原位杂交技术用于虹彩病毒对美国青蛙侵染的诊断

蛙虹彩病毒（Rana grylio virus,RGV)能引起鱼类、两栖类和爬行类水生动物严重的系统性疾病，RGV是从我国患病蛙中分离到一种虹彩病毒。体外扩增的RGV经人工方法感染幼龄美国青蛙（Rana grylio)，运用原位杂交技术，分别对感染1-3d后的蛙心、肺、肾、肠、脾、肝等6种组织进行RGV分子定位和检测，结果显示，在幼蛙的肺和肠中有较强的阳性信号，在其他组织中也检测到RGV的存在。本试验探讨了RGV感染早期在宿主体内的增殖及在不同组织中的分布状况，建立了一种彩虹病毒的早期诊断方法，并为揭示RGV的致病机制奠定了基础。     

铜绿假单胞菌抗体制备及抑菌作用

研究铜绿假单胞菌抗体对铜绿假单胞菌生长的抑制作用。制备兔抗铜绿假单胞菌抗体,纯化后加入液体和固体培养基中,接种沙门菌和铜绿假单胞菌混合物,对沙门菌进行选择分离。试验表明,添加抗体后能够成功抑制铜绿假单胞菌的生长,而不影响沙门菌的分离。将200μL和400μL铜绿假单胞菌抗体添加入相应培养基中,能够抑制铜绿假单胞菌的生长,而达到筛选沙门菌的目的。     

舒泰对野生猕猴麻醉效果的观察

利用舒泰50(替来它明和唑拉西泮合剂)对36只野生猕猴按(5.79±1.28)mg/kg的剂量肌肉注射进行麻醉,麻醉期间对镇痛、镇静、肌松、呼吸、心率、血压、体温及血氧饱和度等指标进行监测.结果显示:舒泰对猕猴的诱导期为(2.72±1.72)min,平均诱导效果判定为"极好",麻醉期间体温为(38.74±0.46)℃,...     

胆翘注射液急性和亚慢性毒性试验

旨在评价胆翘注射液的毒性,为临床安全用药提供理论依据。以昆明小鼠为研究对象,进行急性和亚慢性毒性试验。在急性毒性试验中,给予小鼠不同浓度的胆翘注射液来测定胆翘注射液的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,小鼠以(10、5、2.5g/kg)不同剂量连续腹腔注射给药28d,在给药第28天观察小鼠的临床体征、体重及饲料利用率、血常规、血液生化指标和病理组织学变化。结果显示,急性毒性试验各剂量组小鼠均无死亡,无法测出LD_(50),最大耐受量为20g/kg。亚慢性毒性试验中用药组小鼠的临床体征、体重及饲料利用率、血常规、血液生化指标与空白组小鼠相比,无显著差异(P0.05),组织病理学观察,实质器官无异常病变。表明胆翘注射液实际无毒,安全性好。     

香蕉茎叶粉固态发酵条件优化及鹅对其养分利用率的研究

本试验旨在研究应用固态发酵技术改善香蕉茎叶粉养分组成的工艺参数及鹅对其养分的利用率。选择米曲霉和产朊假丝酵母作为发酵菌种,逐步探究5个因素(单菌种发酵、硫酸铵添加量、米曲霉和产朊假丝酵母接种比例、混合菌液接种量)对发酵后香蕉茎叶粉蛋白质含量的影响。利用正交设计筛选最优发酵温度、底物水分和发酵时间的组合。结果显示:米曲霉和产朊假丝酵母单独发酵均能显著或极显著提高发酵后香蕉茎叶粉的粗蛋白质含量(P0.05或P0.01)。添加硫酸铵能显著或极显著提高发酵后香蕉茎叶粉的真蛋白质含量(P0.05或P0.01),其中添加2%硫酸铵组的真蛋白质含量最高。米曲霉∶产朊假丝酵母接种比例为2∶1的处理发酵后香蕉茎叶粉的蛋白质净增加量显著或极显著高于比例为1∶1、1∶3和3∶2的处理(P0.05或P0.01)。正交试验结果显示,以4%的接种量、接种比例为2∶1(米曲霉∶产朊假丝酵母)、2%的硫酸铵添加量,在基质水分为50%,30℃的环境下发酵4 d效果最佳。经过该工艺发酵后的香蕉茎叶粉粗蛋白质含量提高了33.82%,氨基酸分析结果显示,除赖氨酸和精氨酸外其余的15种氨基酸含量均有不同程度的提高。马冈鹅的代谢试验结果显示,发酵后香蕉茎叶粉中的粗蛋白质利用率提高了52.66%,极显著高于发酵前(P0.01);此外,代谢能和能量利用率也都略有提高(P0.05)。由此可见,经过该发酵工艺发酵后的香蕉茎叶粉营养价值不仅得到了改善,也促进了鹅对其养分的消化吸收。     

基于单时相MODIS数据的草地退化遥感监测研究

以草地NPP减少的相对百分数（由实际NPP和潜在NPP计算）为主要监测指标，提出了一个基于单时相MODIS数据的草地退化遥感监测方法。介绍了利用MODIS数据反演实际NPP的方法，并提出了一个根据实际NPP和草地类型分布图确定潜在NPP的方法。对2003年中国北方草地的监测结果表明，中国北方草地退化严重，退化程度的空间差异性较大，草地退化程度与草地类型密切相关。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌8种毒力基因的PCR检测

为研究奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)主要毒力因子的分布情况,本试验利用PCR对70株临床型乳房炎、55株隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的8种主要毒力基因进行检测。结果显示,nuc、ClfA、TSST-1、PVL、Hla、Hlb、FnBPA和FnBPB 8种毒力基因在临床型乳房炎SA菌株中的检出率分别为:100.0%(70株)、100.0%(70株)、0(0株)、5.7%(4株)、100.0%(70株)、11.4%(8株)、97.1%(68株)和100.0%(70株);在隐性乳房炎SA菌株中的检出率分别为:100.0%(55株)、100.0%(55株)、0(0株)、70.9%(39株)、98.2%(54株)、9.1%(5株)、100.0%(55株)和100.0%(55株)。结果表明,nuc、ClfA、Hla、Hlb和FnBPA 5种毒力基因是引起奶牛乳房炎的SA的最主要毒力基因;PVL基因可能是引起隐性乳房炎的重要致病基因。     

广西10个地方优质品种鸡γ-干扰素基因的克隆与序列分析

根据基因库中鸡γ-干扰素的基因序列设计了1对特异性引物，应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术，从ConA诱导培养的广西10个地方优质品种鸡外周血淋巴细胞RNA中扩增了γ-干扰素基因，结果，均得到了大小为520 bp的特异性片段。将扩增产物纯化并克隆到pMD18-T载体上，获得重组质粒，经PCR和EcoRⅠ＋SalⅠ双酶切鉴定后测序。序列分析结果表明，广西10个地方优质品种鸡γ-干扰席基因均编码145个氨基酸的成熟蛋白，分子质量约为16．8ku，与哺乳动物和其他品种鸡的核苷酸序列同源性分别为38．8％～39．0％和99．2％～100％，氨基酸序列同源性分别为23．69／6～24．8％和97．6％～99．4％。     

水牛卵母细胞去核方法的比较

水牛卵母细胞体外成熟22h后，分别用盲吸法、点击法和纺锤体成像系统（Spindle—View System）去核。结果，三者的去核率分别为65．1％、81．8％和95．0％，差异极显著（P〈0．01）。以水牛胎儿成纤维细胞为供体，通过核移植构建的重构胚的融合率、分裂率和囊胚发育率，在上述3种方法之间均没有显著差异（P〉0．05）。认为点击法是一种较为简单、实用和有效的去核方法。     

Genetic diversity decreases as population density declines: Implications of temporal variation in mitochondrial haplotype frequencies in a natural population of Tscherskia triton

Although the spatial genetic differentiation that occurs in animal populations has been extensively studied, information on temporal variations in genetic structure and diversity is still lacking, especially for animals with oscillating populations. In the present study, we used the mtDNA D‐loop sequence to assess the temporal genetic variation in samples from six successive years for the greater long‐tailed hamster, Tscherskia triton. Sampling was carried out between 1998 and 2003 in cropland on the North China Plain, China. A total of 108 individuals were analyzed. The temporal samples showed a high level of genetic diversity. Substantial genetic changes in haplotype frequencies over time were detected for the hamster population. Random genetic drift and migration are likely to be the major factors responsible for the observed temporal pattern. The genetic diversity of the hamster population was higher in years with higher population density, and lower in years with lower population density. The result supports our hypothesis that genetic diversity decreases when population density declines in animals whose population oscillates greatly between years. The combined effects of inbreeding and genetic drift caused by reproduction, dispersal and population size might play important roles in the observed changes in genetic structure and diversity between years.