高职动物医药专业“123”实践教学体系改革与实践

为了顺应"工学研融合"人才培养模式的发展要求,根据动物医药专业人才培养目标定位,提出了"123"递进式实践教学模式,从优化实践教学内容、搭建多层次实践教学平台、改革实践教学模式、打造"三能型"师资队伍、改革考核评价体系、建立"三级监督、三方联运"的监督保障体系等方面着手,对动物医药专业实践教学体系进行改革并付诸实践,使动物医药专业人才培养质量明显提高。     

紫花苜蓿对高寒山区杂交猪育肥性能的影响

试验选择大白猪（加×美）二元杂种猪24头（仔猪3～4周龄断奶,保育到8周龄）,随机分为对照组、苜蓿Ⅰ组和苜蓿Ⅱ组,每组8头,分别饲喂基础日粮、基础日粮＋3%苜蓿、基础日粮＋6%苜蓿,试验期内在同一条件下进行饲养试验对其育肥性能、屠宰测定及肉质品质进行测定。试验结果表明：苜蓿Ⅰ组能够提高外二元猪育肥效果,苜蓿Ⅰ组和苜蓿Ⅱ组对背膘厚和皮厚也略有降低,添加3%和6%的苜蓿对其他屠宰性能及肉质品质影响不显著（P〉0.05）。由试验结果得出,在毕节高寒地区可以利用添加3%苜蓿比例的饲料对外二元杂交猪进行育肥。     

模拟氮沉降对两种草地植物氮同化物积累的影响

为了揭示大气氮沉降对栽培草地植物氮同化物积累的影响,本试验以无芒雀麦（Bromus inermis）和白三叶（Trifolium repens）为对象,通过人工增氮试验（浓度设置为0、6、12和24 g N·m-2·a-1）来研究豆科和禾本科牧草的氮同化物积累的变化规律。结果表明,在不同氮浓度处理下,叶绿素、叶全氮、可溶性蛋白、精氨酸和脯氨酸等氮同化物含量变化极显著（P<0.01）,在氮沉降浓度为12 g N·m-2·a-1范围内随氮沉降浓度增加而呈增加趋势（除脯氨酸含量）,但是两种牧草氮同化物的积累量差异较大,氮沉降对禾本科牧草的氮同化物积累的影响高于豆科牧草。精氨酸含量与氮沉降浓度间存在极显著正相关（R2均达到0.99）,因此,精氨酸可作为草本植物对氮沉降增加的敏感指标。     

抗猪输血传播病毒1型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为制备抗猪输血传播病毒1型(TTV1) Cap蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究采用PCR法扩增TTV1ORF1 (1501nt～2475nt)编码重组Cap蛋白的C末端截短序列,将PCR产物克隆于pGEX-6P-1载体中,并在大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株中诱导表达,获得含GST标签的重组蛋白(rCap),经SDS-PAGE和western blot鉴定表明rCap约为64.0.ku,以包涵体形式存在.用纯化的rCap免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗rCap蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚类均为IgGl/κ型;western blot鉴定表明有7株MAbs与rCap产生特异性反应,另1株MAb呈阴性.为验证8株MAbs与真核表达的Cap蛋白的免疫反应性,将全长与截短的TTV1ORF1基因片段克隆于pcDNA3.1载体,转染293T细胞进行蛋白瞬时表达,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法检测表明,这8株MAbs均能够与瞬时表达的全长rCap产生特异性反应,其中6株与截短表达的rCap反应.本研究表达的rCap蛋白及制备的MAbs,为该病毒检测方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础.     

卡死克对草地天敌昆虫通缘步甲的影响

试验研究了卡死克对通缘步甲成虫的急性致死毒性及田间撒施卡死克毒饵后对其种群数量消长的影响。室内口腔灌喂250ppm浓度的卡死克药液2μl／头后的第1～15天，灌药组与灌清水组的存活率均在70～90％，统计结果无显著差异，说明药剂对该步甲元急性致死毒性。在毒饵撒施后的7～17天，采用陷阱诱捕法调查对通缘步甲田间种群数量的影响，结果表明：处理区与对照区的日均诱捕数量为28．3和28．5头，两区间的差异并不显著。卡死克既不杀伤草地上游猎捕食的通缘步甲又能有效控制蝗虫种群数量的增长，使其能够发挥控制害虫的作用。通缘步甲发生数量大，与蝗虫种群消长有跟随现象，是一种值得研究保护利用的优势天敌种类。     

谷子RNA干扰相关酶类基因家族的鉴定与分析

Dicers酶类、Argonautes蛋白以及RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerases,RDRs)是RNA干扰(RNA interference,RNAi)机制中重要的核心蛋白,但在谷子(Setaria italica)中尚无系统报道.为了研究谷子中与RNA干扰相关酶类基因的特征,本研究对谷子的RNA干扰相关酶类基因家族进行了蛋白质理化性质、亚细胞定位预测、蛋白质保守基序、基因保守结构域、基因家族成员间系统发育关系以及组织特异性表达谱分析.研究共发现24个与谷子RNA干扰相关酶类基因,包括7个DCL(Dicers),13个AGO(Argonautes),4个RDRs.系统进化树分析表明,这些家族被分为3个进化支.同一家族基因成员具有共同的保守结构域.虽然大多数基因可同时在不同发育时期的叶、茎和穗中表达,但其在各时期的穗和茎中的表达量最高.本研究为详细探讨这些基因在谷子生殖和生长发育中的表观遗传修饰作用提供了理论依据.     

猪MEF2a基因的克隆与表达

为了进一步了解猪MEF2a基阒的结构与功能,本研究采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆了猪的MEF2a基因,获得了它的2个变异体序列.结果表明,猪MEF2a variant 1基因cDNA长1 524 bp(EF576923),编码508个氨基酸,分子量为54.481 ku;variant 2基因cDNA长1 416 bp(EF576922),编码471个氨基酸,分子量为50.846 ku.MEF2a两个变异体的氨基酸序列同源性为86.79%,第1aa～77aa和第132aa～470aa完全一致,第78aa～131aa是高变区,variant2与variant1相比,在第224aa～258aa处存在34个氨基酸(102 bp)的,缺失.利用Real-time PCR方法检测了MEF2a的表达.结果表明,MEF2a mRNA是一个广谱表达基因,在心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、背肌和腿肌中都能检测到,在腿肌中优势表达.MEF2a variant1与马和家鼠构成一个小类群,而variant 2与牛和人构成了另外一个小类群,推测MEF2a基因在进化过程中发生了较为明显的变异.     

牛外周血单核巨噬细胞的分离、培养与鉴定

试验旨在为深入研究单核巨噬细胞的生物学特性和免疫学功能提供材料.应用牛淋巴细胞分离液从牛外周血中分离牛外周血单个核细胞,用含10％胎牛血清的RPMI 1640营养液培养5d,在倒置显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志CD14.结果表明,获得的贴壁细胞具备巨噬细胞的形态学特征及免疫表型.通过形态学观察和流式细胞术鉴定可知,该试验成功获得了牛外周血单核巨噬细胞.     

美洲黑杨种质资源生长和物候性状分析

以引进的美洲黑杨为材料建立基因库,通过比较分析该基因库7年生美洲黑杨的物候、生长、性别等特征,为资源评价和开发利用提供技术支持。结果表明：不同无性系间物候和生长特征变异丰富,生长和物候性状相关分析结果表明叶片变色落叶晚,有利于树高和胸径的快速增长。其中雄株中的优良比例和选育潜力更具有优势,在后期的良种培育中要适当重视雄株的选择。结合材积、胸径、物候生长季等性状从443份种质中筛选出优良无性系41个,对选出的系号统计发现,有25个无性系的母本来自于密西西比河流域,占比约60.98%,尤其是材积最大的5个无性系,其母本均来自于密西西比河下游天然林优株。总体来看,该基因库遗传多样性丰富,无性系间生长、物候等特征差异大,322、331-9、329-26、1-31等无性系表现优良,具备良好的选育潜力。