Wnt10b基因的生理功能及其在绒毛周期性生长中的作用研究进展

绒山羊的绒毛生长具有周期性的特点,受多种因素的影响。Wnt10b基因作为Wnt家族的重要成员之一,在动物体脂肪的生成、骨骼的生成和某些疾病（如肿瘤）的产生、毛囊的生成,以及毛发基板的生长与保持活性状态等方面发挥着重要作用。对Wnt10b的来源、结构、生理功能、调控机制及其对毛囊周期性生长的影响进行综述,以期为Wnt10b促进绒毛周期性生长的作用机理研究提供参考。     

桑树1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活化酶基因cDNA片段的克隆及原核表达与植物反义表达载体的构建

1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活化酶(RCA)对桑树的光合作用具有重要调节作用。以桑树幼叶为材料分离mRNA,反转录合成cDNA,以cDNA第1链为模板,根据RCA的保守区域设计1对兼并引物,经PCR扩增获得RCA的基因功能区中间片段。对得到的桑树RCA的cDNA片段编码氨基酸进行BLAST分析表明,其与GenBank中其它植物来源的RCA有较高同源性。将RCA的部分编码区插入原核表达载体pET30a(+),并转化到大肠杆菌菌株BL21中,经IPTG诱导,RCA的部分编码区在BL21菌株成功表达。将得到的RCA基因片段反向插入植物表达载体,构建了RCA基因反义表达载体pBI121-RCA,以利于进一步阐明RCA与1,5-二磷酸核酮糖羧化酶相互作用和调控关系以及用基因工程手段深入探讨桑树光合作用机制。     

不同中药对中性粒细胞迁移微血管内皮细胞后溶菌酶释放量的影响

试验旨在探讨脂多糖（LPS）刺激大鼠肠黏膜微血管内皮细胞（RIMVECs）对跨内皮迁移中性粒细胞（PMNs）溶菌酶释放量的影响及白头翁、黄连、黄柏、秦皮、马齿苋的干预作用。选取0、0.1、1、10、100 μg/mL LPS刺激RIMVECs,采用ELISA法检测12和24 h细胞培养上清液中IL-6水平以确定后续试验所需LPS浓度。建立PMNs跨RIMVECs黏附模型和迁移的Transwell模型,采用细胞计数法、染色法、ELISA方法评价5种中药对LPS刺激RIMVECs后PMNs的黏附情况、迁移率及其溶菌酶释放量的影响。结果显示,与对照组相比,10 μg/mL LPS作用RIMVECs后24 h时的IL-6水平极显著升高（P<0.001）;与LPS组相比,黄连、白头翁组的PMNs黏附率显著降低（P<0.05）,溶菌酶释放量极显著升高（P<0.001）,秦皮、白头翁组迁移率显著降低（P<0.05）。提示LPS刺激内皮细胞显著抑制了PMNs杀菌酶的释放,中药黄连、白头翁可以显著减轻这种抑制作用,PMNs杀菌酶的释放可能与内皮细胞的功能完整性有关,本试验为进一步筛选有效中药水溶性成分提供了理论依据。     

羊草苗期对盐碱胁迫的生长适应及Na+、K+代谢响应

通过盆栽实验,混合2种中性盐(NaCl∶Na₂SO₄=9∶1)和2种碱性盐(NaHCO₃∶Na₂CO₃=9∶1)分别模拟不同强度的盐碱条件,处理35 d的羊草幼苗,研究2种胁迫对羊草各营养器官生长和盐离子分布的影响及其适应机制。结果表明,随着盐和碱胁迫浓度的增加,羊草营养器官生物量、克隆生长性状(根茎子株、分蘖子株等)、光合作用、K⁺含量等均显著降低,Na⁺含量和Na⁺/K⁺均显著增加。在高胁迫强度下(200 mmol/L)碱胁迫引起的各项指标增减均显著高于盐胁迫。在2种胁迫下,根茎生物量的降低幅度最大,根茎子株的降低量高于分蘖子株。在盐胁迫和低浓度碱胁迫下,根和根茎内Na⁺、K⁺含量和Na⁺/K⁺的增减均高于茎叶,在高浓度碱胁迫下(200 mmol/L)茎和叶内Na⁺含量显著增加。这表明在相同强度胁迫下,尤其在高浓度胁迫下,羊草耐盐而不耐碱,在盐胁迫和低浓度的碱胁迫下,羊草具有相似的生长适应策略及Na⁺、K⁺代谢响应,主要表现在减少向根茎的能量输出及子株产生,维持羊草的原位生长策略,同时将Na⁺向根茎和根区划,避免茎叶生长受损。但在高碱胁迫下,pH造成的胁迫超出羊草根与根茎的承载力,使其失去拦截Na⁺的功能而导致大量Na⁺涌入茎叶,进而影响其光合作用,使其生长严重受损。无论在生长适应或者Na⁺、K⁺代谢中,根茎的存在均起到一定的保护作用,缓解了盐碱胁迫对其他器官生长的伤害。     

三组麻醉药物对小型猪麻醉效果的比较

本试验将小型猪特异性麻醉剂(XFM)、氯胺酮复合安定及速眠新Ⅱ联合戊巴比妥钠三组麻醉药,对小型猪麻醉效果进行比较,将18头中国试验用小型猪随机分成3组,第一组肌肉注射猪小型猪复合麻醉剂(XFM)0.15 mL/kg体重;第二组氯胺酮(8 mg/kg体重)复合安定(1 mg/kg体重),肌肉注射;第三组速眠新Ⅱ0.1 mL/kg体重、戊巴比妥钠10.5 mg/kg体重,联合肌肉注射.试验结果表明,XFM组和速眠新Ⅱ组与氯胺酮组相比对体温和呼吸影响小;XFM组与其他两组比较麻醉诱导时间短,麻醉时间长,苏醒期短;氯胺酮组和XFM组与速眠新Ⅱ组相比麻醉镇痛、镇静、肌松效果好.综合评价XFM组与其他两组比具有对小型猪体温(T)、心率(HR)、呼吸频率(RR)影响小,麻醉时间适中,麻醉效果确实,镇静、镇痛、肌松效果均衡等优点.     

电液负载敏感负载口独立多模式切换控制能效研究

针对传统电液控制系统单一工作模式能耗高、效率低等问题,提出了一种负载口独立多模式切换控制系统.该系统基于负载口独立控制,通过改变传统液压回路连接方式,为系统拓展多种节能工作模式并设计了多模式切换控制器.该控制器首先根据负载方向和速度方向,将系统切换至能量最优的工作模式;然后再根据工作模式为执行器进、出口配置最佳阀控策略...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3/GP5/M真核表达载体的构建及其体液免疫应答

本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3、GP5和M蛋白的真核重组质粒。以PRRSV LN株为模板,采用PCR方法扩增出GP3、GP5、M基因片段,将扩增的GP5、M通过Linker序列串联成GP5-M,然后将GP3与GP5-M双酶切后插入pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,将其转染COS7细胞。PCR鉴定表明重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M含有PRRSV GP3、GP5-M基因,间接免疫荧光检测表明GP3、GP5-M蛋白在COS7细胞内获得表达。Western blotting检测证实GP3、GP5、M蛋白获得正确表达,并且所表达的GP3、GP5、M蛋白是融合蛋白。将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫BALB/c小鼠,首免后2周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周中和抗体效价最高可达1∶32。进一步将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫断奶仔猪,首免后4周即可产生1∶4～1∶8的中和抗体。本试验成功构建了表达PRRSV GP3、GP5和M融合蛋白的真核重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,中和抗体检测表明pcDNA3.1-GP3-GP5-M具有良好的免疫原性,从而为PRRSV基因工程疫苗的研制奠定基础。     

桑树杂交组合桂桑优12的育成

应用遗传互补和杂种优势原理 ,育成桑树新品种 (杂交组合 )桂桑优 12。其F1群体整齐、发条数多、枝高节密、叶大叶厚、耐剪伐、再生能力强、发芽较早、收造较晚、产叶量较高、叶质较优、繁育较易 ,适宜常规栽培以及加速生丰产和省力化养蚕栽培。与对照沙 2×伦 10 9相比 ,每公顷桑叶产量增产 11 36 % ,桑叶养蚕万头蚕产茧层量增加 4 4 2 % ,10 0kg桑叶产茧量增产 3 18% ,每公顷桑园产茧量增产 19 6 3%。     

中药复方多糖提取方法优化及对家禽主要致病菌的体外抑菌作用

本文采用正交设计方法,对中药复方多糖的提取工艺进行了优化,并应用打孔灌注法、试管二倍稀释法研究中药复方多糖对家禽主要致病菌的抑菌作用及最低抑菌浓度.结果显示,中药复方多糖的最佳提取工艺为:料液比1∶30,浸提时间4h,提取次数2次;中药复方多糖对4种细菌均有一定的抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈达(33.50±0.175)mm,对沙门菌、大肠杆菌、链球菌的抑菌圈分别为(20.00±0.200) mm、(27.23±0.132) mm、(8.45±0.141)mm;抑菌浓度分别为大肠杆菌125 g/L、金黄色葡萄球菌63 g/L、链球菌250 g/L、沙门菌125g/L.试验表明,中药复方多糖对家禽主要致病菌有较好的抑菌效果,可用于细菌病的防治.     

羊传染性脓疱病毒趋化因子结合蛋白（CBP）基因的克隆及表达分析

参照GenBank中ORFV的毒力因子CBP基因的核苷酸序列设计合成1对特异性引物,采用PCR方法扩增该基因片段,并克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,经PCR、酶切鉴定和测序正确后,转入E.coli BL21（DE3）感受态细胞中,经IPTG进行诱导表达,并通过生物信息学软件进行分析。SDS-PAGE结果可见大小...