犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化

[目的]提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量.[方法]研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST - CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST - Sepharose 4B亲和层析柱对GST - CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定.[结果]大肠杆菌BL21 (DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600 =1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8h,GST - CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL.[结论]确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础.     

Juglone inhibits epithelial-mesenchymal transition of prostate cancer cells by regulating Wnt/β-catenin/Snail signaling pathway

AIM: To investigate the mechanism of juglone on epithelial-mesenchymal transition in prostate cancer cells. METHODS: Human prostate cancer LNCaP cells were divided into control group (without juglone), 12.5 μmol/L juglone group and 25 μmol/L juglone group. LNCaP cells in the latter 2 groups were treated with juglone for 24 h. The invasion ability of the LNCaP cells was detected by Transwell assay. The protein expression of E-cadherin, vimentin, Snail and β-catenin was determined by Western blot. The LNCaP cells were treated with LiCl and juglone in combination for 24 h, and the protein expression of Snail and E-cadherin was detected by Western blot.RESULTS: The results of Trans-well invasion assay showed that the invasion ability in juglone groups was significantly decreased (P<0.01). The protein expression of E-cadherin in the LNCaP cells treated with juglone was increased, and the expression levels of vimentin and β-catenin were reduced (P<0.01). Treatment with LiCl significantly attenuated the inhibitory effect of juglone on Snail expression and subsequent down-regulation of E-cadherin expression. CONCLUSION: Juglone inhibits the epithelial-mesenchymal transition by inhibiting the Wnt/β-catenin/Snail signaling pathway in the LNCaP cells.     

非1B/1R类型小麦雄性不育系KTSP3314A败育的生化机制

为了揭示K型非1B/1R类型小麦不育系雄性败育的生化机制。利用K型非1B/1R类型小麦雄性不育系KTSP3314A,其同型保持系TSP3314B,以K型1B/1R类型小麦雄性不育系K3314A、其同型保持系3314B为对照,分别对其叶片和穗子在不同发育时期的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性和丙二醛(MDA)含量的变化进行测定。结果表明,K型非1B/1R类型小麦不育系中SOD,POD及CAT活性变化与K型1B/1R类型小麦雄性不育系酶活性变化一致,K型非1B/1R类型雄性不育小麦叶片和穗子的超氧化物歧化酶(SOD)后期则较低,过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性后期较高,丙二醛(MDA)含量后期较高。说明二者的雄性败育生化机制基本一致,但前者比后者败育的时期较晚。且超氧化物歧化酶(SOD)活性与雄性育性有关。     

益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态、血清T淋巴细胞亚群及肠道菌群的影响

本试验旨在研究添加不同比例益生菌发酵棉粕对黄羽肉鸡小肠黏膜形态、血清T淋巴细胞亚群及肠道菌群的影响。选用14日龄健康黄羽肉鸡320只,随机分成4组,每组4个重复,每个重复20只鸡,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别添加3%、6%和9%发酵棉粕,研究不同添加量对肉鸡生长前期(14～28日龄)、中期(29～45日龄)、后期(46～65日龄)各阶段小肠黏膜形态,中、后期血清T淋巴细胞亚群及后期肠道菌群的影响。研究结果显示:①与Ⅰ组相比,Ⅲ组黄羽肉鸡前、中、后期的十二指肠绒毛高度极显著提高31.90%、25.17%、49.41%(P<0.01),隐窝深度极显著降低9.42%、11.31%、10.83%(P<0.01),V/C极显著提高45.65%、41.19%、67.84%(P<0.01);空肠绒毛高度极显著提高28.72%、28.38%、27.61%(P<0.01),隐窝深度显著或极显著下降6.65%(P<0.05)、6.18%(P<0.01)、7.37%(P<0.01),V/C极显著提高37.84%、36.69%、37.82%(P<0.01);回肠绒毛高度极显著提高76.64%、40.36%、67.20%(P<0.01) ,隐窝深度显著降低4.09%、6.07%、6.02%(P<0.05),V/C极显著提高83.79%、49.27%、78.26% (P<0.01)。②中、后期Ⅳ组黄羽肉鸡CD4⁺/CD8⁺显著提高42.86%、34.95%(P<0.05)。③随着发酵棉粕添加量的增多,黄羽肉鸡的十二指肠、空肠、回肠中乳酸菌的数量逐渐增多,且差异越来越明显,除Ⅱ组十二指肠和空肠段外,其余各组的各肠段差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。大肠杆菌和沙门氏菌的数量逐渐减少,且差异越来越明显,除Ⅱ组十二指肠段外,其余各组各肠段差异均显著或极显著(P<0.05;P<0.01)。综上所述,6%发酵棉粕组在提高十二指肠、空肠、回肠绒毛高度、V/C,降低其隐窝深度方面都优于3%、9%发酵棉粕组,而9%发酵棉粕组在提高CD4⁺/CD8⁺、肠道乳酸菌数量和降低大肠杆菌和沙门氏菌数量方面优于3%、6%发酵棉粕组。     

扎布耶盐山羊大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

为掌握西藏自治区仲巴县帕江乡扎布耶盐山羊的发病情况,采集发病羊的粪便、血液、肝脏、脾脏、胸腔、腹腔和心包腔内蓄积的浆液性纤维性渗出物等进行病原菌分离鉴定及药敏试验。经病原菌分离鉴定,该地区扎布耶盐山羊羔羊感染的病原菌为大肠杆菌,检出率为97.14%(34/35);药敏试验结果表明,该研究分离得到的大肠杆菌对头孢唑林、青霉素、阿莫西林、头孢他啶、氟苯尼考、头孢拉啶6种药物高度敏感。该调查研究为仲巴县帕江乡扎布耶盐山羊大肠杆菌病的防治提供了诊断方法和用药方案。     

硫酸新霉素可溶性粉在靶动物猪的安全性研究

为了客观评价硫酸新霉素可溶性粉对靶动物猪临床应用的安全性,将32头仔猪随机分为4组,每组8头,分别设1倍、3倍、5倍临床推荐剂量组和空白对照组,连续混饮硫酸新霉素可溶性粉15 d,通过检测各组受试猪的临床表现、血液常规指标、血清生化指标、尿液常规指标及病理学变化等评价其临床用药的安全性。结果:硫酸新霉素可溶性粉以5倍临床推荐剂量内应用于靶动物猪后,对其临床症状、体重、血常规、血生化及尿常规等指标没有显著影响,解剖学及病理组织学检查也未见任何病理变化,说明硫酸新霉素可溶性粉以1倍、3倍、5倍临床推荐剂量应用于靶动物猪是安全的。     

玫瑰花再制奶酪的研制

本研究充分利用云南省丰富的玫瑰资源,在再制奶酪基础上,添加含有功能活性物质的玫瑰花发酵液与玫瑰花瓣,研制出方便携带且适合国人口味的压片式再制甜奶酪。通过测定发酵玫瑰花中的活性物质,确定玫瑰花的适宜发酵时间;以感官评分为指标,筛选添加剂的合适添加量;在单因素的基础上应用响应面优化发酵工艺;通过测定产品的理化、卫生指标,评估产品质量。结果表明:当玫瑰花发酵至第6天活性物质含量较高;添加12%脱脂奶、3.5%黄油、12%白糖、2%复合磷酸盐、0.5%黄原胶时,产品的感官评分较高;经优化得到当搅拌温度为87℃、玫瑰花发酵液添加量为20%、发酵玫瑰花添加量为6.5%时,产品感官评分较高(80.84分),与预测值接近;理化和微生物指标检测结果显示,本产品的脂肪、水分含量及酵母菌和霉菌数、菌落总数、大肠菌群数均符合标准。     

宽须蚁蝗蝗蝻空间分布型的研究及其应用

应用3种检验分布型的方法分别检验了宽须蚁蝗蝗蝻的分布型。结果表明：宽须蚁蝗蝗蝻在草地上的空间分型呈聚集分布,其聚集强度随种群的密度的升高而增加,应用Iwao模型中的参数估计了田间调查时的最适抽样数。     

转基因技术在畜牧兽医中的发展前景

通过简要叙述转基因动物研究的发展简史、研究现状和存在问题 ,对转基因动物育种、药物生物反应器、组织器官移植 ,以及基因治疗和免疫等前景进行了综述。在此基础上 ,从畜牧兽医角度出发提出了追踪发展趋势的几点思考。     

青海省门源县石头沟地区牛羊胃肠线虫病的调查

石头沟地区放牧的牛羊每年一到秋末或冬季便出现消瘦、贫血、浮肿、被毛脆弱,容易脱落。为此笔者进行调查,走访14户农户,采集了58头牛羊粪便。结果表明,牛羊的胃肠线虫种类很多,往往混合感染,对牛羊危害极大。结果检查出牛羊的线虫感染率为39.01%。