基因芯片检测5种动物冠状病毒的初步研究

采用蔗糖密度梯度离心,纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)、猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的细胞培养物,分别设计7,17,11,10和4对引物,构建了49个基因片段的克隆。煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段。结果表明:克隆CCV1,CCV2,CCV5和CCV7可特异诊断CCV,克隆FCV6,FCV7,FCV8和FCV9可特异诊断FCV,克隆FIPV2,FIPV7,FIPV8和FIPV9可特异诊断FIPV,克隆PRCV1,PRCV2和PRCV3可特异诊断PRCV,克隆TGEV3,TGEV4,TGEV5和TGEV6可特异诊断TGEV。将这些特异克隆扩增片段重新点制基因芯片,与病毒PCR产物杂交,未发现交叉现象。基因芯片检测比传统PCR敏感1000倍,可有效应用于这5种动物冠状病毒的检测与区分。     

重庆市肉牛产业发展现状分析与对策建议

以目前重庆市肉牛产业发展现状为背景,分析了近年来重庆市肉牛产业发展现状、生产水平、产业化水平以及肉牛业发展急需解决的关键技术问题,对今后重庆市肉牛产业发展提出了对策和建议,为推动新形势下重庆市肉牛产业可持续发展提供参考。     

马铃薯花色素苷及其遗传研究进展

综述了马铃薯花色素苷的种类、含量及抗氧化特性,比较了二倍体遗传模型和四倍体遗传模型花色素相关基因及克隆,重点阐述了基因R和P的克隆与表达。     

4种方法检测奶牛隐性乳房炎的结果比较及分析

采用BMT法、苛性钠法、酒精法及pH值法对重庆市永川区12个奶牛场的120个乳样进行奶牛隐性乳房炎的检测,结合临床调查和实验室的病原菌分离鉴定,采取常规统计学方法及方差分析,探讨4种诊断方法的准确性和一致性.结果表明,4种诊断方法的隐性乳房炎阳性检出率分别为18.3%、38.3%、51.7%、41.7%,阳性率平均达37.5%,说明永川区奶牛隐性乳房炎感染较重,这与永川区奶牛养殖业处于发展的初期阶段,粗放管理、消毒不严格、机器挤奶为主直接相关;多重比较P<0.01,说明4种方法诊断结果差异极显著;其中,苛性钠凝乳法与牛乳pH值检测法诊断结果接近一致,BMT法与其他3种诊断方法其诊断结果差异较大.实验室的病原分离鉴定初步证实,4种方法中苛性钠凝乳法与牛乳pH值检测法的诊断结果比其他方法更为准确和灵敏.     

猪IGF2 Intron3 G3072A突变及其在背最长肌中差异表达

采用错配PCR-RFLP法检测胰岛素样生长因子2基因(IGF2)内含子3的G3072A位点变异对长×大杂交猪肌肉生长和脂肪沉积的影响,并采用实时荧光定量PCR法分析该变异对出生后的长×大杂交后代猪背最长肌中IGF2mRNA表达发育性变化的影响。结果显示:IGF2内含子3的G3072A位点变异(G→A)对猪背膘厚和活体瘦肉率均存在显著或极显著影响,表现为遗传父本A等位基因的个体能够增加活体瘦肉率和减少背膘厚;在长×大杂交后代的背最长肌中,IGF2mRNA的表达量在遗传父本A等位基因的个体中显著高于遗传父本G等位基因的个体,在42和180日龄时达显著水平(P<0.05),而在70、90和120日龄时达极显著水平(P<0.01)。     

江西青岚湖淡水蚌类的资源现状和时空变化

通过周年采集标本,研究江西青岚湖淡水蚌类的资源现状和时空变化.结果表明:青岚湖淡水蚌类有11属35种,优势种为圆顶珠蚌、洞穴丽蚌和中国尖嵴蚌,它们在每个季节标本中都占较大的比例,并且秋、冬两季所获标本明显少于春、夏两季.标本属、种数在每个季节相差不大,秋季以11属、21种为最多.标本各属所含种数差异较大,丽蚌属包括9种、无齿蚌属包括8种,分别占总种数的25.71%和22.86%;而珠蚌属、冠蚌属、扭蚌属和帆蚌属各只有1种,分别占总种数的2.86%.青岚湖淡水蚌类夏季生物量和密度最大,分别为22.75g/m2和0.81ind./m2;秋季生物量和密度最小,分别为16.24g/m2和0.65ind./m2;全年平均生物量为(15.94±5.26)g/m2,全年平均密度为(0.59±0.21)ind./m2,说明青岚湖淡水蚌类资源比较丰富,但各个季节、各属之间存在明显的差异.     

肠侵袭性大肠杆菌感染野猪的诊断和药敏试验

无菌取病死野猪的心脏、肝脏、肺脏、脾脏及肾脏等组织病料,进行细菌的分离培养与PCR鉴定,分离出肠侵袭性大肠杆菌。结合临床症状、剖检病变和实验室诊断,从而确诊野猪病死于肠侵袭性大肠杆菌感染。并对分离菌株进行药敏试验,为野猪的肠侵袭性大肠杆菌感染疾病的诊断和防治提供参考。     

黏土和沙壤土对烟叶发育过程中栅栏细胞超微结构的影响

采用大田试验,比较研究了黏土和沙壤土烟叶发育过程中栅栏细胞超微结构变化,结果表明:1)叶长5 cm之前,黏土和沙壤土烟叶细胞超微结构变化差异不大.2) 5 cm之后沙壤土烟叶细胞发育较为迅速,叶长10～15 cm时叶绿体开始贴壁排列,功能开始全面发挥,叶长20 cm时基粒垛叠明显增厚,叶长30 cm时液泡发育成熟,叶绿体进入旺盛功能期;而黏土烟叶细胞发育相对迟缓,叶长20 cm时叶绿体功能才开始全面发挥,叶长40~50 cm时进入旺盛功能期.3)定长时黏土烟叶细胞内叶绿体积累的淀粉粒和嗜锇颗粒不及沙壤土烟叶充实.     

工艺条件对腌腊鱼安全性品质的影响

以白鲢(Hypophthalmichthyx mortitrix)为原料,研究食盐添加量、腌制温度、腌制时间和干燥条件对干腌法制作的腌腊鱼中亚硝酸盐含量、酸价、过氧化值、TBA值和挥发性盐基氮含量的影响,考察腌腊鱼生产中安全性品质的变化。结果表明:腌制条件和干燥方式对腌腊鱼中亚硝酸盐含量、酸价、过氧化值、TBA值和挥发性盐基氮含量的影响显著;食盐添加量越小,腌腊鱼中亚硝酸盐含量、酸价和挥发性盐基氮含量越高;腌腊鱼的腌制温度越高、腌制时间越长,其亚硝酸盐含量、酸价、过氧化值、TBA值和挥发性盐基氮含量则越高。在4种干燥方式中,真空冷冻干燥所制得的腌腊鱼中亚硝酸盐含量、酸价、过氧化值、TBA值和挥发性盐基氮含量较低,而微波干燥制得的腌腊鱼的酸价、TBA值和挥发性盐基氮含量较高。采用食盐添加量为6%,腌制温度为10℃,腌制时间为4 d的工艺条件,经干燥所制得的腌腊鱼中亚硝酸盐含量≤2.55 mg/kg,酸价≤0.63 mg/g,过氧化值≤0.18 g/kg,TBA值≤10.54 mg/kg,挥发性盐基氮含量≤229.6 g/kg,均符合相应的国家标准,腌腊鱼食用安全。     

猪MRLC2基因内含子遗传多态性与胴体及肉质性状的关联分析

克隆了大白、长白和梅山猪肌球蛋白轻链调控蛋白2基因(MRLC2)内含子2序列,经比对发现,在内含子2中18个碱基突变和8个碱基缺失,其中179bp处的C/T突变引起Hin6I酶切位点的改变,运用PCR-Hin6I-RFLP对179头大白×梅山F2代猪进行家系关联分析,结果表明该酶切位点与屠宰率呈极显著相关,表现为加性效应,CC基因型个体比CT基因型、TT基因型个体有更高的屠宰率;与大理石纹评分呈显著相关,CC基因型个体评分比CT基因型、TT基因型个体高。