犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

为了建立一种便捷、灵敏的犬流感病毒(CIV)检测技术,本研究根据CIV相对保守的M片段设计3对特异性引物,建立CIV的RT-LAMP检测方法,对反应体系中的MgSO4、Betaine、Bst DNA PoLymerase、dNTP、引物浓度等分别进行了优化,并进行敏感性和特异性试验。结果表明:所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用45min即可得到其特有的阶梯状条带,而且对犬细小病毒、犬瘟病毒和犬副流感病毒的扩增结果均为阴性。该方法对CIV RNA的最小检测限为0.1pg,灵敏性高于一步RT-PCR方法。RT-LAMP和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为93.02%。该方法为犬流感病毒的临床检测提供了一种简便、实用的方法,为基层检疫提供了方便。     

8 个朱顶红品种在深圳地区的引种试验

朱顶红 Hippeastrum striatum 是石蒜科球根花卉,具有较高观赏价值和经济效益。对引种的‘阿米哥’等 8 个朱顶红品种进行了一年的生长及适应性观测,筛选出‘阿米哥’‘合唱团’‘花孔雀’3 种较适宜深圳气候的品种,进一步研究其开花习性和主要观赏性状。结果表明,3 个品种都是大花品种,可观赏时间都比较长,分别达到 27、24 和 25 d。但在叶片和花葶性状、花期、花部性状及可观赏时间等有一定差异,应用时应予以统筹考虑。推荐‘阿米哥’和‘合唱团’以盆花和城市园林等形式应用,推荐‘花孔雀’以切花形式应用。     

关于马克思异化思想和卢卡奇物化理论的比较

在消解异化的征途上,马克思遵循的是"生产的逻辑",诉诸的是生产劳动;而卢卡奇遵循的是"观念的逻辑",诉诸的是阶级意识,二者各有侧重点又各有其合理性.马克思的异化思想仍然是我们打开分析资本主义社会基本经济结构和人的存在状态之门的一把钥匙.要真正克服异化,走向人类解放,就必须把马克思和卢卡奇的思想整合起来,或许这就是马克思的异化思想和卢卡奇的物化理论给我们的最好启示.     

我国农民收入的影响因素分析及对策建议

影响我国农民收入的因素有:农产品价格、农产品产量、从事农业的人口、人均播种面积等,运用计量模型从定量的角度在对各种因素的综合分析的基础上,得出提高农民收入的主要因素是农产品价格和农民的非农业收入,并提出了一些增加农民收入的对策建议。     

猪戊型肝炎病毒的流行病学调查

利用双抗原夹心ELISA对2009-2011年间采自广东省各地区的若干猪场的484份血清样品,进行血清流行病学调查;对69份病猪胆汁样品进行分子流行病学调查,分离得到猪源戊型肝炎病毒(swine hepatitis E virus, swHEV),并基于ORF2部分基因序列进行核苷酸序列比对、相似性分析和遗传进化树分析,以期初步了解广东各地猪群戊型肝炎(hepatitis E, HE)的感染情况和流行特点。试验结果显示,全部被检查猪的swHEV抗体平均阳性率为71.9%(348/484),分离的猪源HEV毒株均属于基因Ⅳ型,阳性率为71.0%(49/69)。调查结果表明基因Ⅳ型swHEV在广东地区普遍流行。     

旋毛虫各隔离种对猪的感染性和低温耐受性的研究

用消化法所得的猪旋毛虫、犬旋毛虫、旋毛形线虫（Trichinella spiralis）和本地毛形线虫（Trichinella nati-va）分别感染猪和小鼠,以观察其感染性,同时在-22℃和-32℃条件下对其进行冷冻试验。结果表明:4个旋毛虫隔离种对猪的感染性存在着明显差异,猪旋毛虫和T.spiralis对猪易感,其繁殖力指数（RCI）分别为385.68±41.51和300.55±12.45;而犬旋毛虫和T.nativa对猪不易感,RCI分别是0.064±0.031和0.033±0.033。猪旋毛虫和旋毛形线虫不耐低温,在猪体内-32℃、24 h,-22℃、72 h;在小鼠体内-32℃、12 h即全部死亡。而犬旋毛虫和本地毛形线虫对低温抵抗力较强,在猪体内-32℃、72h,-22℃、192 h;在小鼠体内-32℃、48 h才失去感染性。结果揭示:黑龙江省猪旋毛虫相当于旋毛形线虫,犬旋毛虫相当于本地毛形线虫;犬旋毛虫和T.nativa很难通过猪的感染而对人体健康构成威胁。     

Substitution between Virulent and Avirulent PPRSV Vaccine Strains with Reverse Genetics System

The Nsp9 gene of porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）coded the RNA polymerase,which played an important role in the virus replication.In order to determine the interaction between the Nsp9 gene and virulence,replication capacity and cell tropism,the Nsp9 gene sequence of PPRSV vaccine strain CH-1R was cloned,and ligated to a virulent strain XH-GD infectious clone after restriction enzyme digestion,and transformed the virus under the basis of the reverse genetics.The results showed that the virus was successfully saved.And the results of biological characteristics test showed that titers and growth rate of saved virus were obviously higher than that of parental strain rXH-GD,but were lower than vaccine strain CH-1R.While plaques of two strains were similar in size.The polymerase of vaccine strain CH-1R could help to improve the drop degree of the virus,and this test could lay the foundation for further study of the effect of Nsp9 gene on virus virulence.     

表达SIV H1亚型HA蛋白重组腺病毒的构建与生物学特性研究

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因序列进行了遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与GenBank中登录的全部192株H1亚型SIV中的151株核苷酸序列相似性达到85%以上,表明该毒株具有作为疫苗候选株的分子特征.将SIV-GD03的HA基因克隆到腺病毒穿梭载体pAd-CMV5-IRES-GFP中,将得到的重组穿梭质粒pAd-H1-IRES-GFP电转化至BJ5183感受态细胞中,与人5型腺病毒骨架质粒同源重组获得重组腺病毒质粒prAd-H1-IRES-GFP,该质粒线性化后转染AD-293细胞.包装出的重组腺病毒rAd-H1HA-GFP通过荧光显微镜观察、PCR和western blot鉴定,证明HA基因和GFP基因在重组腺病毒中得到高效表达,该毒株在AD-293细胞上连续传12代后表现出较好的整合稳定性及传代稳定性.     

鲢肌肉脂肪酸分离方法效果比较及组成特征分析

采用了三种不同方法,即超声波提取法、索氏提取法和氯仿-甲醇法,从鲢(Hypophthalmichys molitrix)肌肉中提取鱼油,继而进行酸性或碱性甲酯化,经气相色谱/质谱联用技术,对其脂肪酸组成特征进行了定性和定量分析。结果显示:鲢肌肉检测出25种脂肪酸,其中包括7种饱和脂肪酸,8种单不饱和脂肪酸和10种多不饱和脂肪酸。获得不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量分别为41.39%、36.15%、33.55%,可见三种分离方法间存在明显分离效果差异。因此得出石油醚作溶剂的超声波萃取法是提取和分析鱼类脂肪酸较理想的方法。