产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌检测方法研究进展

抗生素的不合理使用使得细菌耐药性快速产生及传播，细菌耐药性已然成为重大公共卫生问题。碳青霉烯类抗生素在临床治疗中表现良好，常作为治疗多重耐药菌感染的最后一道防线，碳青霉烯耐药菌的出现对公共卫生安全产生了极大的威胁。产碳青霉烯酶是碳青霉烯耐药菌耐药的主要机制，因此，对产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的检测至关重要。目前，对于碳青霉烯酶的检测手段以表型检测和分子生物学检测方法为主。表型检测一般易于操作，成本低廉，便于在临床进行，但在检测效率和检测用时方面差强人意。分子生物学及其他新型技术在保持高特异性和敏感性的基础上能做到快速、高通量检测，但试验检测的成本高，需专业设备和人员，部分技术在碳青霉烯酶检测领域仍有待开发。当前，多种碳青霉烯酶的检测方法可针对不同的需求和目的，并没有一项检测能满足所有情况。进行检测时，试验所需时间、操作难度、经济成本等都需列入考量，应根据实际情况选择合适的检测方法。笔者通过结合当前背景，归纳总结产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的检测方法，从试验特异性与敏感性、可操作性、检测时间、试验成本等方面分析比较各个方法特点，以期为之后新的检测方法的开发及现有方法的改良研究提供切入点，为临床监测与检测方案的制定和实行提供思路。     

表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序，根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化，再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中，并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞，构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000，经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后，对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛，在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清，用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示，PCR扩增到了1 149 bp的目的片段，乳酸菌密码子偏嗜性优化后，GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符，在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带，与预期蛋白大小一致，且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明，表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应，该重组菌具有较好的免疫原性。     

液液系统中荷电射流不稳定性

针对生物柴油液液静电雾化乳化过程,建立了色散方程并应用Matlab进行数值计算,分析了水射流速度、荷电电压、水与生物柴油各自的黏度、表面张力对生物柴油中水射流不稳定性的影响.研究结果表明,在水-生物柴油系统中,提高水射流的速度或荷电电压,均能使界面波最大增长率增大,对应的最优波数也随之增加.水的黏度阻碍水射流的破碎雾化,而生物柴油黏度对水射流的破碎雾化却起着促进作用.水-生物柴油的界面张力越小,对液液静电雾化乳化过程越有利.在水-生物柴油液液静电雾化乳化实际应用过程中,除提高水射流速度和荷电电压外,提高水的温度同时尽可能地降低生物柴油的温度,可以形成粒径细小均匀离散相液滴,获得优质的生物柴油乳化燃油.     

1株鸭源非O1/O139群霍乱弧菌的分离鉴定与致病性分析

为探明引起贵州省某鸭场雏鸭发病的病原及其致病性和耐药情况，本研究对该鸭场送的疑似细菌感染病鸭进行剖检，取鼻黏膜、心脏和肝脏等组织器官接种于培养基中进行细菌分离鉴定，通过对分离菌进行药敏试验、动物回归试验和毒力基因检测研究其耐药情况和致病性。结果显示，分离菌在血琼脂培养基上生长16 h后呈现为边缘整齐、有光泽的乳白色菌落，伴有β-溶血现象，经革兰氏染色后在生物显微镜下呈两端钝圆、弧状、排列无规则的革兰氏阴性短小杆菌，与霍乱弧菌相符；16S rDNA基因序列同源性及系统进化树显示，该分离菌与霍乱弧菌同源性高达99.6%~99.7%聚为一支；药敏试验结果显示，分离菌对大部分药物都表现为耐药，其中对氨苄西林、克林霉素、复方新诺明、苯唑西林和克林霉素等抗菌药耐药性较强，对头孢哌酮和头孢曲松敏感；动物回归试验显示，分离菌可导致试验组雏鸭5 d内全部发病死亡，表明该分离菌对雏鸭具有较强的致病性；毒力基因PCR检测结果显示，检测的霍乱弧菌相关毒力基因hlyA、ompW和chxA为阳性，而检测的O1群rfb、O139群rfb、tcpA及ctxA基因为阴性，表明本次分离的霍乱弧菌携带有致病基因，但不属于O1和O139血清群。结果表明，该鸭场雏鸭发病的疫情病原为非O1/O139血清群霍乱弧菌，该菌致病性强且对多种抗菌药物耐药。本试验结果为贵州省鸭霍乱弧菌病的防控提供了参考依据。     

贵州省鸟类新纪录——栗树鸭

2020年4月14日,在贵州省贵阳阿哈湖国家湿地公园保育区内(106°39′0.13″E,26°30′28.46″N,1107 m)开展鸟类监测,于浅水沼泽区拍摄到2只雁鸭类,经鉴定为栗树鸭(Dendrocygna javanica)。通过查阅相关文献,该种在贵州省的分布尚未记录过,属贵州省鸟类新纪录。本文对发现地概况、形态特征、生境特征和分布现状以及对该物种的保护进行了简要讨论。     

西藏蔷薇科观赏植物资源及多样性研究

西藏拥有独特的高原自然环境条件和地理优势,为植物提供了较好的生长环境,孕育了许多具有特色的植物资源。采用野外实地踏查,采集、整理标本以及查阅大量文献等方法,对该区蔷薇科观赏植物资源及多样性进行了系统的研究。结果表明:该区共有蔷薇科观赏植物30属244种,是西藏种子植物区系中的第五大科,种数仅次于菊科、禾本科、豆科、杜鹃花科。其中,单种属有8属,占该区蔷薇科植物总属数26.67%;寡种属(含2~10种)有14属,占总属数46.67%;大型属(11种及以上)有8属,占总属数26.67%。水平分布上以藏东南高山深谷区的种数最多,有162种,占种数的66.94%;垂直分布上以海拔800~5 200m处为主。与四川、云南的相似性程度最高。该区以伯舒拉岭以北的三江河谷地带;尼洋河、帕龙藏布流域、易贡藏布中上游及雅鲁藏布江中游地区;喜马拉雅山脉东段南翼,伯舒拉岭以西的低山地带等暖湿带生境的丰富度最高。该区蔷薇科观赏植物地理分布类型共8种和4个分布区变形,温带成分优势突出,与北温带、旧世界温带、东亚都存在着联系;热带成分次之。该区蔷薇科观赏植物以观花观果类优势最为明显。研究认为,西藏蔷薇科观赏植物资源较丰富,对西藏地区寒冷、多岩石、土壤贫瘠等恶劣的生态环境来说,无疑是丰富局部区域生态群落结构、增加园林植物种类、提高绿化率优良植物。     

莫子山体育公园景观规划设计探究

以体育公园规划设计的基本理论为基础,分别叙述了方案的总体规划设计、功能分区、植物规划设计、道路规划设计和水体规划设计5个方面,将观赏性与实用性相结合,以期使之成为真正意义上的体育公园。     

Expression,Purification and Activity Evaluation of Mb1230 Gene of Mycobacterium bovis

To explore the value of Mb1230 protein of Mycobacterium bovis in the diagnosis of bovine tuberculosis,we obtained the Mb1230 gene by PCR and constructed recombinant plasmid pET-22b-Mb1230.Recombinant Mb1230 protein was obtained by IPTG induction and purified by affinity chromatography.The activity of the recombinant protein was evaluated by TST test,IGRA test and indirect ELISA.The size of the recombinant protein matched with the theoretical value proved by SDS-PAGE;Western blotting result showed that the recombinant protein could react with mouse anti-His antibody,and had specific band;The results of TST test,IGRA test and indirect ELISA test also showed the recombinant protein had antigenic activity.The results indicated the recombinant protein Mb1230 had good B cell and T cell activity,so,it had the potential application in the diagnosis of bovine tuberculosis.     

不同粗纤维水平饲粮对烟台黑猪肥育性能及胴体肉品质的影响

选择2014年春季出生的生长发育良好、胎次相近、体重35 kg左右的烟台黑猪仔猪95头为研究对象,随机分为3组,低纤维水平组31头饲喂低纤维水平饲粮,中纤维水平组34头饲喂中等纤维水平饲粮,高纤维水平组30头饲喂高纤维水平饲粮。每组3个重复,每个重复10~12头。结果表明:不同粗纤维水平饲粮对烟台黑猪35~75 kg生长期和75~95 kg肥育期的平均日增重影响显著。其中,生长期平均日增重以低纤维水平组最高,分别比中纤维水平组和高纤维水平组提高14.91%(P0.05)、23.05%(P0.01);肥育期平均日增重以中纤维水平组最高,分别比低纤维水平组、高纤维水平组提高20.96%(P0.05)、5.62%(P0.05)。生长期和全期料重比以低纤维水平组最低即饲料报酬最高,分别比中纤维水平组、高纤维水平组降低6.59%、15.51%、2.85%、6.14%。饲粮粗纤维水平对烟台黑猪胴体性能影响不显著,对肉质性状中的a值及干物质含量影响显著。a值、干物质和肌内脂肪含量都以低纤维水平组最高,分别比中纤维水平组和高纤维水平组提高9.75%(P0.05)、13.72%(P0.05)、6.09%(P0.05)、8.31%(P0.05)和110%(P0.05)、122.35%(P0.05)。不同粗纤维水平饲粮对烟台黑猪背最长肌的酪氨酸和苯丙氨酸影响显著,酪氨酸和苯丙氨酸含量都以高纤维水平组最高,分别比低纤维水平组和中纤维水平组提高10.00%(P0.05)、4.05%(P0.05)、11.90%(P0.05)、5.62%(P0.05)。不同粗纤维水平饲粮对烟台黑猪背最长肌亚油酸含量影响显著,对其他3种脂肪酸影响不显著。亚油酸含量以高纤维水平组最高,比低纤维水平组、中纤维水平组分别提高35.14%(P0.05)、4.74%(P0.05),其次是中纤维水平组较高,比低纤维水平组提高29.02%(P0.05)。综合分析,烟台黑猪适宜的饲粮粗纤维水平生长期为10%,肥育期为12%。     

水稻根系育种研究进展

水稻（Oryza sativa L.）根系对水稻的生长发育及产量形成具有至关重要的作用。根据目前水稻根系育种的研究现状，分析了水稻根系育种对提高产量、改变形态特征和生理特性的重要性，并对其研究前景进行了分析和展望。