NaCl胁迫对赖草幼苗生理特性的影响

以赖草为材料,用不同浓度NaCl(100、200、300、400、500、600、700mmol/L)对赖草进行处理,通过测定叶片含水量、根冠比(R/T)、丙二醛(MDA)、可溶性糖、超氧化物歧化酶(SOD)活性,研究赖草的耐盐能力。结果表明,NaCl浓度低于400mmol/L时赖草叶片含水量、根冠比(R/T)与对照相比变化不显著(P0.05);随NaCl浓度增加,SOD活性和可溶性糖含量呈先上升后下降的趋势;MDA含量呈上升的趋势。赖草在400mmol/L NaCl胁迫下能正常生长,当浓度达到500mmol/L时生长受到影响。     

非洲马瘟病毒VP7基因拼接、表达及重组ELISA方法的建立与初步应用

采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒（AHSV）含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段,克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7,将pET-30a—VP7转化BL21（DE3）,经1．0mmol／LIPTG诱导,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-EuSA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHSV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为0．25μg／mL,血清的最佳稀释度为1：40,待检血清阳性临界值初步定为0．25。用此方法和商品化ELISA试剂盒检测了184份血清样品,结果完全符合。     

Toll-like receptor signaling is changed in ovine lymph node during early pregnancy

Toll-like receptors (TLRs) participate in regulation of adaptive immune responses, and lymph nodes play key roles in the initiation of immune responses. There is a tolerance to the allogenic fetus during pregnancy, but it is unclear that expression of TLR signaling is in ovine lymph node during early pregnancy. In this study, lymph nodes were sampled from day 16 of nonpregnant ewes and days 13, 16, and 25 of pregnant ewes, and the expressions of TLR family (TLR2, TLR3, TLR4, TLR5 and TLR9), adaptor proteins, including myeloid differentiation primary-response protein 88 (MyD88), tumor necrosis factor receptor associated factor 6 (TRAF6), and interleukin-1-receptor-associated kinase 1 (IRAK1), were analyzed through real-time quantitative polymerase chain reaction, Western blot, and immunohistochemistry analysis. The results showed that mRNA and protein levels of TLR2, TLR3, TLR4, TRAF6, and MyD88 were upregulated in the maternal lymph node, but TLR5, TLR9, and IRAK1 were downregulated during early pregnancy. In addition, MyD88 protein was located in the subcapsular sinus and lymph sinuses. Therefore, it is suggested that early pregnancy induces changes in TLR signaling in maternal lymph node, which may be involved in regulation of maternal immune responses in sheep.     

内蒙古自治区畜禽养殖粪污资源化利用的对策与建议

畜牧产业是内蒙古自治区的支柱产业之一,随着畜牧业快速发展,畜禽粪污产量持续增加,导致粪污污染日益严重,因此,畜禽养殖粪污资源化利用显得尤为迫切和重要。调研了内蒙古自治区11个旗（县、区）、95户大中型规模化养殖企业,并通过文献查阅及专家咨询等方式调研了3 700户规模化养殖企业,从内蒙古自治区畜禽粪污的基本特征、畜禽粪污资源化利用主要特征和对策与建议方面分析了自治区畜禽养殖粪污及资源化利用的情况。     

不同腐熟剂接种下肉牛粪污腐熟进程的比较研究

通过肉牛粪污好氧堆肥发酵,对接种不同腐熟剂与空白处理堆肥过程进行物理化性质分析比较,研究不同腐熟剂接种对堆肥过程的影响。结果表明：向堆肥物料中添加腐熟剂可加快堆肥升温速度,提高水分散失率、有机质降解速率,加快粪污腐熟进程,缩短堆肥周期;自主研发腐熟剂和市售腐熟剂堆肥效果相似,项目组自主研发腐熟剂具有加速肉牛粪污腐熟进程的功效。     

苏子降气汤对哮喘豚鼠引喘潜伏期及其行为学评分的影响

为观察和比较苏子降气汤对卵白蛋白(OVA)致敏豚鼠哮喘模型的治疗作用,随机将50只豚鼠分为5组,空白组、模型组、苏子降气汤高剂量组、苏子降气汤低剂量组、地塞米松组,每组10只.除空白组外,其余4组均用卵白蛋白致敏法制备哮喘豚鼠模型,造模成功后,用苏子降气汤或地塞米松治疗;第13天给药2h后,将各组豚鼠用雾化器予以1 g/L的OVA诱喘,记录各组豚鼠的“引喘潜伏期”、“行为学评分”以及“停止雾化诱喘后豚鼠从哮喘状态恢复到正常状态所需的时间”,连续诱喘3d并记录相关数据.结果显示,模型组和空白组相比,地塞米松组、苏子降气汤高、低剂量组均可不同程度延长豚鼠引喘潜伏期、降低其行为学评分、缩短停止雾化诱喘后豚鼠从哮喘状态恢复到正常状态所需的时间,具有显著性差异(P＜0.01),且苏子降气汤高、低剂量组上述效果接近地基米松组.说明苏子降气汤的确能够延迟哮喘的发作时间,并能减轻哮喘豚鼠发病的症状,提示苏子降气汤确实有良好的治疗哮喘作用.     

乳酸菌融合表达传染性法氏囊病毒VP2蛋白与大肠杆菌LTB及其诱导免疫应答的研究

为研究传染性法氏囊病毒(IBDV)保护性抗原VP2与E.coli不耐热肠毒素B亚单位(LTB)在戊糖乳杆菌(L.pentosus)中的共表达及其免疫原性,本研究以乳酸杆菌表面表达型和分泌表达型质粒pPG-1和pPG-2为载体,以VP2为目的基因,构建VP2基因单独表达及与LTB基因融合表达的4种重组L.pentosus,分别命名为pPG-1-VP2/L.pentosus、pPG-1-VP2-LTB/L.pentosus、pPG-2-VP2/L.pentosus及pPG-2-VP2-LTB/L.pentosus。表达的重组蛋白分子量大小分别约为47 ku、55 ku、45 ku及53ku。将构建的重组L.pentosus分别口服免疫SPF雏鸡,以IDEXX试剂盒测定体液免疫应答水平,结果显示,不同表达方式的重组L.pentosus均可以刺激机体产生特异性循环抗体和分泌抗体(sIgA),其中pPG-2-VP2-LTB/L.pentosus诱导产生的抗体滴度高于其它组。MTT法检测不同表达方式的重组乳酸菌免疫雏鸡外周血淋巴细胞增殖反应,结果显示特异性抗原对免疫雏鸡淋巴细胞的增殖指数显著高于未免疫组,表明重组菌能够刺激机体产生特异性细胞免疫应答。这些结果表明4种重组菌均能够刺激机体产生局部黏膜免疫和全身系统免疫应答;并且带有黏膜免疫佐剂LTB融合表达试验组高于VP2蛋白单独表达组。     

牛二酰甘油转酰基酶(DGAT1)基因的生物信息学分析

DGAT1基因作为影响奶牛产奶和肉牛肉质性状的主效基因之一,引起了人们越来越多的关注。本文应用生物信息学方法比较了人、牛、猪、绵羊等24个物种的DGAT1基因编码区(CDS)核苷酸和蛋白质序列,并对该基因的遗传多样性进行了分析。结果表明,DGAT1基因的CDS核苷酸和蛋白质序列长度多样性丰富;具有终止密码子偏爱性,包括牛在内的所有脊椎动物终止密码子都为TGA;在长度为1 187bp的33条基因序列中检测到992个多态位点,共生成26种单倍型。从聚类分析图可以看出,脊椎动物、无脊椎动物、植物和微生物的DGAT1基因之间存在着进化分歧,但界内差异较小。     

CIDR与GnRH诱导同期发情效果比较

[目的]为了观察CIDR与GnRH诱导同期发情的效果。[方法]本实验利用GnRH＋PG＋GnRH和CIDR＋EB＋P4＋PG对荷斯坦奶牛进行同期发情。CIDR组：在奶牛发情周期的任意一天（发情当天除外）,于奶牛阴道内放CIDR同时肌注2mgEB和50mgP4,人为诱导卵泡的发生,在放入CIDR的第8d肌注PG;应用GnRH组与CIDR组同步进行同期发情处理：肌注GnRH7d后肌注PG,2d后再次肌注GnRH。[结果]表明：利用CIDR与Gn—RH两种同期方法同期发情率、情期受胎率差异均不显著。[结论]在实际生产中,GnRH便于操作,且发情略高于CIDR组。     

马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定

为了建立马耳他布氏杆菌M5-90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断,本研究以bp26基因作为重组靶位点,以M5-90为亲本,利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列,将卡那霉素抗性基因(Kan')整合到细菌基因组中,双交叉重组阳性菌株,经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29 ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别,而突变株M5-90-26反应结果为阴性,表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达.M5-90-26具备从血清学角度区分M5-90-26免疫与野生型布氏杆菌感染,对布氏杆菌病防制、监测及净化具有重要的意义.