O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达

首先合成我国O型口蹄疫病毒2个疫苗毒株VP1基因的3个抗原袁位，与另外扩增的流行毒株VP1基因末端273bp片段相连,构建出O型VP1嵌合基因片段（VP1O）。然后，将VPIO基因连接到原核表达载体pET28a上，构建了重组表达质粒pET28a-VP1O，转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达。SDS-PAGE电泳表明。VP1O基因在大肠杆菌中获得表达。Western blotting检测证实表达的VP1O蛋白具有良好的生物学活性。对表达蛋白通过包涵体洗涤的方法进行初步纯化，获得了较高纯度的VP1O蛋白。     

J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165 μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。     

家禽活疫苗中鸡传染性贫血病毒PCR检测方法的建立

为建立不依赖于病毒分离的快速,特异的禽活疫苗中鸡传染性贫血病毒(CAV)监测方法,本研究建立了CAV的PCR检测方法.试验表明:该PCR不仅具有良好的CAV特异性,且检测灵敏度达3.98个TCID50/反应.用该方法监测9份随机抽取的商品禽用活疫苗发现,其中2份活疫苗呈PCR强阳性.以上结果表明,本研究建立的鸡传染性贫血病毒PCR检测方法具有特异、敏感等特点,能用于禽用活疫苗中CAV污染的快速监测.     

犬源伪狂犬病病毒的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征分析

对发生临床疑似伪狂犬病毒(PRV)感染的牧羊犬组织样品,进行研磨、细胞接种、传代培养、细胞病变效应(CPE)观察、PCR检测、效价测定、电镜观察、IFA检测、家兔接种以及基因测序分析等,结果成功分离到1株犬源PRV毒株,命名为XJ-14株。该毒株可致PK-15细胞产生变圆、破碎、逐渐呈拉网式漂浮等特征性细胞病变;PRV gE-PCR检测阳性,病毒效价达10~(-7.45)/0.1 mL;病毒粒子在电镜下呈圆形,有囊膜,直径约150 nm;PRV荧光抗体检测阳性,接种家兔后可致家兔奇痒、麻痹死亡。对该毒株gC、gE、TK基因进行全基因测序,发现gE糖蛋白的48、497位各插入了1个D,另有12个氨基酸位点发生点突变,其gC蛋白氨基酸序列64~70位出现了7个氨基酸(AASTPAA)插入。结果表明,此牧羊犬病例是由PRV感染所致。     

茶多酚的抗氧化作用及其机制

茶多酚(TP)是一种从绿茶和红茶中提取的纯天然复合物,具有清除自由基、防止DNA受损、调节细胞内抗氧化防御系统及抗癌等生物学功能。本文系统地对TP的组成成分、抗氧化作用、对丝裂原活化蛋白激酶-核因子酶2相关因子2-抗氧化反应原件(MAPK-Nrf2-ARE)信号转导通路的调控及其相关机制进行综述。     

Comparative analysis of proteomic profiles between endometrial caruncular and intercaruncular areas in ewes during the peri-implantation period

The endometrium of sheep consists of plenty of raised intercaruncular areas （IC）. In order to better understand aglandular areas called caruncular （C）, and intensely glandular the endometrium involved mechanisms of implantation, we used LC-MS/MS technique to profile the proteome of ovine endometrial C areas and IC areas separately during the peri-implantation period, and then compared the proteomic profiles between these two areas. We successfully detected 1740 and 1813 proteins in C areas and IC areas respectively. By comparing the proteome of these two areas, we found 170 differentially expressed proteins （DEPs） （P 〈 0.05）, functional bioinformatics analysis showed these DEPs were mainly involved in growth and remodeling of endometrial tissue, cell adhesion and protein transport, and so on Our study, for the first time, provided a proteomic reference for elucidating the differences between C and IC areas, as an integrated function unit respectively, during the peri-implantation period. The results could help us to better understand the implantation in the ewes. In addition, we established a relatively detailed protein database of ovine endometrium, which provide a unique reference for further studies.     

短时高温处理对意大利蝗卵子发生期HSP70蛋白表达的影响

本研究采用免疫组织化学分析方法,测定了HSP70蛋白在意大利蝗卵子发生期的表达定位及33~42℃高温处理对其相对表达量的影响。结果表明,1)在卵黄发生前期,卵母细胞和滤泡细胞均表达HSP70蛋白,而在卵黄发生期和卵黄发生后期,HSP70蛋白阳性表达位于滤泡细胞;2)在33~42℃温度范围内,随着温度升高,意大利蝗卵子发生期HSP70蛋白相对表达量呈现先上升后下降的变化趋势;其中36℃处理组HSP70蛋白相对表达量最高,显著高于27℃对照组(P0.05);42℃处理组HSP70蛋白相对表达量最低,但与27℃对照组差异不显著(P0.05)。短时高温处理对意大利蝗卵子发生期HSP70蛋白相对表达量有显著影响,推测HSP70蛋白的表达在意大利蝗抵抗短时高温胁迫过程中具有重要作用。     

“冷冻宝”对低温胁迫下番茄幼苗生理生化特性的影响

在昼夜温度13C／6C条件下,研究了不同浓度冷冻宝处理的番茄幼苗对低温胁迫的反应。结果表明 适宜浓度的“冷冻宝”可使叶片可溶性糖含量和保护酶活性显著高于对照;随着胁迫时间的延长,各处理电解 质渗透率和MDA含量上升,但适宜浓度的冷冻宝处理番茄叶片电解质渗透率和MDA含量显著低于对照;植 株的抗冷性提高,综合评价效果好。通过对不同处理的多种指标综合分析,以浓度2．5～1．25 g／L为宜。     

甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)自然种群与抗拟除虫菊酯有关的L1014F突变的发现

应用PCR扩增技术，克隆了甜菜夜蛾（Spodoptera exigua)自然种群的部分钠离子通道基因片段，并对其进行了测序。后将推断的氨基酸序列与其它敏感昆虫的相应序列进行了比较，发现了钠离子通道ⅡS6的1014同源位点上存在Leu(CTT)→Phe(TTT)点突变，表明该种群的抗药性可能与击倒抗性（kdr)有关。     

水体镉暴露对南方鲇仔鱼存活率的影响

以南方鲇Silurus meridionalis Chen初孵仔鱼、10日龄仔鱼为对象,采用水体染毒法进行急性镉暴露实验,研究了南方鲇仔鱼对镉暴露的耐受程度.初孵仔鱼实验设置一个对照组和5个镉处理组(0.04 mg/L,0.08 mg/L,0.16mg/L,0.32mg/L,0.64mg/L);10日龄仔鱼实验设置一个对照组和5个镉处理组(0.075mg/L,0.15mg/L,0.3mg/L,0.6mg/L,1.2mg/L).结果表明:随镉暴露质量浓度升高,初孵仔鱼存活率在暴露24h各组间差异不具有统计学意义(p0.05);暴露48h存活率仅在0.64mg/L组显著低于其余各组(p0.05);暴露72h,96h存活率在0.16mg/L,0.32mg/L和0.64mg/L组显著低于其余各组(p0.05).初孵仔鱼96hLC50为0.104mg/L,10日龄仔鱼96hLC50为0.039mg/L.镉暴露对10日龄仔鱼存活率的影响呈剂量依赖效应和时间依赖效应.与文献报道的多数鱼类相比,南方鲇仔鱼对镉暴露相对较敏感;而10日龄仔鱼对镉暴露的敏感程度高于初孵仔鱼.10日龄可能是南方鲇仔鱼发育受水体镉污染影响的瓶颈期,因此南方鲇生境水质保护工作应重点考虑到10日龄仔鱼的发育.