The Fluorescent Characterization and Analysis of Two Brucella Attenuated Vaccine Infecting Mouse Macrophagocyte

The experiment was conducted to discuss the difference of binding time of green fluorescent protein B.melitensis M5 (GFP-M5) and B.abortus S19 (GFP-S19) infecting the mouse macrophagocyte (RAW264.7),lysosome,endoplasmic reticulum and golgi body in the initial stage and compare the binding rate of GFP-M5,GFP-S19 with organelle in different timeline,respectively,by confocal laser scanning microscope (CLSM) and flow cytometry.The result showed that GFP-M5 and GFP-S19 were successfully constructed.The intracellular survival ability of Brucella M5,Brucella S19,GFP-M5 and GFP-S19 were not obvisouly affected after infecting RAW264.7.GFP-M5 and GFP-S19 could enter the macrophagocyte in 30 mins,and in 2 h the Brucella could reach lysosome,endoplasmic reticulum and golgi body.In addition,the binding time for two attenuated vaccine did not show differences in 1,2,3 and 4 h.The content of GFP⁺ cell produced by RAW264.7 infected by GFP-M5 and GFP-S19 did not show significant differences (P>0.05).Therefore,the two strains did not have significant differences in the invasion ability in the initial stage of infecting host cell.     

应用致敏SPA菌体提高CAV/CPV PCR检出率的研究

为消除粪便等病料中的PCR干扰物质 ,提高犬腺病毒与细小病毒 (CAV CPV)联合PCR检出率。根据免疫吸附的原理 ,应用CAV CPV高免血清致敏含A蛋白的金黄色葡萄球菌 ,制成致敏SPA菌体免疫吸附剂 ;以此免疫吸附提取粪便等病料中的CAV/CPV ,然后直接或经 3 5mol/LMgCl2 将所吸附病毒洗脱后再做PCR。结果 8份经电镜负染或HA/HI试验验证为阳性的粪便样品 ,如此处理后进行PCR检测 ,结果均为阳性 ;而直接取粪便离心后用上清进行PCR检测 ,结果均为阴性。表明该法可有效去除待检样品中的PCR干扰物质 ,提高PCR的检出率。     

禽流感(H9)疫苗免疫间隔期探讨

通过在不同日龄对海兰褐蛋鸡进行禽流感(H9)灭活疫苗的免疫,探讨禽流感灭活疫苗的免疫间隔期。结果表明,开产以后不管防疫2次、3次、4次禽流感灭活疫苗,抗体水平均在6log2以上,且鸡的日龄越大,免疫次数越少,免疫抗体持续期越长。因此,建议从育成到鸡群淘汰的饲养全程中,四次时机恰当、搭配合理的禽流感(H9)疫苗免疫基本上能使得95%以上产蛋期抗体维持于7log2以上。     

救必应水提取物对产ESBLs细菌的抑菌机理研究

为了探讨救必应水提取物的抑菌作用及抑菌机理,采用2倍微量稀释法和琼脂平板稀释培养计数法,测定救必应水提取物对产ESBLs(extended spectrum β-lactamases)细菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),通过对细菌生长曲线、细菌超微结构、细胞壁和细胞膜通透性变化试验、核酸合成抑制试验研究救必应水提取物的抑菌机理。结果表明,与不添加提取物的对照组相比,救必应水提取物能够影响细菌的生长规律,使细菌破损严重,细胞壁和细胞膜通透性增加,细胞质外渗,菌液中AKP含量、可溶性蛋白含量增多、大肠杆菌DNA荧光强度明显减弱。研究表明,救必应水提取物的抑菌机理是通过细菌细胞壁和细胞膜通透性的变化,抑制细菌核酸的合成实现的。     

浅谈如何培养缉毒犬在搜毒工作中的自信心

<正>缉毒犬在搜毒工作中的自信心是指训犬员在使用缉毒犬的相关场所对搜索对象进行搜毒活动时,缉毒犬所表现出的积极、主动、细致、持久的强烈渴求发现毒品的心理状态,以及由此心理状态引发的一系列搜索活动。     

牛传染性鼻气管炎病毒LN01/08株灭活疫苗的研制

为研制牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)灭活疫苗,本研究以国内分离鉴定的IBRV LN01/08株为种毒,优化病毒增殖条件,获得病毒滴度达108.0TCID50/mL,将其灭活制备疫苗.为比较不同免疫佐剂的效果,分别以矿物质白油和Montanide ISA206佐剂配制灭活疫苗,进行牛体免疫试验.临床观察和血清中和抗体检测结果表明,Montanide ISA206佐剂乳化的疫苗在降低副反应和增强免疫效果方面优于矿物质白油佐剂.应用Montanide ISA206佐剂制备3批灭活疫苗,并对其安全性和免疫保护效果进行测定.结果表明该疫苗安全可靠,对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达80%.疫苗在2℃～8℃保存12个月后仍能保持良好的免疫效果.     

黑龙江省和谐自然保护区理论体系的构建

随着黑龙江省自然保护区数量及占地面积的迅速增长,自然保护区质量提升滞后以及建设与管理过程中诸多矛盾冲突的不和谐现状也随之显现,解决这些问题的关键在于推进自然保护区和谐发展.自然保护区的和谐是和谐社会内容的一部分,有关这方面的研究有利于促进我国社会主义和谐社会目标的最终实现.但目前我国关于构建和谐自然保护区的相关研究还处于初级阶段.本文在研究国内外自然保护区建设和管理相关理论的基础上,从法律保障体系建设、社区共管体系建设、生态补偿机制建设和区域发展援助基金成立,以及生态旅游开展等方面,提出了黑龙江省构建和谐自然保护区管理建议,为黑龙江省的生态文明和和谐社会建设提供了参考.     

莫能菌素的诱变育种与高通量筛选

莫能菌素采用紫外线-氯化锂复合诱变育种,增加突变率,再用生测法进行初步筛选,以提高筛选效率。然后把两者结合运用,既提高筛选效率又提高了菌种的生产能力。     

柞蚕幼虫黄体色与白体色的遗传分析及类胡萝卜素组成比较

为深入探讨柞蚕幼虫体色多样性的形成机制,分析柞蚕品种豫大1号(黄体色)和白一化(白体色,略带黄色)幼虫体色的遗传规律,并比较二者在体壁类胡萝卜素组成上的差异。杂交试验发现,F₁的幼虫体色为黄色,F₂有黄色和白色两种表型,且分离比符合3∶1;回交BC₁(F₁×豫大1号)均为黄色,而BC₁(F₁×白一化)则有两种表型,即黄色和白色,分离比符合1∶1。遗传分析表明,豫大1号的基因型为YYGG,白一化的基因型为YYgg,豫大1号的黄体色对白一化的白体色属于完全显性遗传。代谢组学分析发现,豫大1号中的类胡萝卜素含量(10.259μg/g)远高于白一化(1.167μg/g);白一化体壁中的叶黄素、β-胡萝卜素和玉米黄质含量远小于豫大1号。综上认为,体壁中类胡萝卜素的缺乏是导致白一化形成白体色的原因之一。