基于AFLP的燕麦遗传多样性研究

采用ＡＦＬＰ分子标记技术对来自中国、加拿大、澳大利亚和欧洲等国家的３４个有代表性的饲用燕麦品种及８个裸燕麦品种进行遗传多样性分析,从３０ 对ＥｃｏＲＩ／ＭｓｅＩ引物组合中筛选出５ 对多态性和清晰度较高的引物组合,共获得２６８条带,其中多态带１８５条,平均多态性检出率为６９．０％,Ｅ ＡＧＧ／Ｍ ＣＴＡ 的扩增效率最高达７８．６％。由Ｎｅｉ’ｓ指数（ｈ）估测,供试品种平均变异为０．１６６４,平均Ｓｈａｎｎｏｎ’ｓ信息指数估计值为０．２２０６;４２个燕麦品种间遗传相似系数为０．４８８１～０．９８８０,遗传距离的变化范围是０．０１２０～０．７１７２。通过ＡＦＬＰ 数据构建燕麦的ＵＰＧＭＡ 系统树,在遗传相似系数０．７４８水平,所有供试品种可聚为６类。皮燕麦与裸燕麦在遗传相似度０．５９处被明显分为２类,与形态学分类结果一致。由ＡＦＬＰ揭示的品种间遗传关系与品种实际来源基本一致,品种的遗传距离与其地理分布关系密切。     

施肥对青藏高原燕麦种子生产的增产效应

通过研究施肥水平对燕麦Avena sativa种子产量和品质的影响,筛选出适宜燕麦种子高产的施肥量,为提高燕麦种子生产能力提供直接的理论依据.研究结果表明:在试验设计的施氮梯度范围,施氮对燕麦产量和品质影响作用明显,施氮水平与种子蛋白质含量之间呈显著的线性回归关系(R=0.896 8,P＜0.01),随着施肥量的增加,蛋白质含量持续增加;而施氮水平与有效分蘖数、小穗数、草产量和种子产量之间呈显著的二次回归关系(P＜0.01),表现为"低-高-低"的变化趋势,施氮60 kg/hm2时燕麦种子产量为4358.5 kg/hm2,达到最高,施肥量继续增加,种子产量增幅下降,投入产出比降低.因此,从高产和高效角度综合考虑,生产中以收获燕麦种子为目的时,施氮量应选择60 kg/hm2,而以生产饲草为目的时,施氮量应选择75 kg/hm2.     

中西药对影响奶牛胚胎移植效率的繁殖疾病疗效的对比

为了提高供体牛的利用率,加速胚胎移植技术的推广和应用,试验对比了中药和西药对几种影响奶牛胚胎移植效率的繁殖疾病的疗效.结果表明:①激素疗法中GnRH一次治疗卵巢囊肿的治愈率为83.0%,GnRH PG治愈率为86.4%,中药内服一个疗程治愈率为73.8%,GnRH 中药内服治愈率为87.4%;各治疗组治愈后第一情期受胎率分别为52.3%、54.4%、58.1%和55.3%.②黄体退化不全形成硬肿的供体奶牛经2个疗程内服中药治疗,总治愈率91.3%,治愈母牛再次用于超排,所获胚胎数量及可利用率与正常母牛没有显著差异.对持久黄体的治疗以促孕灌注液和激素疗法中PG注射效果最好,治愈率分别为85.9%和89.1%;治愈后2个情期受胎率分别为77.6%和75.5%.③卵巢机能减退4个治疗组中,FSH LH组、PMsG hCG组、促孕灌注液组和中药内服组的治愈率分别为75.6%、63.8%、73.8%和82.5%;治愈后2个情期受胎率分别为62.9%、58.2%、65.7%和67.3%.④治疗慢性子宫内膜炎以土霉素油剂和促孕灌注液效果较好,治愈率分别为85.4%和84.8%,治愈后2个情期受胎率分别为83.9%和82.0%;PG注射治愈率为76.3%,治愈后2个情期受胎率为78.9%;中药内服组治愈率为79.4%,治愈后2个情期受胎率为84.7%.⑤为预防胚胎死亡采取3种控制措施,对照组、P4补充组、hCG组和内服中药组人工授精后的受胎率分别为53.3%、56.1%、62.1%和58.3%;胚胎移植后受胎率分别为43.3%、49.2%、53.3%和55.3%.治疗组的受胎率均有不同程度的提高.     

鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株S2基因的序列分析及其表达

采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV—GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a（＋）中,测序验证后转化入表达宿主菌Rosetta^TM2（DE3）plysS,进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50000的重组融合蛋白,在浓度为0．6mmol／L的IPTG诱导4h的情况下表达效果最好。表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV—GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性。     

ie-1和lef-1基因dsRNA表达元件转染及转化细胞对家蚕核型多角体病毒增殖的抑制

通过RNAi介导可以抑制病毒增殖,将相应的RNAi元件通过转基因转入宿主有可能使宿主对病毒产生一定的抗性。根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的病毒复制必需基因ie-1、lef-1设计相应的RNA干扰区段,并构建相应的转基因载体转入家蚕BmN细胞中,瞬时表达结果显示转染了转基因RNAi载体的BmN细胞均对BmNPV有一定的抑制作用。IE dsRNA在病毒滴度为10-4时有抑制作用,在病毒滴度为10-5时有比较好的作用;LEF dsRNA则在病毒滴度为10-5时有抑制作用,在病毒滴度为10-6时有较好的抑制作用。通过转基因及G418筛选后,转基因IE dsRNA细胞在病毒滴度为10-4显示出一定的抑制作用,在病毒滴度为10-5表现了明显的抑制作用;而转基因LEF dsRNA细胞在病毒滴度为10-5有一定的抑制作用,但只维持了一个时段。     

无血清培养基IVD101和G1/G2在牛体细胞核移植中的应用研究

通过考察牛体细胞核移植重构胚在无血清培养基（IVD101、G1／G2）条件下培养的囊胚发育率及其质量,从而评估无血清培养基支持牛体细胞核移植重构胚体外发育的能力。采用IVD101和G1／G2对牛体细胞核移植胚胎进行体外培养,并以CR1aa＋5％FBS作为对照组。无血清培养基IVD101和G1／G2的囊胚发育率与对照组无显著性差异（41．2％±9．1％、42．2％±10．8％,48．0％±9．2％,P〉0．05）。通过囊胚差异染色和冷冻／解冻胚胎存活率分析胚胎质量,发现无血清培养基ICM／Total略低于对照组（31．8％±10．5％、29．5％±11．9％vs ．33．0％±14．8％）,但无显著性差异（P〉0．05）;3个组别的囊胚经程序化冷冻／解冻后无血清培养基的存活率（IVD101、G1／G2）略高于对照组,但差异不显著（84．8％、80．4％＇US．77．3％,P〉0．05）。结果证明无血清培养基（IVD101、G1／G2）可以支持体细胞核移植重构胚的体外发育,且其对程序化冷冻的耐受性与添加血清组（CR1aa＋5％FBS）相似。     

胶体金试纸条半定量检测鸡蛋中磺胺嘧啶残留

采用竞争反应模式建立了鸡蛋中磺胺嘧啶(SD)残留的胶体金试纸条半定量检测方法。该试纸条由吸样材料、玻璃纤维、硝酸纤维素膜、吸水材料组成。用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,胶体金标记SD单克隆抗体;SD竞争物包被于硝酸纤维素膜,制成胶体金试纸条。该试纸条在15min内可完成对SD残留的半定量检测,读条系统判定灵敏度为5μg/L,肉眼判定检测限为10μg/L,与其他磺胺类药物无交叉反应,在鸡蛋中的回收率为71%~96.7%;用试纸条与ELISA对来自动物试验的52份鸡蛋样品进行对比检测,以10、100ng/g为cutoff值,两者阳性(大于100ng/g)符合率为100%,弱阳性(10~100ng/g)符合率为72.7%,阴性(小于10ng/g)符合率为84.2%,两者总符合率为94.2%。该方法灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,有良好的开发应用前景。     

蒙农3号高丹草选育

从高梁雄不育系A3×黑壳苏丹草杂种F2代分离群体中开始选择优秀单株,通过4次单株选择、1次混合选择及品比、区域与生产试验,历经8个世代育成蒙农3号高丹草.该品种根系发达,茎基部节问短缩粗壮,株高约380cm,生育期141d,种子活秆成熟,分蘖多,再生性强,每年可刈割利用3次,鲜草产量和种子产量分别为13.30万kg/hm2和0.58万kg/hm2;茎叶柔嫩.茎叶比2.81,拔节期粗蛋白质含量13.77%.开花期粗蛋白质含量11.12%、粗脂肪4.07%、粗纤维36.11%、粗灰分5.36%、无氮浸出物41.67%,糖锤度3.86%.富含17种氨基酸.CN-含量低.适口性好,可青饲、青贮或晒制干草;植株抗倒伏,田间未发生病虫危害症状,适应性广,适宜在有效积温≥2400℃的地区推广种植.     

杂交玉米新组合金单999的育苗移栽制种技术

金单999是贵州省旱粮研究所选育,适宜南方丘陵和山区种植的高产、稳产、多抗玉米新品种。本文对金单999制种过程中的隔离、肥料、播种、管理、去杂、去雄等环节作了详细的阐述和要求。     

超声波处理对牛乳浓缩蛋白水溶性的影响

经贮藏后的牛乳浓缩蛋白(milk protein concentrate,MPC)的水溶性会下降,而MPC的水溶性直接影响其应用价值.本实验利用超声波技术处理新鲜和贮藏后的MPC,研究不同超声波处理条件对贮藏后的MPC水溶性的影响.结果表明:超声处理(50、300、600 W分别处理5 min; 300 W分别处理3、5、10 min)贮藏后的MPC85,其水溶性显著下降;而超声处理(300 W或600 W分别处理3、5、10 min)新鲜MPC70后在50℃条件下贮藏30 d,其水溶性下降较缓慢且300 W处理10 min的水溶性下降得最慢.因此,在MPC生产过程中进行超声处理,可以在一定程度上减缓MPC贮藏过程中水溶性下降程度.