猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化

以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。     

兽药产品批准文号申报核发及管理有关问题探讨

兽药产品批准文号管理是我国控制兽药市场准入的前置性管理模式,本文就目前兽药产品批准文号申报、核发及管理中存在的一些问题进行了分析,对企业申报兽药产品批准文号时的注意事项进行了阐述。     

苜蓿皂甙对断奶仔猪生长性能和抗氧化性能的影响

为探讨苜蓿(Medicago sativa)皂甙对断奶仔猪生长性能和抗氧化性能的影响,选用72头体重7.5 kg左右的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪进行研究。试验随机分为4组:基础日粮组(C)、基础日粮添加0.5%苜蓿皂甙组(T1)、基础日粮添加1%苜蓿皂甙组(T2)和基础日粮添加2%苜蓿皂甙组(T3),每组3个重复,每个重复6头猪(公母各3头)。结果表明:苜蓿皂甙可以显著提高断奶仔猪的日增重(P<0.05),降低料重比,以T2组(1%苜蓿皂甙)效果最好;苜蓿皂甙可以显著提高断奶仔猪血清和组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.05),降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.05),而且随着苜蓿皂甙水平的增加,仔猪血清和组织中GSH-PX,SOD的活性呈升高趋势,MDA的含量呈下降趋势。因此,在断奶仔猪日粮中添加苜蓿皂甙可以提高其抗氧化能力,促进其生长。     

味精蛋白对鸡代谢能和养分代谢率影响的研究

试验选用24只2kg左右的蛋公鸡,随机分为4个处理,每个处理6只鸡,前3个处理分别给每只鸡强饲占体重3%的待测原料,第4个处理作为内源对照组,测定内源排泄量,以评定味精蛋白对鸡代谢能和养分代谢率的影响。结果表明:味精蛋白的总能比豆粕高3.87%,而比玉米蛋白粉低15.56%;粗蛋白含量达到71.45%,分别比豆粕和玉米蛋白粉高64.03%和22.32%。味精蛋白的表观代谢能、真代谢能、粗蛋白表观消化率和真消化率、总氨基酸表观消化率和真消化率均极显著低于豆粕和玉米蛋白粉(P<0.01)。而干物质表观消化率和真消化率三者间无显著差异(P>0.05)。在已测定的17种氨基酸中,除甘氨酸外,味精蛋白粉其他氨基酸表观消化率和真消化率均极显著低于豆粕和玉米蛋白粉(P<0.01)。这表明味精蛋白的养分利用率低于豆粕和玉米蛋白粉。     

超高压提取黄精多糖及提高运动耐力机制

为确定炮制黄精多糖(PPP)的最佳提取工艺,本试验以黄精为原料,进行炮制,利用超高压技术提取PPP,分析了压力强度、保压时间、料液比对PPP提取率的影响,采用Box-Behnken响应面分析法(RSM)优化PPP提取条件,并对所得多糖进行动物体内试验,分析小鼠血清、肝脏和左腿腓肠肌中相关酶的活性变化,探究其提高机体运动耐力机制。结果表明,PPP最佳提取工艺条件为:液料比23 mL·g^-1、保压时间6.73 min,压力强度293 MPa,在此条件下PPP得率为13.46%;能显著提高小鼠力竭游泳时间(P<0.05),相比于游泳对照组,小鼠血清中尿素氮(SUN)、乳酸(Lac)和肝脏丙二醛(MDA)含量显著下降(P<0.05),同时乳酸脱氢酶(LDH)活性下降、Ca²⁺Mg²⁺-ATP酶及肌酸激酶(CK)活性上升,对提高小鼠运动耐力具有较好的效果。本研究结果为超高压提取PPP奠定了基础,并为PPP提高运动耐力的机制研究提供了数据支持。     

恒河猴甲状腺与甲状旁腺的组织学观察

应用光镜和透射电镜技术，探讨了2～15岁恒河猴甲状腺和甲状旁腺的细微结构。结果表明，甲状腺实质由滤泡和滤泡旁细胞构成。滤泡大小不等，平均直径173μm，由单层低立方上皮细胞围成，细胞平均高度4．93μm，胞质内含较丰富的细胞器和胶质小泡等。滤泡旁细胞较少，平均直径13．20μm，位于滤泡之间或镶嵌于滤泡上皮细胞之间，胞质内含少量的分泌颗粒。甲状旁腺位于甲状腺内，其实质由暗主细胞、淡主细胞、暗嗜酸性细胞、淡嗜酸性细胞组成，并可见腺泡样结构和脂肪细胞。主细胞平均直径6．96μm，嗜酸性细胞11．69μm。     

养鱼池塘增氧机械产氧量比较

为比较分析不同类型机械增氧效果,选择扬水水车式、微管鼓风式、涡轮叶片式和扬水喷水式4种增氧机械,采用滴定法测定开机前后养鱼池塘溶氧量,用养殖种类、增氧时间校正,同一时间内,单位功率的产氧量分别是3953.42、735.66、616.58、177.55/(g/kw.h),扬水水车式显著高于其他增氧方式产氧量。     

家蚕法尼酸甲基转移酶(FAMeT)基因的鉴定及表达模式分析

保幼激素(JH)是昆虫生长、发育、变态和生殖等一系列生理生化过程中必不可少的一类激素。法尼酸甲基转移酶(farnesoic acid O-methyltransferase,FAMeT)被认为是昆虫及其它节肢动物催化合成保幼激素前体甲基法尼酸(methyl farne-soate,MF)的关键酶。通过生物信息学分析,从家蚕全基因组数据中共鉴定了7个编码家蚕FAMeT的基因(BmFAMeT1～BmFAMeT7)。系统进化分析暗示BmFAMeT2可能是家蚕FAMeT家族成员的最原始拷贝。对其中位于6号染色体上的BmFAMeT5、BmFAMeT6和BmFAMeT7的时空表达谱分析显示,3个基因从家蚕胚胎发育后期至成虫期持续性表达;在5龄第3天幼虫中肠组织特异性高水平表达。利用RACE技术克隆获得了这3个基因的全长cDNA序列,并发现BmFAMeT5及BmFAMeT6分别存在2种不同的选择性拼接形式。上述结果为进一步研究家蚕FAMeT的生物学功能提供了线索。     

赴美国肉牛规模化生产技术考察团考察报告（二）——释惑美国肉牛生产技术之妙

美国是世界肉牛业最发达的国家之一,其肉牛产业链较健全、组织化程度较高。美国的肉牛品种有100多个,但常用的只有10个左右,其中,安格斯牛占全关登记注册种牛的40％。美国有95％的肉牛进行本交,只有5％的肉牛开展人工授精;商品牛群充分利用杂交优势来提高经济利益。美国在肉牛育肥方式上特别是高能量饲料和高蛋白饲料的应用上是非常科学合理的。     

恩诺沙星与磺胺二甲嘧啶联合毒性探究

本研究旨在探究恩诺沙星与磺胺二甲嘧啶的联合毒性。选取SD大鼠为试验对象,将其分成6组,每组12只,分别为高剂量联合用药组（500 mg/kg体重）、中剂量联合用药组（250 mg/kg体重）、低剂量联合用药组（50 mg/kg体重）、恩诺沙星单药组（250 mg/kg体重）、磺胺二甲嘧啶单药组（250 mg/kg体重）及对照组（等量0.5%羧甲基纤维素钠溶液）,配制相应的药物进行灌胃,最后一次给药1 d后对大鼠进行称重、麻醉、心脏采血并剖检取肝脏组织,然后对大鼠增重率、血常规指标、血清生化指标及肝脏病理学变化几个方面进行分析,并利用SPSS 22.0软件评估2种药物的联合作用效果。结果显示,在雌性大鼠中,高、中剂量联合用药组使大鼠增重率显著下降（P<0.05）,雄性大鼠增重率无显著变化（P>0.05）;雄性大鼠给药组白细胞数量均显著增加（P<0.05）,高剂量联合用药组中性粒细胞和淋巴细胞占比分别表现为显著升高及下降（P<0.05）;高、中剂量联合用药组大鼠外周血中谷草转氨酶含量显著增加（P<0.05）,且高、中剂量联合用药组肝脏病理切片视野可见不同程度的炎性细胞浸润,并伴有不同程度的损伤。本研究结果表明,恩诺沙星和磺胺二甲嘧啶联用可使毒性增加,对大鼠的免疫系统状态有一定的影响,且能造成一定程度的肝脏损伤,剂量越高影响越大。本研究为恩诺沙星和磺胺二甲嘧啶联合用药机制的研究提供数据支持,并为二者的临床应用提供参考,提示新的食品安全评估应考虑药物联合暴露带来的影响。