犬猫3种冠状病毒基因克隆的构建与芯片检测技术

蔗糖密度梯度离心纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)和猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的细胞培养物,分别设计7、17、11对引物,对病毒RNA进行反转录和PCR扩增,回收PCR产物连接pGEM-T载体并转化大肠杆菌TGI,构建35个基因片段的克隆。煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段,每种病毒只选择其4对引物克隆的基因片段。将特异克隆扩增片段重新点制基因芯片,与病毒样品PCR扩增产物杂交,未发现交叉现象。基因芯片检测比传统PCR敏感1000倍,可有效应用于3种病毒的检测与区分。     

重庆市肉牛产业发展现状分析与对策建议

以目前重庆市肉牛产业发展现状为背景,分析了近年来重庆市肉牛产业发展现状、生产水平、产业化水平以及肉牛业发展急需解决的关键技术问题,对今后重庆市肉牛产业发展提出了对策和建议,为推动新形势下重庆市肉牛产业可持续发展提供参考。     

三峡库区川南山地黄牛及杂种后代生长曲线拟合分析

三峡库区川南山地黄牛及其8种杂种后代的体重资料用Logistic和Gompertz模型进行生长曲线拟合分析。结果表明:2种模型都能很好地拟合川南山地黄牛及其8种杂种后代的生长发育规律,但Gompertz模型尤佳。成熟体重最大的是西杂牛313.2373 kg,最小的是本地黄牛166.1484 kg。引进的8个肉牛品种对本地黄牛都有改良效果,较好的有西门塔尔牛、海福特、红安格斯、德国黄牛、利木赞牛。     

Real-time PCR方法和PCR方法检测虾白斑综合征病毒

由白斑综合征病毒引起的虾白斑综合征是国际兽医局（OIE）规定的必须上报的水生动物二类疫病。本研究首先通过设计新的PCR引物，提高了PCR检测白斑综合征病毒的阳性检出率。为进一步提高白斑综合征病毒检测的灵敏度，本研究采用TaqMan探针技术建立了快速检测白斑综合征病毒的real-time PCR方法，通过与常规PCR方法比较，证实其检测灵敏度显著提高。     

鸭胚成纤维细胞培养、传代及保存方法的研究

本研究旨在建立鸭胚成纤维细胞离体培养、传代以及冷冻保存体系,为鸭胚胎或生殖干细胞的离体培养奠定基础。利用胰酶-EDTA消化鸭胚胎组织,10% FBS+DEME营养液培养,获得原代和传代成纤维细胞。分别用DMSO、甘油以及乙二醇作为冷冻保护剂对F1代鸭胚成纤维细胞进行冷冻保存,检测复苏后细胞的生长情况。利用此方法可以获得高活性的鸭胚成纤维细胞,并可成功传至第三代。其中F1代与F2代细胞活力最好,达到90%以上。3种冷冻剂保存的细胞复苏后均与F1代细胞的活力存在明显差异,均小于80%,其中用DMSO冷冻保存的细胞复苏后活力最强,生长密度保持较好。     

遮荫胁迫下外源一氧化氮对高羊茅的生理调控作用

用外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)处理遮荫胁迫下的2个高羊茅(Festuca arundinacea)品种,探讨外源NO对遮荫胁迫下其叶绿素含量、膜透性、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性及脯氨酸(Pro)含量的影响.结果表明:外源NO可以显著提高遮荫胁迫下高羊茅叶片的叶绿素含量(P＜0.05),减弱质膜相对透性的增加,减缓膜质过氧化产物MDA含量的升高,促进Pro的积累,提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性(P＜0.05).遮荫胁迫下高羊茅品种踏火二号的电解质渗透率、MDA含量、CAT活性和Pro含量的变化显著(P＜0.05),NO的作用效果     

竹叶提取物对奶牛瘤胃体外发酵参数及产气量的影响

本试验旨在研究竹叶提取物对奶牛瘤胃体外发酵参数及产气量的影响。试验选用健康、体况相近的荷斯坦奶牛用于瘤胃液的采集,以精粗比为4∶6的全混合日粮作为发酵底物。试验组分为6组,各组分别添加0(对照)、0.75、1.50、3.00、4.50、6.00 mg/g的竹叶提取物,每组6个重复,每个重复3个批次。体外发酵24 h后,记录产气量,测定瘤胃发酵参数。结果表明:1)各组的发酵液pH均无显著差异(P>0.05)。试验组的发酵液中氨态氮(NH_3-N)浓度均显著低于对照组(P<0.05),其中3.00和4.50 mg/g竹叶提取物组的发酵液中NH_3-N浓度显著低于其他各组(P<0.05)。试验组的发酵液中干物质消失率均显著高于对照组(P<0.05)。2) 4.50、6.00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中总挥发性脂肪酸浓度显著高于其他各组(P <0. 05); 3. 00、4.50、6. 00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中乙酸浓度显著高于其他各组(P <0. 05); 4. 50、6.00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中丙酸浓度显著高于对照组(P <0. 05); 3. 00、4. 50、6. 00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中丁酸浓度显著低于其他各组(P<0.05); 6.00 mg/g竹叶提取物组的发酵液中异戊酸浓度显著低于对照组(P<0.05)。各组的发酵液中异丁酸、戊酸浓度以及乙酸/丙酸均无显著差异(P>0.05)。3)试验组的体外发酵甲烷体积和甲烷含量均显著低于对照组(P<0.05)。各组的体外发酵产气量无显著差异(P> 0.05)。综上所述,体外条件下添加竹叶提取物在不影响瘤胃发酵模式的同时可以显著降低甲烷排放,其中添加4.50 mg/g竹叶提取物效果最佳。     

不同复合酶制剂对肥育猪生长性能的影响

试验选用72头100日龄,体重在44kg左右的三元杂交(杜×长×大)商品代瘦肉型肥育猪,完全随机分为3个组(A、B、C),每个组24头,设三个重复。A组中,饲料中加入国产复合A酶;B组中,饲料中加入国产复合B酶;C组中,饲料中加入罗酶宝TM。经过30天的饲养试验,结果表明:①B、C两组肥育猪的日增重比A组分别提高0.81%、5.50%,C组比B组日增重提高4.65%;②C组肥育猪料重比比A组提高3.53%,C组料重比比B组提高2.59%,B组料重比比A组提高0.96%;③经济效益,C组比A、B两组分别提高8.59%、5.99%;④试验全期,三个处理组的腹泻率均极低。     

施肥对桑叶品质的影响

在大田条件下研究了施肥对桑叶品质的影响 ,多年多点的试验结果表明 ,在土壤养分缺乏的桑园施用相应的缺素养分总体上有改善桑叶品质的作用。N、P、K、S、Mg、B等 6种养分的施用均明显提高桑叶必需氨基酸含量和氨基酸总量 ;N、K、S、B肥有提高桑叶蛋白质的作用 ,Mg对蛋白质的影响作用很小 ;N、Mg、B肥有提高桑叶全糖含量的作用 ,P、K肥则会降低全糖含量 ,S对桑叶全糖含量的影响不大 ;N、P、K肥施用有提高桑叶中脂肪含量的作用 ,而S、Mg、B肥的作用则相反。结果还显示 ,同一种养分在不同试验中对桑叶某一具体品质参数的影响大小及影响方向不尽相同 ,表明施肥对桑叶品质的作用还受其他因素影响。     

不同处理大豆蛋白源代乳料哺育早期断奶羔羊的效果

以奶粉人工哺育的羔羊作为消化代谢试验对照,以自然哺乳的羔羊作为生长发育对照,以两种以处理大豆为主要蛋白源的代乳料人工哺育的羔羊为试验处理组,总共4组小尾寒羊(♀)和萨福克(♂)杂一代羔羊进行饲养试验。结果表明:1.人工哺乳初期,羔羊对以植物性蛋白为主的代乳料不适应,人工哺乳生长速度低,但随着日龄的增加,羔羊对代乳料有了一定的适应性,同时对粗料的摄入增加,生长速度加快,到47日龄体重达到或超过自然哺乳羔羊。人工哺乳羔羊没有出现生长停滞现象。2.两处理组代乳料的氨基酸平衡不如奶粉。17～22日龄羔羊对处理大豆代乳料各养分的消化率低于奶粉。3.刚开始用代乳料或奶粉人工哺育时各组羔羊都会发生腹泻,22日龄之后除膨化大豆组两只羔羊出现腹泻外,其它组羔羊均无腹泻现象出现。