多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立

根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。     

桑青尺蠖的生物学特性研究

研究了桑树常见害虫桑青尺蠖的形态特征、继代繁殖等生物学特性 ,以及幼虫食叶量、寄生性天敌及温度对青尺蠖发育历期的影响。该虫在室温下全年可继代繁殖 5代 ,以蛹越冬。随着饲养温度的升高 ,其发育历期缩短。在 2 0 95、2 4 16和 2 9 70℃的温度下 ,全代历期分别为 5 8 1、43 9和 35 2d。幼虫多为 6龄 ,少数 5龄。平均每头幼虫全龄食叶量为 2 948 11mg ,其中第 5龄和第 6龄食叶量占全龄食叶量的 95 48%。     

马铃薯新品种冀张薯24号的选育研究

冀张薯24号是由冀张薯8号作母本、ELLES作父本配制杂交组合,经系谱法选育而成的马铃薯新品种。该品种属晚熟加工型,植株直立,长势强且整齐,茎绿色,叶深绿色,花冠紫色,薯型卵圆形,浅黄皮白肉,薯皮微麻,芽眼浅。干物质含量20.82%,淀粉含量15.14%,还原糖含量0.26%,粗蛋白含量2.69%,维生素C含量265.6mg·kg^-1。抗PVY、PVX、PLRV、PVA、PVM病毒病,中抗晚疫病、早疫病。2018年8月30日通过中华人民共和国农业农村部非主要农作物品种登记,登记编号:GPD马铃薯(2018)130077。     

MD病毒抗独特型抗体的研制

制备鸡马立克氏病病毒(MDV)抗独特型抗体(Ab2),探讨Ab2模拟抗原诱导免疫应答的能力.用MDV免疫SPF鸡,分离提纯鸡抗MD-IgG(Ab1),Ab1免疫BALB/C鼠,用鼠脾细胞与SP2/0细胞制备Ab2杂交瘤细胞株,间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,经克隆、纯化2×株抗MDV独特型抗体杂交瘤细胞株(6E5,7A12),其中6E5培养上清、腹水ELISA效价分别为4000×、10000×,免疫20 d攻毒,具有抗MDV感染保护.     

野生甘草资源植冠种子库特性的初步研究

甘草(Glycyrrhiza uralensis)是荒漠地区具有植冠种子库的植物。成熟种子硬实率高达80%以上[1],自然条件下种子萌发率很低(约为5%-15%)[2]。本文研究了荒漠区野生甘草植冠种子库大小、种子活力、对土壤种子库的补充、种子脱落机理及植冠种子库的生态功能,指出野生甘草资源植冠种子库在甘草资源保护和恢复方面的重要作用。     

硫酸多粘菌素E在猪体内的药代动力学和生物利用度研究

健康断奶仔猪 5头 ,分别进行单剂量肌注 (2 5和 5 0mg/kgb .w .)和静注 (2 5mg/kgb .w .)给药 ,并用微生物学方法对硫酸多粘菌素E在猪体内的药代动力学和绝对生物利用度进行了研究。以 3P97程序处理血药浓度—时间数据 ,结果表明 ,以 2 5和 5 0mg/kgb .w .的剂量肌注给药时 ,其血清中药物的峰浓度 (Cmax)分别为 3 73± 0 2 8μg/ml和 6 40± 0 1 8μg/ml,达峰时间分别为 32 2 2± 1 51min和 34 1 8± 1 76min ,消除半衰期 (t1 / 2 β)为 2 55 99± 1 3 65min和 2 64 0 8± 2 8 57min ;以 2 5mg/kgb .w .的剂量静注给药时 ,其消除半衰期 (t1 / 2 β)为 2 51 2 8± 1 2 53min。静注和肌注在体内的分布均为一级吸收二室模型。肌注 2 5和 5 0mg/kgb .w .剂量的注射液时 ,其平均绝对生物利用度分别为 98 30 %和 88 54 %。     

复方中草药添加剂对热应激下奶牛生产性能、生理和生化指标的影响研究

试验按产奶量、胎次、泌乳时间和体况评分相近的原则选取40头健康荷斯坦奶牛,随机分为对照组、试验Ⅰ组（中草药）、试验Ⅱ组（中草药＋缓冲剂）、试验Ⅲ组（中草药＋益生菌）和试验Ⅳ组（中草药＋γ-氨基丁酸）,测定热应激期生产性能、生理和血液生化指标的变化,探讨复方中草药添加剂对奶牛热应激的影响及其机理。试验结果显示：（1）平均产奶量,Ⅳ组〉Ⅲ组〉Ⅰ组〉Ⅱ组〉对照组,其中Ⅳ组和Ⅲ组分别比对照组提高1．28kg／d和1．25kg／d（P〈0．05）;（2）各组间乳成分无明显变化;（3）生理指标方面,试验各组直肠温度和呼吸频率均略低于对照组（P〉0．05）;（4）试验各组三碘甲腺原氨酸（T3）浓度均高于对照组,其中试验Ⅱ组比对照组高37．33％（P〈0．05）;甲状腺素（T4）浓度,除试验Ⅲ组有所降低外,Ⅱ组和Ⅰ组均比对照组高（P〉0．05）;试验组皮质醇（Cot）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和白细胞介素-2（IL-2）均略低于对照组;血清中肌酸激酶（CK）、碱性磷酸酶（ALP）和谷草转氨酶（AST）含量均低于对照组,其中试验Ⅲ组AST含量比对照组低21．34％（P〈0．05）;谷丙转氨酶（ALT）含量均高于对照组。由此可见,复方中草药添加剂具有缓解奶牛热应激症状、改善机体代谢、调节内分泌和免疫水平的作用;就提高生产性能而言,以中草药＋益生菌和中草药＋γ-氨基丁酸两组配方的效果最佳。     

中越水稻迁飞性害虫稻飞虱、稻纵卷叶螟发生关系分析

中越两国同属东亚季风区,水稻病虫害在发生危害上为一个整体。每年水稻稻飞虱、稻纵卷叶螟(以下简称"两迁"害虫)随着季节和气温变化,在两国间往返迁飞,发生为害,相互影响。研究两国水稻迁飞性害虫发生的关系和影响规律,对于提高监测预警的早期预见性和防控工作的主动性,有效控制其危害具有重要意义。2010年以来,中越两国实施了中越水稻迁飞性害虫监测与防治合作项目,通过连续多年开展交流合作,初步明确了越南"两迁"害虫发生规律。本文简要分析了影响越南"两迁"害虫发生的主要因素,探讨了中越两国水稻"两迁"害虫发生规律的相关性,对提高中国"两迁"害虫中、长期预报能力和综合治理水平发挥了积极作用。     

FQ-PCR在转基因产品检测中的应用研究进展

实时荧光定量PCR（real-time fuoreseent quantitative PCR,FQ—PCR）是近年来定量PCR技术中兴起的最新定量检测技术,因其具有灵敏性高、特异性强、结果精确、反应快速、安全可靠等优点,现已广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域,论文就实时荧光PCR技术的主要原理、分类方法以及在转基因产品检测中的应用等进行简要综述。     

Effects of melatonin on maturation,histone acetylation,autophagy of porcine oocytes and subsequent embryonic development

Melatonin (MLT) is an endogenous hormone with roles in animal germ cell development. However, the effect of MLT on porcine oocyte maturation and its underlying mechanisms remain largely unknown. Here, we investigated the effects of exogenous MLT on oocyte maturation, histone acetylation, autophagy and subsequent embryonic development. We found that 1 nmol/L MLT supplemented in maturation medium was the optimal concentration to promote porcine oocyte maturation and subsequent developmental competence and quality of parthenogenetic embryos. Interestingly, the beneficial effects of 1 nmol/L MLT treatment on porcine oocyte maturation and embryo development were mainly attributed to the first half period of in vitro maturation. Simultaneously, MLT treatment could also improve maturation of small follicle‐derived oocytes, morphologically poor (cumulus cell layer ≤1) and even artificially denuded oocytes and their subsequent embryo development. Furthermore, MLT treatment not only could decrease the levels of H3K27ac and H4K16ac in metaphase II (MII) oocytes, but also could increase the expression abundances of genes associated with cumulus cell expansion, meiotic maturation, histone acetylation and autophagy in cumulus cells or MII oocytes. These results indicate that MLT treatment can facilitate porcine oocyte maturation and subsequent embryonic development probably, through improvements in histone acetylation and autophagy in oocytes.