猪腺病毒3型Hexon蛋白多克隆抗体制备与免疫活性鉴定

本研究旨在制备猪腺病毒3型(PADV-3)Hexon蛋白多克隆抗体.试验构建重组原核表达载体pET28a-Hexon,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行Western blotting鉴定,目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫家兔制备Hexon蛋白多克隆抗体.采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度.结果显示,Hexon蛋白原核表达以包涵体形式存在,分子质量约为105 ku;真核细胞表达的Hexon蛋白均定位于HEK293细胞质内,细胞核内无分布;IPMA测定所制备的多克隆抗体滴度为1:1 600,该抗体与体外培养的PADV-3及稳定表达Hexon蛋白的细胞均呈特异性反应.结果表明本试验制备的PADV-3型Hexon蛋白多克隆抗体免疫活性和特异性良好.     

球孢白僵菌-玉米共生体对亚洲玉米螟取食行为的影响

为明确球孢白僵菌-玉米共生体对亚洲玉米螟幼虫取食行为及取食选择性的影响,本文通过室内控制试验,采用培养皿叶盘法,研究了共生体对亚洲玉米螟初孵幼虫和3龄幼虫的选择、非选择性取食的影响。结果表明,在48 h非选择性试验中,亚洲玉米螟初孵幼虫在球孢白僵菌-玉米共生体叶片组织（处理组）上的取食率显著低于未接种球孢白僵菌玉米叶片（对照组）,第48 h时在共生体和对照玉米上的幼虫取食率分别为35.7%和62.5%,差异极显著;3龄幼虫在共生体茎秆组织上的取食率与对照组玉米差异不显著。在48 h选择性试验中,初孵幼虫在共生体玉米叶片组织上的取食率显著低于对照组,共生体玉米叶片组织上的幼虫取食率随时间的增加呈下降趋势,第48 h时在共生体和对照玉米上的幼虫取食率分别为6.3%和20.6%,差异极显著;3龄幼虫在共生体和对照组玉米茎秆组织上的幼虫取食率随时间的增加呈上升趋势,其中对照组幼虫取食率显著高于处理组,第48 h时在处理组和对照组玉米上的幼虫取食率分别为33.1%和45.6%,差异极显著。本研究初步表明,球孢白僵菌-玉米共生体对亚洲玉米螟幼虫的取食行为有显著的抑制和忌避作用。     

芜菁花叶病毒不同分离物3'-cDNA片段的克隆及序列分析

 从河北、北京、山东泰安和潍坊等地区的萝卜、大白菜、甘蓝、油菜上得到8个芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)分离物,测定了它们3'-末端cDNA片段的序列。根据衣壳蛋白基因(cp)核苷酸序列可以将这8个分离物与另外2个TuMV分离物分为3组:泰安旧镇大白菜(JZBC)、甘蓝(JZGL)和萝卜(JZLB)分离物为一组;北京(BJILB)、潍坊萝卜分离物(WFLB)与引起萝卜红心病的TuMV分离物(WFLB99)为一组;泰安范镇、河北、潍坊(WFLB04)萝卜和泰安旧镇油菜(JZYC)上的TuMV分离物为一组。农壳蛋白氨基酸序列比较结果与此基本一致,所不同的是分离物WFLB99与所有分离物的差异均较大,形成单独一个分支。有必要对TuMV的变异情况和致病机理进行深入研究。     

Effects of glycine on intracellular of free calcium and tumor necrosis factor-α of cardiomyocytes during hypoxia/reoxygenation

AIM: To observe the influence of glycine on intracellular free calcium, the concentration of tumor necrosis factor-α and the survival rate of myocardial cells during hypoxia/reoxygenation (H/R). METHODS: The simulated model of myocardial ischemia-reperfusion with the primary cultured cardiomyocytes of neonatal rats was established, and the cultured cardiomyocytes were divided into seven groups, control group, hypoxia/reoxygenation group, glycine (0.5 mmol/L) plus hypoxia/reoxygenation group, glycine (1.0 mmol/L) plus hypoxia/reoxygenation group, glycine (2.0 mmol/L) plus hypoxia/reoxygenation group, glycine (4.0 mmol/L) plus hypoxia/reoxygenation group, 4.0 mmol/L glycine group. RESULTS: Within certain concentration (0.5-2.0 mmol/L), the glycine could inhibit the calcium overload resulting from hypoxia/reoxygenation injury in cells in a dose-dependent manner with the optimal inhibitory effect at 2.0 mmol/L. Glycine inhibited the secretion of tumor necrosis factor-α from myocardial cells and increased the survival rate of myocardial cells. CONCLUSION: Glycine has a protective effect on hypoxia/reoxygenation myocardial cells, which may be related to inhibiting calcium overload and decreasing the production of tumor necrosis factor-α.     

Effects of 11, 12-EET and ischemic preconditioning on phosphorylated ERK and p38 MAPK during ischemia and reperfusion in rat myocardium

AIM: In order to study the relationship between the ERK and p38 MAPK activation and the protection of 11, 12-epoxyeicosatrienoic acid (11, 12-EET) and ischemia preconditioning (IP), the effects of 11, 12-EET and ischemic preconditioning on phosphorylated ERK and p38 MAPK during ischemia and reperfusion in rat myocardium were examined. METHODS: The rat heart was subjected to ischemia for 5 min by ligating the left anterior descending coronary artery followed by reperfusion for 5 min (two times) to undergo ischemia preconditioning. The rats were divided into 5 groups: (1) control; (2) sham group; (3) ischemia/reperfusion (I/R) group, in which the rat heart suffered from 60 min ischemia followed by 30 min reperfusion; (4) IP plus I/R group; (5) EET plus I/R group, in which 6.28×10^-8 mol/L 11, 12-EET was injected intravenously 20 min before I/R. The heart function was examined, and phosphorylated ERK and p38 MAPK were detected by Western blot. RESULTS: At 30 min reperfusion, +dp/dt_max, -dp/dt_max and LVDP decreased significantly in I/R group compared with sham group, IP plus I/R group and EET plus I/R group; Phosphorylated ERK1/2 level was higher in I/R group than sham group, but was lower in I/R group than IP plus I/R group and EET plus I/R group; Phosphorylated p38 MAPK level was lower in control, sham, IP plus I/R and EET plus I/R group than I/R group. CONCLUSION: 11,12-EET protects rat heart against ischemia/reperfusion injury, the mechanism may be related to activation of ERK1/2 and inhibition of p38 MAPK.     

糙海参胚胎和幼体发育的形态观察

为提高糙海参育苗技术,研究描述了糙海参从受精卵发育到稚参的形态变化,在显微镜下测定了受精卵、胚胎和幼体的大小,确定了糙海参胚胎发育的过程。结果表明,通过利用阴干、流水刺激法对成熟亲参进行人工催产,得到大量的受精卵,其受精率为90%以上。糙海参胚胎和幼体发育可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、旋转囊胚期、原肠期、初耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体、樽形幼体和稚参等阶段;在平均水温29℃,平均盐度34条件下,糙海参受精卵经3 h发育形成囊胚,4 h进入旋转囊胚期,5 h进入原肠期,19 h完成胚胎发育变态为耳状幼体;并经过7 d的生长与发育进入樽形幼体;第15天变态为稚参。观察发现,多精入卵现象则会导致胚胎发育不正常,最终使胚胎发育停止并死亡。在糙海参幼体发育过程中,大耳状幼体期幼虫臂的大小及其球状体的形成均可作为判断其幼体发育健康状况的重要指标:幼虫臂越大,球状体出现率越高,其幼虫的变态率和成活率也越高。对比发现,位于糙海参尾部的突出结构——尾突,为仿刺参和新西兰刺参所没有,这一结构差异同时导致了其骨片位置也不同;并且,糙海参胚胎和幼体与其他种类的海参在发育时间上存在一定差异。     

大黄鱼冰鲜杂鱼饲料中细菌多样性研究

为研究大黄鱼（Larimichthys crocea）冰鲜杂鱼饲料中细菌的多样性,用细菌通用引物构建了细菌16S rRNA基因克隆文库。从文库中随机挑选125个克隆子进行限制性片段长度多态性（ RFLP）分析,得到82个不同的RFLP 带型。对部分代表性克隆子进行测序,得到23条有效序列。序列同源性分析和系统进化分析结果表明,大黄鱼冰鲜杂鱼饲料中细菌主要分为3大类群,其中γ-变形菌纲（γ-Proteobacteria）细菌占据明显地优势地位,约占所分析克隆子数的84.4％;其次是黄杆菌纲（Flavobacteria）细菌,约占10.9％;还有少量的梭杆菌纲（Fusobac-teria）细菌,约占4.7％。γ-变形菌纲细菌中以嗜冷杆菌（Psychrobacter sp.）最多,其次是发光杆菌（Photobacteri-um）。     

草地贪夜蛾幼虫龄期对自相残杀行为的影响

对群体饲养下草地贪夜蛾幼虫在不同龄期的自相残杀行为进行了比较研究,结果表明:在4种密度(5、10、20头/瓶和30头/瓶)下,不同龄期的幼虫自相残杀率差异显著,不同密度下的自相残杀行为主要集中在5龄幼虫,其自相残杀率均在5龄第2天时最高,在5、10、20和30头/瓶中分别为(14.34±3.28)%、(17.94±3.26)%、(18.21±3.47)%和(27.05±5.52)%,幼虫在5龄前的自相残杀行为并不明显。进一步测定发现,相同数量的4龄和5龄幼虫混合后在3种密度(4、10和20头/瓶)下的自相残杀率无显著差异(F=2.29,df=2,P>0.05),但随着幼虫密度的增加,死亡的4龄幼虫占总死亡个体的比例升高,而死亡的5龄幼虫所占比例下降。这说明草地贪夜蛾同一龄期的幼虫自相残杀行为具有明显的龄期依赖性,自相残杀行为主要发生在高龄幼虫间。低龄和高龄幼虫同时存在时低龄幼虫被残杀的比例较高。试验结果对于草地贪夜蛾的室内大量饲养具有一定借鉴作用。     

虾类产品鲜度判定方法

鲜度是虾类产品品质与加工适性的一个重要指标,在捕捞、收购、运输、加工和销售过程中常常需要对虾的鲜度质量进行评价.目前,对虾类产品鲜度判定方法包括感官评价、化学、微生物方法等.随着水产科学研究的深入和人们对虾类产品卫生安全要求的提高,对虾类产品鲜度的各种判定方法也有长足的发展,特别是一些快速简便的判定方法更值得关注.笔者拟对虾的鲜度变化规律、有关虾类产品鲜度判定方法和未来发展趋势进行综述,以期为虾类产品生产加工者提供理论依据.     

氮磷钾养分配比对温室土培黄瓜产量及品质的影响

在日光温室内,采用盆栽方式研究了不同氮磷钾养分配比对土壤栽培黄瓜产量及其品质的影响。结果表明：增加磷素用量和比例可以显著提高黄瓜的产量;适量氮钾肥配合增施磷肥可以增加果实中可溶性蛋白含量,适量氮磷肥配合增施钾肥可以改善果实品质,提高可溶性糖和维生素C含量,降低硝酸盐含量。