PRRSV野毒感染猪群免疫接种弱毒活疫苗的效果分析

为评估猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）弱毒活疫苗的免疫效果,本研究在两个小型猪场各选取两窝仔猪,在免疫接种猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）弱毒活疫苗后不同时间采集血清,应用RT-PCR检测PRRSV核酸,应用N-ELISA和G-ELISA两种试剂盒检测PRRSV抗体。结果发现,免疫前0 d可以从仔猪血清中检测到PRRSV野毒株核酸,可持续到免疫后30 d;相对应的母猪在免疫前0 d可从血清中检测到PRRSV野毒株核酸。试验仔猪在免疫前0 d未能检测到PRRSV抗体,但在免疫后30～150 d均可检测到PRRSV抗体,其中N-ELISA试剂盒的阳性检出率在免疫后30、60 d高于G-ELISA试剂盒的阳性检出率,而在免疫后120、150 d则低于G-ELISA试剂盒的阳性检出率。使用两种ELISA试剂盒共同检测216份血清样品,检测结果的总体符合率为95.83%;配对χ²检验,P>0.05,两者差异不显著;Kappa值为0.87,属于极强一致性;两者相关系数r为0.605,具有显著线性相关。表明免疫接种弱毒活疫苗可以有效清除野毒感染猪群中的野毒株,N-ELISA和G-ELISA两种ELISA试剂盒均可用于评估弱毒活疫苗的免疫效果。     

过表达根瘤血红蛋白基因对活跃链霉菌那西肽产量的影响

[目的]采用过表达根瘤血红蛋白基因改善活跃链霉菌的溶氧表达,以提高那西肽的产量。[方法]通过全基因组合成的方法得到根瘤菌血红蛋白基因(sm),连接到整合型质粒p IB139上,构建表达载体p IB139-sm。通过大肠杆菌-链霉菌结合转移的方法将sm基因整合到活跃链霉菌基因组上,通过PCR验证各转化子目的片段已整合到活跃链霉菌基因组上,并进行大量筛选得到重组菌株。[结果]经SDS-PAGE和CO结合差示光谱分析,结果显示,目的蛋白均已成功表达且具有相应的蛋白活性。摇瓶培养结果显示,Smf Hb表达对菌体生长和那西肽产量有明显的促进作用,过表达Smf Hb的重组菌株那西肽产量达1 245.7μg/m L,比原始菌株提高39.6%。[结论]过表达sm基因提高那西肽产量的作用优于vhb。     

四川单季稻区主栽水稻品种的生长模拟

利用四川单季稻区7个农业气象观测站5个主栽品种的田间观测数据,结合当地栽培管理措施、土壤条件及逐日气象资料对ORYZA2000模型进行参数调试,并确定四川单季稻区5个主栽品种的作物参数值;利用4～5a各主栽品种的观测数据对单季稻生育期、叶面积指数、生物量和产量等指标的模拟结果进行验证和评价。结果表明,合系39营养生长期发育速率最大,而生殖生长期发育速率最小,Ⅱ优838营养生长期发育速率最小,而D优63和汕优2生殖生长期发育速率最大;模型对5个单季稻主栽品种的生育期模拟效果较好,各品种开花期与成熟期的相对模拟误差均在1～2d,归一化均方根误差（NRMSE）均小于1%;各品种产量的NRMSE在5.26%～10.01%,叶面积指数的NRMSE为10.37%～19.19%,地上部总生物量、茎生物量、绿叶生物量及穗生物量的NRMSE分别为13.17%～18.69%、14.31%～20.41%、18.95%～24.74%和20.85%～25.39%。由此可见,ORYZA2000模型能够较为准确地模拟四川单季稻区5个主栽品种的发育及产量形成过程,适应能力较强,可以应用于四川单季稻生产。     

茶花新品种‘玫玉’耐盐性初探

以2年生茶花新品种‘玫玉’盆栽苗为材料,设置0、50、100、200、400 mmol·L^-1NaCl的盐浓度进行盐胁迫试验,研究盐胁迫对茶花的相对生长量、盐害情况及光合特性的影响。结果表明,随着NaCl浓度的提高,茶花幼苗新梢的生长受到了抑制,且浓度越高,抑制作用越明显,50 mmol·L^-1 NaCl处理后植株的相对生长量与其他3个处理存在显著性差异（p<0.05）;盐害指数和盐害率则随着盐浓度的增加而增加,其中50 mmol·L^-1 NaCl处理的植株在处理28 d后,相对生长量为65%,盐害指数为22.2%,植株生长状况良好,且慢慢适应了低盐环境。茶花的光合速率（P_n）、蒸腾速率（T_r）以及气孔导度（G_s）均随NaCl浓度的提高而降低,并与CK存在显著差异;NaCl胁迫下,气孔限制因素在50 mmol·L^-1 NaCl胁迫时起主导作用,而在100、200、400 mmol·L^-1 NaCl胁迫时,气孔限制因素和非气孔限制因素共同起作用。     

长毛兔巴氏杆菌病诊断与防控

2013年5月从山东某大型长毛兔场患有以鼻炎和化脓性肺炎为主要临床特征的病免中分离到1株细菌,经细菌培养、染色镜检、生化试验、PCR鉴定、动物试验证实分离菌株为荚膜血清A型巴氏杆菌;药敏试验结果表明,分离菌株对替米考星、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢噻呋钠、阿莫西林等药物敏感;通过设计3个试验组:巴氏杆菌本场疫苗免疫试验组、恩诺沙星防治试验组、巴氏杆菌本场疫苗免疫与恩诺沙星联用试验组,每组500只长毛兔,连续观察30 d,结果发现巴氏杆菌本场疫苗免疫与恩诺沙星联用试验组对该病的防控取得了较为理想的防治效果.     

Detection of EML4-ALK fusion gene and analysis of its clinical features in NSCLC patients with EGFR mutation

AIM: To detect the frequency of EML4-ALK fusion gene in non-small-cell lung cancer (NSCLC) patients who had epidermal growth factor receptor (EGFR) mutation, and to analyze the relationship between EML4-ALK fusion gene and clinical features. METHODS: One hundred and two Chinese patients with NSCLC were selected on the basis of one or more of the following characteristics: female, never/light smoking history and adenocarcinoma histology. The EML4-ALK fusion gene was identified by single-tube multiplex RT-PCR. In EML4-ALK-positive samples, exon 18 to 21 EGFR mutations and exon 1 and 2 KRAS (Kirsten rat sarcoma) mutations were detected by DNA direct sequencing after PCR amplification. RESULTS: Eight specimens (7.8%) were identified with EML4-ALK fusion genes from 102 NSCLC tissues. Of all positive cases, 7 were variant 1 (V1) and 1 was variant 2 (V2). In 8 EML4-ALK-positive samples, exon 18 to 21 EGFR and exon 1 and 2 KRAS were wild-types. Among 8 EML4-ALK-positive cases, 5 cases (5/8, 62.5%) were younger than the mean age. Six cases (6/8, 75%) were female and 7 cases (7/8, 87.5%) were non-smokers. Five cases (5/8, 62.5%) had adenocarcinoma histology. CONCLUSION: EML4-ALK fusion gene defines a new molecular subset of NSCLC with distinct characteristics. The EML4-ALK fusion gene is mutually exclusive to EGFR and KRAS mutations.     

重庆地区菊花害虫蟋蟀的发生与防治

调查了重庆市云阳县贡菊和杭白菊种植基地内蟋蟀的发生规律和为害特征,并采用几种毒饵诱杀的方法进行防治。结果表明,在庇荫潮湿的菊花地块,菊花被害率100％,被害死亡率60％v2_k．。采用麦麸毒饵诱杀法的防治率达90％以上,有效控制了蟋蟀对菊花的危害。采用培土法,能挽救部分受害菊花植株,但菊花的产量和质量受到显著的影响。     

CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV多重qRT-PCR鉴别检测方法的建立及应用

根据猪瘟病毒(CSFV)以及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因组序列特点,设计3对特异性引物和3条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV以及美洲型、欧洲型PRRSV的多重TaqMan荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪的其它常见病毒无交叉反应;对CSFV及美洲型、欧洲型PRRSV3种重组质粒标准品的检出下限均为2.68拷贝/μL;组内及组间重复试验的变异系数均小于1.5%。应用该方法对253份临床疑似样品进行检测,结果病原阳性106份,其中20份为CSFV阳性,86份为美洲型PRRSV阳性,11份为CSFV和美洲型PRRSV混合感染,未检测到欧洲型PRRSV。试验表明,研究建立的多重qRT-PCR方法可用于CSFV和PRRSV的快速鉴别检测及流行病学调查。     

鸡猪源大肠杆菌CTX-M型ESBLs的分子检测

为了解河南地区鸡猪源CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况,并进行基因型分析,通过表型确证试验检测产ESBLs大肠杆菌,分别用5组CTX-M型引物对其进行聚合酶链式反应扩增.表型确证试验检测结果显示,鸡、猪源大肠杆菌中产ESBLs菌株检出率分别为62.8%(59/94)和78.3%(36/46).PCR扩增结果进一步显示,鸡源大肠杆菌中CTX-M型ESBLs阳性率为89.8%(53/59),其中CTX-M-2组型14株,CTX-M-9组型26株,CTX-M-2和CTX-M-9组型13株;猪源大肠杆菌CTX-M型ESBLs的阳性检出率为69.4%(25/36),其中,CTX-M-2组型7株,CTX-M-9组型17株,CTX-M-2和CTX-M-9组型1株.河南地区鸡、猪源大肠杆菌CTX-M型ESBLs的产生率较高,而以CTX-M-2组型和CTX-M-9组型为主.     

昆阳磷矿停采矿区生态重建

介绍世界各国对矿物、石、沙等采区裸露山体缺口生态重建情况以及当前我国对停采矿区生态恢复的要求和昆明市昆阳磷矿采矿区基本情况．论述了昆阳磷矿停采矿区生态重建原则、技术措施．