Radioligand binding assay of insulin receptor in rabbit kidney during ischemic and reperfusion

AIM: To observe the change of insulin receptor in rabbit kidney with acute ischemic-reperfusion injury. METHODS: 15 Japanese white rabbits were allocated randomly into control group, ischemic-reperfusion group(IR group). IR group received clamping for 1 h followed by 2 h or 48 h of reperfusion. At 2 h or 48 h after reperfusion, glucose and insulin in serum were determined. Insulin receptor in renal tissue was analyzed by radioligand binging assay(BAD). RESULTS: The level of serum glucose increased after 2 h reperfusion in 2 groups, but in IR group the value increased much more higher than those in control groups(P＜0.05). Plasma insulin of IR group was significantly higher than that in control after 2 h reperfusion(P＜0.05). Scatchard analysis of data resulted in curvilinear profiles, indicating that there are two classes of receptors with different affinity or the presence of a single class of receptors with a negative cooperative hormone-receptor interaction. Data analyzed for a two-site model showed that the values of Bmax₁(high affinity site), Bmax₂(low affinity site) and Kd₁, Kd₂ were significantly lower than that of control (P＜0.05) after 2 h perfusion. 48 h after IR there was no difference of Bmax₁, Bmax₂, and Kd₁ between 2 groups,but Kd₂ of IR group was higher than that of control (P＜0.05). CONCLUSIONS: The results indicate that the effect of intrinsic insulin decreases in the progress of the renal ischemic-reperfusion. The resulting high serum glucose may aggravate renal injury in the progress of ischemic-reperfusion.     

中国美利奴多胎细毛羊及杂交后代多胎性状基因型分析

首次在国内采用了多胎性状基因型诊断法对多胎性状进行选择。试验采集中国美利奴多胎细毛羊及其与Romilly·Hills杂交后代、横交一代样品数分别为 47份、3 8份、2 6份 ,提取DNA确定多胎主效基因FecB 位点 ,酶切检测纯合基因BB、杂合基因B 和非多胎基因 。通过检测 ,三种基因型占样品数百分比分别为 :多胎细毛羊为 2 5 5 3 %、48 94%、2 5 5 3 % ,基因型与产羔符合率为 85 3 7% ;杂交一代为 0、76 3 2 %、2 3 68% ,基因型与产羔符合率为 76 19% ;横交一代为3 0 77%、5 7 69%、11 5 4%。在多胎性状的选择中 ,要坚决剔除非多胎基因个体 ,以缩短选育时间。     

仔猪小肠肌间神经丛NDP阳性神经元形态的定量研究

采用小肠铺片NADPH黄递酶组化染色和细胞影像分析的方法对0、5、28日龄的仔猪小肠肌间神经丛神经元群体的形态参数进行定量测定。结果表明:随日龄增长,小肠肌间神经元胞体面积增大,出生后的头几天尤为明显。NDP阳性肌间神经元胞核面积平均值与胞体面积平均值呈正相关。胞体面积平均值在0日龄为234.98±23.48μm2,5日龄为346.30±33.07μm2,28日龄为364.17μm2;胞核面积平均值在0日龄为69.85±6.27μm2,5日龄为88.25±2.39μm2,28日龄为84.15μm2。核质比随日龄呈下降趋势,核质比在0日龄为0.298±0.003,5日龄为0.257±0.027,28日龄为0.231。上述测量值不仅表现出日龄差异,而且在同一日龄小肠的前后段亦有所不同。NDP阳性神经元胞体和胞核大小都以十二指肠最大,空肠前段次之,回肠最小。0日龄仔猪神经元胞体面积分布在100～300μm2之间的占70.79%,5日龄和28日龄胞体面积分布在100～400μm2之间的分别占64.81%和63.22%。肌间神经丛NDP阳性神经元主要为Dogiel 型神经元。     

宁夏毛乌素沙地退化草原恢复演替过程中物种多样性与生产力的变化

对宁夏毛乌素沙地退化草原种植不同林龄柠条Caragana korshinskii后物种的多样性、群落结构及草地生产力进行了研究,结果表明:种植柠条林对退化草地的植被恢复有积极的作用,植物群落的多样性随柠条林龄的增加而增加,而且随林龄年份的增加,群落结构更趋于稳定.草地生产力由于土壤储水量相对较高,表现为随林龄的增加,草产量受季节降水量变化的影响较小,相对稳定的趋势.     

透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达

利用PCR技术将透明颠菌血红蛋白基因（vgb）克隆到融合表达载体pET28a，在大肠杆菌BL21（DE3）表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用Ni^2＋亲和层析对重组蛋白进行了纯化，得到重组的透明颠菌血红蛋白，蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋白与血红索相结合。紫外光区和可见光区波长扫描分析显示：蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230nm和413nm都有强吸收峰，初步表明，尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸，重组蛋白仍然具有生理活性。诱导后4h和6h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17mg／L和21mg／L。说明重组蛋白的表达明显促进了体内heme合成途径。     

降低畜产公害的营养调控

畜牧生产中产生的恶臭气体以及粪尿中的氮、磷元素、微量矿物元素等,对空气、土壤和水体造成严重的环境污染,极大地影响人类的生存质量和身体健康。利用日粮营养调控可减少氮和磷的排泄量、减少微量矿物元素的排泄量和降低恶臭的排放量。     

降水格局对科尔沁沙地三种草本植物凋落物分解的影响

基于研究区多年降水特征,设置高频低量、中频中量和低频高量3种降水格局,采用凋落物分解袋法,对科尔沁沙地3种常见一年生草本植物一个生长季地上和地下凋落物分解特征进行了研究。结果表明,降水格局和凋落物埋深均是影响分解率的关键因素。其中地表凋落物的分解率显著低于地下凋落物,随埋深增加地下凋落物的分解率有增加的趋势,10~20 cm层狗尾草地下凋落物分解率显著高于0~10 cm层(P<0.01)。低频高量降水状况下地上凋落物的分解率显著降低(P<0.01)。降水格局与凋落物埋深存在显著的耦合关系(F=3.60, P=0.008),随土壤深度增加,降水格局对凋落物分解率的影响减少,且物种间存在差异性,不同降水格局下狗尾草和黄蒿地上凋落物和0~10 cm埋深地下凋落物分解率均存在显著差异性(P<0.05),而尖头叶藜仅地上凋落物在不同降水格局下的分解率表现出显著差异性(F=48.42, P<0.001)。     

信号肽对溶血素在大肠杆菌中跨膜转运的影响

信号肽在引导外源蛋白的跨膜转运过程中具有重要作用。本试验通过PCR方法获得带有信号肽序列和不带有信号肽序列的溶血素基因,构建表达载体在大肠杆菌中进行诱导表达。经过溶血试验和免疫印迹试验证明缺失了信号肽的重组溶血素不能被跨膜转运至细胞外;带有信号肽的重组溶血素能够跨膜转运大肠杆菌细胞外。本试验为猪链球菌2型基因缺失弱毒疫苗的研究、细菌信号肽以及基因工程重组蛋白的可溶性表达进行了有益探索。     

羊种布鲁氏菌疫苗株PCR-RFLP鉴定方法的建立

为建立一种羊种布鲁氏菌Rev.1疫苗株PCR-RFLP鉴定方法,利用羊种布鲁氏菌Rev.1具有链霉素抗性的特性,选取与链霉素抗性相关编码核糖体蛋白S12的rps L基因为模板设计引物,经PCR扩增后,将产物进行Nci I酶切,发现羊种布鲁氏菌疫苗株Rev.1出现约500 bp条带,而不具有链霉素抗性的羊种布鲁氏菌株16M则出现384 bp条带。结果表明,PCR-RFLP方法能够用于羊种布鲁氏菌Rev.1疫苗株的鉴定,这为今后区分羊种布鲁氏菌疫苗株Rev.1免疫与野株感染提供了基础。