利用冷冻切片法与石蜡切片法对水貂组织切片进行优化研究

应用冷冻切片法和石蜡包埋切片法,对水貂体组织进行切片后HE染色观察;并在冷冻切片方法中应用3种不同的固定剂,对固定剂的同定效果进行对比分析。结果表明,石蜡切片法更适合于脑组织,而冰冻切片法更适合于皮肤组织。冰冻切片方法中3种固定剂的固定效果比较,同定NA（无水乙醇80mL、甲醛10％10mL、冰醋酸10mL）优于固定剂C（10％的福尔马林溶液）与固定剂B（甲醛40％15mL、无水乙醇85mL）。     

苦瓜皂苷和多糖的连续提取工艺及其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

 【目的】建立超声-微波法连续提取苦瓜皂苷和多糖的优化工艺,并评价其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。【方法】采用二次回归正交旋转组合设计优化超声-微波法连续提取苦瓜中皂苷和多糖的工艺条件,采用4-硝基酚-2-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定皂苷和多糖提取物对α-葡萄糖苷酶抑制率。【结果】以含水质量分数13%的苦瓜干为原料,先提取皂苷后提取多糖的条件为,将其粉碎至200目后,以体积分数75%乙醇为溶剂,料液比     1﹕18,超声-微波协同萃取（50 W,20 kHz）16 min,在该条件下,皂苷提取率达2.51%。提取皂苷后的残渣,继续以水为溶剂,料液比1﹕14,pH 8.0,时间23 min,温度84℃,超声-微波协同萃取（50 W,20 kHz）20 min,多糖提取率达12.86%。苦瓜皂苷和多糖提取物对α-葡萄糖苷酶均有不同程度的抑制作用,其IC50 分别为1.03 mg•mL-1和10.73 mg•mL-1,苦瓜皂苷的抑制效果显著强于多糖的（P＜0.05）。【结论】采用超声-微波协同作用连续提取苦瓜皂苷和多糖工艺,可有效利用原料、提高产出和效率,所得苦瓜皂苷和多糖提取物对α-糖苷酶均表现抑制作用,显示一定的降糖潜力。     

村庄内生秩序与农村生态社区建设

当前在我国农村由传统村落向现代社区转型时期,由传统村落内部携带而来的内生秩序,正不可避免地对农村生态社区建设施加着特有的影响。在阐述村庄内生秩序对农村生态社区建设积极影响的基础上,剖析了其制约因素,提出了村庄内生秩序与农村生态社会的和谐共进的机制构想。     

不同用量保水剂对紫花苜蓿比叶面积和光合特征的影响

为保持与高效利用绥化地区有效降水而达到人工苜蓿草地稳产增产的目的,以保水剂不同用量（0、15、30kg.hm-2）研究其用量对紫花苜蓿比叶面积和光合特征的生理响应。结果表明：施用保水剂对紫花苜蓿比叶面积无显著影响,对叶绿素含量和光合特征有显著影响。保水剂施用量为15kg.hm-2时,保水剂能显著提高紫花苜蓿叶片的pn、gs、Tr和WUE,而保水剂施用量为30kg.hm-2时,保水剂显著降低了pn、gs和Tr,但没有影响WUE。紫花苜蓿pn与gs、pn与Tr的相关性以施用量30kg.hm-2处理最强,依次是15kg.hm-2和CK。pn与WUE以施用量15kg.hm-2处理最强,依次是CK和30kg.hm-2处理。因此,加强保水剂在苜蓿产业化生产中的应用性仍需研究。     

农民专业合作社参与沟域经济发展分析

重视农民主体地位是社会生产力发展的必然要求。沟域经济开辟山区经济社会发展的新模式,其发展的根本动力就在于农民作为主体的主观能动性的发挥。然而现有三种沟域经济组织模式中,农民主体地位的实现程度普遍不高。在研究沟域经济农民主体地位缺失现状及原因的基础上,提出依托农民专业合作社参与组织模式来提高农民的主体地位,推动沟域经济发展的理念。农民专业合作社参与模式是组织制度创新的结果,其维护农民的合法权益,提高农民的主体地位,推动沟域经济可持续健康发展,其是未来沟域经济组织模式发展的必然趋势。     

多年生黑麦草高频再生体系的建立及农杆菌介导PEPC基因的转化

以多年生黑麦草(Lolium perenne L.)成熟种子作为外植体,建立其高频再生体系,通过农杆菌介导法将磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因转入,为多年生黑麦草的抗逆转基因工作奠定基础。结果表明:种子充分灭菌后在附加6.0 mg·L^-1 2,4-D的培养基中诱导愈伤组织,诱导率可达61.33%。愈伤组织在2,4-D浓度减半的培养基上继代培养长势良好,分化培养基为MS培养基附加1.0 mg·L^-16-BA,分化率最高达到61.33%,在1/2 MS+0.5 mg·L^-1 NAA培养基中进行生根培养,生根率达100%。以该再生体系为基础,将获得的愈伤组织作为外植体进行遗传转化,经筛选培养后得到再生植株,通过PCR及实时荧光定量(Real-Time)PCR验证表明PEPC基因已成功转入,转化率为8.67%。试验结果将为多年生黑麦草抗性品种的研究奠定基础。     

猪圆环病毒Ⅱ型Cap、Rep基因原核表达质粒的构建与表达

为进一步建立猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ)的有效检测方法,以及制备结构蛋白Cap和非结构蛋白Rep的单克隆抗体。根据GenBank中登录的PCVⅡ序列,设计2对特异性引物,PCR扩增出Cap、Rep蛋白基因,连接到pMD18-T simple质粒上,测序正确的Cap和Rep基因双酶切后分别插入到pACYCDuet-1上,构建成原核表达质粒pACYCDuet-1-Cap、pACYCDuet-1-Rep和pACYCDuet-1-Rep-Cap,然后将上述原核表达质粒转化BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。结果表明：成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了猪圆环病毒Ⅱ型的Cap、Rep蛋白,且Rep、Cap蛋白共表达质粒pACYCDuet-1-Cap-Rep的表达效果优于其他2种质粒。     

低温胁迫对番茄幼苗叶片中脯氨酸降解酶的活性及其基因表达量的影响

为了探讨脯氨酸代谢与番茄抗寒性之间的关系,采用常规方法测定了低温胁迫不同时间下番茄幼苗叶片中游离脯氨酸含量和脯氨酸脱氢酶活性,采用实时荧光定量PCR法检测了不同处理时间下脯氨酸脱氢酶基因的表达量,并分析了各项指标的动态变化。结果表明,在低温逆境下,耐寒性品种O-33-1中脯氨酸积累量总体呈增加的趋势,而冷敏感品种‘耐运2000’游离脯氨酸积累量下降,说明脯氨酸积累量的变化在一定程度上可以体现番茄抗寒性的强弱;ProDH活性在O-33-1中呈上升趋势,在‘耐运2000’中呈下降趋势,说明脯氨酸的积累受P5CS与ProDH相反方向的共同调节,使植物体内脯氨酸含量保持在适当的水平;2个品种在低温胁迫下ProDH基因表达量都显著降低,说明低温逆境抑制了该基因的表达,使脯氨酸的降解在转录水平上受到调节。     

黄芪多糖(APS)拮抗铅镉联合致鸡脾脏细胞凋亡作用的研究

为了探讨黄芪多糖注射液对铅镉联合致鸡脾脏细胞凋亡的拮抗作用。采用TUNEL法、RT-PCR和DNA ladder方法检测分别对对照组、铅镉组和黄芪多糖-铅镉组的鸡脾细胞凋亡率和脾淋巴细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA转录水平。结果表明：与对照组比较,试验组的细胞凋亡率明显升高,Bcl-2mRNA表达水平降低;试验组和对照组差异显著或差异极显著,并且黄芪多糖-铅镉组数据介于对照组和铅镉组之间。试验结果显示：黄芪多糖注射液对铅镉联合致鸡脏脾细胞凋亡具有明显的拮抗作用。     

露水河林业局森林景观空间自相关分析与拟合

空间自相关是建立森林景观模型中不可回避的问题,然而目前众多研究中常忽略了这一点,为了探解决考虑空间自相关性,建立森林景观模型的问题,以露水河林业局为例,采用空间自相关分析、半方差分析等手段分析红松森林景观等景观类型的空间自相关性。研究结果发现,Moran’s I指数以及半方差图显示红松在空间分布上具有较强的空间自相关性,但这种空间自相关性从1987-2003年呈现减弱趋势,红松的分布由非随机因素占主导地位逐渐变为随机因素占主导地位,采伐等人为因素对于红松的分布产生了重要影响。在此基础上分别利用经典线性回归模型和空间滞后模型建立了红松森林景观分布与环境驱动因子的模拟模型,经过比较,认为空间滞后模型的拟合度优于经典线性回归模型。