抗猪输血传播病毒1型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为制备抗猪输血传播病毒1型(TTV1) Cap蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究采用PCR法扩增TTV1ORF1 (1501nt～2475nt)编码重组Cap蛋白的C末端截短序列,将PCR产物克隆于pGEX-6P-1载体中,并在大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株中诱导表达,获得含GST标签的重组蛋白(rCap),经SDS-PAGE和western blot鉴定表明rCap约为64.0.ku,以包涵体形式存在.用纯化的rCap免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗rCap蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚类均为IgGl/κ型;western blot鉴定表明有7株MAbs与rCap产生特异性反应,另1株MAb呈阴性.为验证8株MAbs与真核表达的Cap蛋白的免疫反应性,将全长与截短的TTV1ORF1基因片段克隆于pcDNA3.1载体,转染293T细胞进行蛋白瞬时表达,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法检测表明,这8株MAbs均能够与瞬时表达的全长rCap产生特异性反应,其中6株与截短表达的rCap反应.本研究表达的rCap蛋白及制备的MAbs,为该病毒检测方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础.     

单一或复合植物精油添加对麻黄肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究饲粮中添加植物精油对麻黄肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质和抗氧化能力的影响。选取360只1日龄健康、体重均一的雌性麻黄肉鸡,随机分为3个组,分别为对照组、单一植物精油组（EO1组）和复合植物精油组（EO2组）,每组8个重复,每个重复15只鸡。试验期分为3个生长阶段,分别为1～21日龄、22～42日龄和43～65日龄,共计65 d。对照组饲喂基础饲粮;EO1组在1～21日龄时饲喂基础饲粮+300 mg/kg植物精油1（主要成分为肉桂醛）,在22～65日龄时饲喂基础饲粮+400 mg/kg植物精油1; EO2组饲喂基础饲粮+150 mg/kg植物精油2（主要成分为肉桂醛、香芹酚和百里香酚）。结果表明：与对照组相比,各试验组肉鸡各阶段平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异（P>0.05）;21日龄时,EO2组肉鸡血清总抗氧化能力显著高于对照组和EO1组（P<0.05）;65日龄时,EO2组肉鸡血清总超氧化物歧化酶活性显著高于对照组（P<0.05）;65日龄时,EO2组肉鸡胸肌红度值显著低于对照组和EO1组（P<0.05）。综上所述,饲粮添加复合植物精...     

饲粮碘水平对獭兔血清生化指标和生产性能的影响

通过对獭兔饲喂不同碘水平的饲粮,探讨饲粮碘水平对獭兔血清生化指标和生产性能的影响.结果表明,当饲粮中添加0.8 mg/kg碘,实测碘含量为0.925 mg/kg时,獭兔的甲状腺功能最为理想,四碘甲腺原氨酸(T4)、游离四碘甲腺原氨酸(FT4)和三碘甲腺原氨酸(T3)3项指标均值最大,与对照组相比差异显著(P＜0.05);而促甲状腺素(TSH)指标均值最小,与对照组相比差异显著(P＜0.05);游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和白球比(A/G)各组间无显著差异(P＞0.05);平均日增重、胴体重、屠宰率和皮张面积与其他各组差异显著(P＜0.05),而被毛密度各组间差异不显著(P＞0.05).     

非洲猪瘟病毒感染后猪外周血淋巴细胞Toll样受体信号通路的lncRNA-mRNA分析

【目的】丰富非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染后猪外周血淋巴细胞长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）表达谱,并进一步挖掘影响Toll样受体信号通路的调控网络。【方法】试验动物感染ASFV,于第7天采集外周血并分离得到外周血淋巴细胞,运用Illumina高通量组学测序对外周血淋巴细胞中lncRNA进行测序,原始数据经处理后筛选获得差异表达的lncRNA,并进行靶基因预测,利用生物信息学方法对靶基因进行GO功能和KEGG信号通路富集分析,初步绘制与Toll样受体信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络,并对lncRNA-ENSSSCG00000041959在内的4个lncRNAs进行实时荧光定量RT-PCR验证。【结果】共筛选到73个差异表达的lncRNAs,其中上调表达lncRNAs 38个,下调表达lncRNAs 35个。GO功能分析结果显示,靶基因显著富集在调节免疫系统过程、防御反应、生物刺激、病毒反应和先天性免疫;KEGG信号通路富集分析显示,大部分靶基因与细胞循环、疾病及免疫应答有关,其中免疫相关信号通路有Toll样受体信号通路、TNF信号通路、产生IgA的肠道免疫网络等。进一步挖掘出lncRNA-ENSSSCG00000041959-RIPK1和lncRNA-ENSSSCG00000041959-IRAK1可能是影响Toll样受体信号通路的重要调控网络,实时荧光定量RT-PCR与测序结果一致。【结论】本研究初步鉴定出lncRNA-ENSSSCG00000041959-RIPK1和lncRNA-ENSSSCG00000041959-IRAK1可能是影响Toll样受体信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,为进一步探索lncRNA调控ASFV感染机体免疫反应奠定了理论基础。     

中华蜜蜂越冬阶段维生素和氨基酸的营养需要量

本试验旨在研究中华蜜蜂越冬阶段对维生素和氨基酸的需要量.根据中华蜜蜂天然饲料——蜂蜜中的维生素和氨基酸含量设计试验饲料[中剂量(67.28 mg/kg)维生素+中剂量( 127.85 mg/kg)氨基酸组、中剂量维生素+高剂量(256.70 mg/kg)氨基酸组、高剂量(134.56 mg/kg)维生素+中剂量氨基酸组...     

基于食用价值开发的桑树优势品种筛选

为科学评价我国桑树品种资源的食用价值,指导桑叶、桑椹的食用新产品开发,在对我国具有代表性的100份桑树品种资源的桑叶和桑椹进行营养品质、功能活性成分和加工特性鉴评的基础上,运用模糊数学中的隶属函数法对与桑叶蔬菜、桑叶茶和桑果汁(酒)的营养品质相关的各项指标数据进行转化,综合评价各品种的食用价值,筛选出一批食用优势品种。其中,最适合桑叶茶制作的10个桑树品种是粤诱35、粤诱19、任抗1号、粤诱33、抗10、粤诱18、鄂诱1、69、抗11、北-4-1,最适合桑叶蔬菜开发的10个桑树品种是粤诱35、任抗1号、英沙3、抗锈3号、坪镇2、粤诱19、抗10、粤诱25、抗11、白沙2,最适合果汁(酒)加工的10个桑树品种是粤椹15号(大10,无籽)、粤椹2号、粤椹18号、粤椹29号、粤椹27号、粤椹26号、粤椹33号、粤椹16号、粤椹66号、粤椹38号。目前种植面积较大的具有食用开发价值的桑树品种有适合果汁(酒)开发的品种大10,适合开发桑叶茶和桑叶蔬菜的品种抗10。另还确定了一批具有食用开发价值的优势储备桑树种质资源,可作为以食用价值开发为导向的桑树新品种选育的基础材料。     

营养调控对宣城黄鸡胴体品质及肉质的影响

通过营养调控改善鸡肉品质与风味。选100 d宣城黄鸡600只随机分为5组,分别饲喂优化日粮（OD）、OD＋风味改良剂（MD）、MD＋茶粉与甲壳质混合物、MD＋昆虫蛋白硒,对照组饲喂原场饲粮。试验期55 d。结果表明：（1）试1、2、3、4组较对照组试鸡腹脂率分别降低45.28%,44.67%,64.04%,14.65%,其中试1、2组试鸡较对照组腹脂率显著降低（P〈0.05）,试3组降低极显著（P〈0.01）;试3组肝重率显著降低33.59%（P〈0.05）;试2组腺肌胃率显著提高45.11%（P〈0.01）。（2）肌间脂肪1、3、4组较对照组降低,但试2组提高15.66%（P〈0.05）;肌苷酸试1组较对照组低,试2、3、4组分别高17.48%（P〈0.05）,9.35%,10.16%;试4组胸肌硒含量较试2组提高了163%（P〈0.01）。（3）鸡肉弹性试1、2、3组较对照组分别高7.32%,7.89%（P〈0.05）,9.21%,而试4组则低2.63%;粘聚性试1、2与3组较对照组分别高2.78%,5.71%（P〈0.05）,4.29%,试4组则低1.43%。日粮补饲茶粉与甲壳素混合物可显著降低腹脂沉积,有防止肌肉脂肪氧化,降低MDA水平,维持高pH值趋势;配制的风味改良剂也可显著降低腹脂率,并有提高肌苷酸、羟脯氨酸含量与肌内脂水平趋势,能显著提高肌肉弹性与粘聚性;昆虫硒可显著提高鸡肉中硒沉积量。     

中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶功能基团的研究

在一定条件下，分别采用二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）、N-溴代琥珀酰亚胺（NBS）、苯甲基磺酰氟（PMSF）、溴乙酸（BrAc）、乙酰丙酮、巯基乙醇（ME）等化学修饰剂选择修饰中华蜜蜂碱性磷酸酶多种氨基酸残基，并测定其酶活力变化。结果表明，DTNB、PMSF的修饰不表现对酶的抑制作用，而NBS、BrAc、ME能显著抑制酶的活力，乙酰丙酮也能抑制酶的活力，但是不太明显。因此认为Trp、His是中华蜜蜂工蜂碱性磷酸酶的必需功能基团，部分二硫键对保护酶的催化功能也是必需的。     

犬埃立克体病诊断与防治研究进展

犬埃立克体病是由严格细胞内(白细胞或血小板)寄生的埃立克体(Ehrlichia,属立克次体科)所致的疾病。该病是以热带和亚热带为主的全球性分布的疾病,由于犬埃立克体主要对犬的白细胞和脾脏等造成损伤,病犬表现为免疫力低下、极度消瘦,犬埃立克体病也被称为犬的艾滋病。近年来我国有多起关于犬发生犬埃立克体病的报道。论文就该病进行系统的论述,希望能够对该病的诊断和防治带来帮助。     

猪流行性腹泻病毒山西分离株S基因遗传变异分析

为分析山西地区猪流行性腹泻病毒（PEDV）的遗传变异情况,试验利用RT-PCR方法对2014-2015年山西省疑似猪流行性腹泻的阳性病料进行克隆和测序,获得4个S基因片段,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与国内外毒株进行比对分析。序列分析结果显示,4株PEDV山西分离株的S基因与CV777 vaccine相比,在170~171 bp之间插入12个核苷酸,在401~402、454~455 bp之间均插入3个核苷酸,在461~468 bp之间缺失6个核苷酸。4株PEDV山西分离株S基因之间核苷酸和氨基酸同源性分别为99.2%~99.8%和98.6%~99.7%,与2011-2015年中国流行毒株、CV777 vaccine、attenuated DR13、CV777的核苷酸同源性分别95.0%~98.5%、93.2%~93.6%、93.2%~93.7%、93.7%~94.4%,氨基酸同源性分别为96.2%~98.9%、91.9%~92.6%、92.1%~92.9%、92.9%~94.0%。遗传进化树分析结果表明,PEDV S基因分为3个群,4株PEDV山西分离株属于第一群,与2010年以后国内流行毒株（除AH-M、SQ2014）的亲缘关系较近,与2010年以前中国流行毒株、2个日本株、7个韩国株、2个疫苗株的亲缘关系较远。研究结果提示山西省流行的PEDV发生较明显的变异,需研发新的疫苗来控制PEDV的暴发。