甘蓝夜蛾卵巢细胞系对核多角体病毒的敏感性

本文研究了甘蓝夜蛾核型多角体病毒（ＭｂＮＰＶ）在同源寄主细胞系ＮＥＡＵ－Ｍｂ－９３１１０４（简称Ｍｂ－９３１１０４）中的复制，ＭｂＮＰＶ侵染细胞后的病理变化。Ｍｂ－９３１１０４对ＭｂＮＰＶ有一定的敏感性，细胞表现明显的病变，细胞感染率达到３６．５％，感染细胞内产生的多角体数为３８．９。用离体培养产生的病毒多角体感染甘蓝夜蛾幼虫，其死亡率达到了８４．２％。     

Roles of the Kv1.2, Kv1.5, Kv2.1 potassium channels in hypoxia pulmonary vasoconstriction

AIM: To determine the role of Kv1.2, Kv1.5, Kv2.1 in the hypoxia pulmonary vasoconstriction (HPV). METHODS: Male Wistar rats were divided into two groups: normoxic group and hypoxic group. The single smooth muscle cell was obtained from pulmonary artery of Wistar rats with acute enzymatic digestion method. The conventional whole-cell patch clamp technique was used to record the resting membrane potential (Em) and the potassium currents of voltage-gated potassium channel (IKv) in rat pulmonary arterial smooth muscle cells (PASMC). Intracellular application of Kv1.2/Kv1.5/Kv2.1 antibodies (1∶125) was conducted through the whole-cell patch clamp system. RESULTS: ① Em of PASMC was depolarized after 24 h hypoxia compared with that of control cells . IKv of PASMC was decreased after 24 h hypoxia, . ② The mixture of Kv1.2/Kv1.5/Kv2.1 antibodies depolarized Em and inhibited IKv in PASMC from normoxic rat, whereas the mixture of Kir2.1/Kir2.3/Kir4.1 antibodies had no effects on them. ③ The mixture of Kv1.2/Kv1.5/Kv2.1 antibodies and the mixture of Kir2.1/Kir2.3/Kir4.1 antibodies had no effects on IKv and Em from rats hypoxic for 24 h. CONCLUSION: Kv1.2, Kv1.5, Kv2.1 might be oxygen sensitive potassium channels which mediated HPV.     

牛奶清洁生产技术研究与实践

提出了牛奶清洁生产的概念及意义，并从牛奶清洁生产的环境管理、奶牛饲养过程管理、产品加工过程管理、废弃物处理和全程质量控制5方面分析了实现牛奶清洁生产的途径，制订了牛奶清洁生产技术规程（试行），并进行了推广应用，取得良好的效益。     

类器官的研究进展及应用前景

类器官（organoids）来源于自组织和自我更新的干细胞，是利用干细胞的自组织特性进行体外3D培养后形成的细胞团，与来源器官密切相关，再现了来源器官的三维细胞结构，并为探索来源器官的发病机制提供了新的模型。类器官系统是由自分泌、旁分泌或邻分泌信号调节下的细胞，或者外源性添加的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）底物、小分子和生长因子等衍生而来，这些因素的相互作用创造了一个动态的环境，指导干细胞的自我更新和分化，以及细胞在类器官中的自我组装。诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）重编程方法结合3D类器官工具，使患者来源的类器官作为动物模型和人类临床试验之间的桥梁，是对细胞研究和在体试验的补充。在研究来源器官发育、生物学和病理生理学方面，类器官不仅是一种比传统细胞培养更具生理相关性的体外模型，而且还是再生医学和个性化医学领域中的新模型，有望成为研究营养素、药物、毒物及毒素等的作用机制及药物的筛选、再生医学等领域的重要模型。总之，类器官技术的发展增强了人们对器官和组织生理生化功能的认知。作者对肠、脑、肺脏、肝脏、子宫、卵巢等类器官培养和应用的研究进展进行综述，以期为类器官相关科研及应用提供参考。     

利用CRISPR/Cas9系统编辑日本结缕草ZjSGR基因技术研究

日本结缕草(Zoysia japonica)是一种常见的具有众多优良性状的暖季型草种,秋冬季节在我国北方地区会较早出现叶片脱绿现象,在一定程度上限制了日本结缕草在北方的大面积使用。ZjSGR是从结缕草中分离出来的一种衰老诱导基因,负调控叶片滞绿性状。本研究利用CRISPR/Cas9系统,通过基因枪介导的遗传转化方法实现对日本结缕草ZjSGR基因的编辑,经测序验证获得1株单碱基缺失突变植株。突变植株叶片深绿,在正常生长温度(28~30℃)条件下,和对照相比,叶绿素含量更高(P<0.05)。本研究为进一步阐述ZjSGR基因在日本结缕草滞绿性状调控中的作用机理提供了基础研究材料,也为培育日本结缕草滞绿品种育种工作奠定了基础。     

巨型艾美耳球虫偏菱形样蛋白EmRP免疫原性分析

在前期研究中,从巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)cDNA文库中筛选到了免疫保护性抗原偏菱形样蛋白EmRP,本研究为揭示该抗原的免疫保护机理,进一步检测了其免疫原性。以E.maxima卵囊cDNA为模板,用RT-PCR技术扩增EmRP,并构建真核表达质粒pVAX1-EmRP,将其经腿部肌肉注射2周龄的雏鸡,3周龄加强免疫。分别于首次免疫后和加强免疫后1周,采集血清,用ELISA方法检测血清特异性IgG水平,用荧光定量PCR方法(qPCR)检测细胞因子水平,用流式细胞术检测CD4^+T淋巴细胞和CD8^+T淋巴细胞的比例,分析EmRP诱导的免疫反应。序列分析表明,EmRP含有偏菱形样蛋白超家族成员保守区域,为非跨膜蛋白,分子量约为28.4 kD。真核表达质粒pVAX1-EmRP免疫鸡后,与对照组相比,鸡体IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17等细胞因子转录水平显著提升;CD8^+和CD4^+ T细胞比例显著提高,而血清特异性IgG水平与对照组差异不显著。结果表明,EmRP诱导的免疫保护作用主要是由其诱导的细胞免疫反应实现的,可以作为研制E.maxima新型疫苗的候选抗原。     

基于CDIO的应用型本科实践教学模式改革与应用——以家畜环境卫生学课程为例

针对应用型本科实践教学中存在的教学内容与人才培养目标匹配度不高、专业特点反映不足、教学手段单一、考核方式重结果轻过程等问题,以家畜环境卫生学为例,引进CDIO教育理念,面向现代畜牧业生产实际,满足应用型本科动物科学专业要求,充实和改革课程实践教学内容,构建学生全程参与实验教学模式,完善基于实验构思、设计、运作及目标实现的全方位、全过程评价体系与考核方法,为培养畜牧生产类应用型人才打好基础,同时也为其他课程建设及同类高校课程实践教学模式改革建设提供借鉴。     

脂肪酸组合对体外瘤胃微生物发酵挥发性脂肪酸的影响

为研究长链脂肪酸组合对体外培养瘤胃微生物发酵挥发性脂肪酸（VFA）的影响，并得出最优脂肪酸组合及添加水平，试验选取硬脂酸、油酸、亚油酸及α-亚麻酸4种脂肪酸因子，设置0.5%、1.0%、1.5%等3个水平进行L₉（3⁴）正交试验，其中Ⅰ~Ⅸ组为试验组、Ⅹ组为对照组，各处理均设3个重复。以3头瘤胃瘘管山羊为瘤胃液供体进行体外发酵试验，测定各组培养液VFA 24 h内的动态变化。结果显示，各组的总挥发性脂肪酸（TVFA）浓度总体上呈先上升后下降再上升的波动变化趋势。其中在6 h时Ⅶ组TVFA浓度最高。乙酸/丙酸比值总体呈下降趋势，6 h前下降较快，6 h后趋于平缓。丁酸摩尔百分比在7.97%~15.41%间变动。主成分与最优组合分析表明，TVFA浓度影响的主次顺序为亚油酸、油酸、硬脂酸、α-亚麻酸；以添加1.5%硬脂酸、0.5%油酸、1.5%亚油酸、0.5%α-亚麻酸时组合效应最好。