的体型和体重、体尺等指标的差异。1材料与方法1.1试验动物与日粮选择体重相近的北京鸭(Z4)、樱桃谷鸭和奥白星鸭初生…     

小鼠单精注射研究进展

自从Piezo操作系统应用于显微操作代替了传统的机械注入方法以来,小鼠胞质内单精注射的成功率就大大提高了。单精注射(ICSI)的基本原理并不复杂,但是许多研究表明小鼠精子的质膜、顶体、制动时间均会对ICSI的结果造成影响。文章概述了小鼠单精注射的基本原理及小鼠精子质膜的完整性,顶体反应,制动时间与ICSI成功率之间的关系,以期在此基础上提出今后的研究方向,对于分析受精过程的发生,改进单精注射技术及进一步提高受精率,都具有重要的理论意义及实践价值。     

大肠杆菌肠毒素ST1—LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究

已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原,免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗１５ＭＬＤ的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ,ＳＴ＋,ＬＴ＋）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ＳＴ１的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。     

凋亡素基因真核表达载体的构建及在人肿瘤细胞中的表达

为探讨凋亡素对肿瘤的基因治疗效果,构建了凋亡素基因的真核表达载体。将凋亡素基因重组入 ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 载体,并通过脂质体介导凋亡素在人喉癌、人肺癌细胞系中表达;通过 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 在转染细胞中检测到了凋亡素的 ｍ Ｒ Ｎ Ａ,这为应用凋亡素进行肿瘤的基因治疗奠定了基础。     

花椰菜尾菜发酵饲料对保育猪生长性能、血清生化指标、小肠组织形态及经济效益的影响

为研究花椰菜尾菜发酵饲料对保育猪生长性能、血清生化指标、小肠组织形态及经济效益的影响.选取42头体重相近(11.40±1.36)kg、体况良好的40日龄保育猪,随机分为两组,每组3个重复,每个重复7头.对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂由80％基础饲粮和20％花椰菜尾菜发酵饲料组成的试验饲粮.试验共30 d,其中预试期8 ...