四川白鹅对花生藤营养物质表观消化率研究

我国花生种植面积世界第一,但花生藤却没有得到充分利用.因此本试验通过研究四川白鹅对花生藤营养物质的表观消化率,确定其在四川白鹅日粮中的合理添加量,为优化日粮配方和花生藤的合理利用提供理论依据和数据参考.试验随机选取18周龄、(3.5±0.25)kg四川白鹅公鹅12只,采用强饲法(全收粪法),每只试验鹅用强饲器强饲40 ...     

犊牛传染性肺炎病原分析及其防治

犊牛肺炎的发病率高居不下,与平时的饲养管理方式关系密切。其病原复杂多样,更是增加了预防和治疗困难．了解犊牛肺炎的病原及地方流行性、改善提高饲养管理模式能够有效降低犊牛传染性肺炎的发病率和死亡率．     

4株鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因序列分析

试验从发病鸡场分离获得4株鸡传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus,IBDV）,分别为河北株（HB）、湖北株（HUB）、山东株（SD）、山西株（SX）。通过特异性引物扩增VP2基因并进行测序,序列分析结果显示,4株病毒中,HUB、SD和SX的七肽区为S-W-S-A-S-G-S（aa 326S-332S）,其222（A）、256（I）、294（I）和299（S）位是传染性法氏囊病病毒超强毒株（vvIBDV）的4个特征性氨基酸,确定这3株病毒均为超强毒株;而HB株七肽区为S-W-S-A-R-G-S（aa 326S-332S）,其222（P）、256（V）、294（L）和299（N）位氨基酸显示该毒株属于弱毒株。进化树分析结果显示,HUB、SD和SX 3株病毒与2011年中国分离的大部分IBDV毒株亲缘关系较近,同源性在96%以上,同时与经典毒株Cro-Po/00、超强毒株GX和UK661亲缘关系很近;而HB株与减毒疫苗株D78株和B87株的亲缘关系近。本试验结果表明,IBDV目前在中国流行呈混发型,但以超强毒株为主。     

表达猪瘟兔化疫苗株E0蛋白的PK-15细胞系构建

将克隆到pGEM T-easy载体中的E0基因双酶切回收后，连接到增强型绿色荧光蛋白（EGFP）中，利用Lipofectamine^TM2000将重组子转染PK-15、BHK-21、VERO 3种细胞，直接在荧光显微镜下用蓝光激发进行观察，在3种细胞中都可以观察到绿色荧光，而且在转染后的24、48、72 h 3个时间点上，观察到的荧光细胞数量逐渐增多，在72 h时荧光细胞的数量在3种细胞中都达到最多，总的来看，在PK 15中荧光细胞的数量最多。通过对细胞荧光的定位发现，重组质粒的荧光主要分布在胞浆内，而且细胞核周围的荧光较强，胞核与胞浆的界限明显，尤其是在PK-15细胞和VERO细胞中这种现象尤为明显。未携带E0目的DNA的pEGFP-N1 Vector转染3种细胞后，都可以观察到绿色荧光，但是整个细胞中是均匀出现荧光的。经酶切、PCR、单抗间接免疫荧光检测，PK-E0细胞中有大量的HCLV的E0表达，单纯的PK-15细胞中没有E0的表达。HCLV株在PK-E0细胞中从48h开始到72h的滴度比在PK-15细胞中的滴度要高。证明PK-E0细胞中E0蛋白的大量表达增加了HCLV在细胞中的复制。     

人员在岗培训在实施兽药GMP现场管理中的作用

论述了对兽药生产企业进行人员在岗培训的必要性,对实施在岗培训的基本程序和应注意的事项进行了总结,旨在为兽药企业进行GMP现场管理提供参考。     

冷应激蛋鸡呼吸频率、心电与血清酶活性的变化及其相互关系

采用冷束缚应激的方法建立冷应激动物模型,测定冷应激前后蛋鸡的呼吸频率、心电及5种血清酶的各项参数值.结果表明:随着冷应激时间的延长,蛋鸡心率和呼吸频率先上升后下降,冷应激3、5 h与冷应激0 h相比差异显著(P<0.05).丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)活性在冷应激后明显下降(P<0.05);γ-谷氨酸氨基转移酶(γ-GT)活性先上升后下降,冷应激1、2、3、5 h时与冷应激0 h相比差异显著(P<0.05);肌酸激酶(CK)活性呈上升趋势变化,冷应激0.5、1、2、3 h时与冷应激0 h相比差异显著(P<0.05),乳酸脱氢酶(LDH-L)活性呈上升趋势,各时间点与冷应激0 h相比无显著性差异(P>0.05);天门冬氨酸氨基转移酶(AST/GOT)先下降后上升,各时间点与冷应激0 h相比差异不显著(P>0.05).心率与呼吸频率、γ-GT、ALT呈强正相关;呼吸频率与γ-GT、ALT呈中等强度正相关,与AST呈中等强度负相关:γ-GT与ALT呈中等强度正相关,其余各指标之间呈弱相关.上述结果说明,冷应激对海兰褐蛋鸡呼吸频率、心率及血清酶活性有较大改变,并且所测定的各指标之间存在不同程度的相关关系.     

性控奶山羊精液X和Y精子分离比例检测方法的建立

旨在建立可以定量计算奶山羊精液中X、Y精子数量的双重TaqMan荧光定量PCR方法,用以检测经过分离的奶山羊精液X和Y精子的数量和比例,为性控技术的开发和生产应用提供技术支撑.本研究选择X、Y染色体中特异基因F9及ZFY片段设计引物,建立标准曲线,优化荧光定量PCR反应体系和条件.通过对阳性标准品梯度稀释以及对60支已...     

家蚕法尼酸甲基转移酶(FAMeT)基因的鉴定及表达模式分析

保幼激素(JH)是昆虫生长、发育、变态和生殖等一系列生理生化过程中必不可少的一类激素。法尼酸甲基转移酶(farnesoic acid O-methyltransferase,FAMeT)被认为是昆虫及其它节肢动物催化合成保幼激素前体甲基法尼酸(methyl farne-soate,MF)的关键酶。通过生物信息学分析,从家蚕全基因组数据中共鉴定了7个编码家蚕FAMeT的基因(BmFAMeT1～BmFAMeT7)。系统进化分析暗示BmFAMeT2可能是家蚕FAMeT家族成员的最原始拷贝。对其中位于6号染色体上的BmFAMeT5、BmFAMeT6和BmFAMeT7的时空表达谱分析显示,3个基因从家蚕胚胎发育后期至成虫期持续性表达;在5龄第3天幼虫中肠组织特异性高水平表达。利用RACE技术克隆获得了这3个基因的全长cDNA序列,并发现BmFAMeT5及BmFAMeT6分别存在2种不同的选择性拼接形式。上述结果为进一步研究家蚕FAMeT的生物学功能提供了线索。     

密码子优化的鸡白细胞介素-17在昆虫细胞中的表达研究

为了获得具有良好生物学活性且具有较高表达量的鸡白细胞介素-17(ChIL-17),本研究在前期研究工作基础上,将ChIL-17的编码基因按照真核细胞(昆虫细胞)偏爱的密码子进行优化改造,经全基因合成后插入到转座载体pFastBacTM Ⅰ中,构建重组转移质粒pfast-mod.ChIL-17并转化DH10Bac感受态细胞.通过位点特异性转座将mod.ChIL-17基因整合到穿梭质粒Bacmid中,获得重组穿梭质粒Bacmid-mod.ChIL-17.应用脂质体将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-mod.ChIL-17.重组病毒传代扩增感染Sf9细胞,通过间接免疫荧光检测目的蛋白的表达.结果表明,经过优化的ChIL-17在杆状病毒系统中获得表达.     

夏秋品种两广二号引进试验初报

石泉县蚕种场2011年春季引进两广二号与秋丰×白玉这两对品种的原种进行试繁,夏季对生产的一代杂交种进行对比试验。试验表明:两广二号繁育系高,体质强健好养,单位质量桑叶的产茧量及产值高,丝质优,可作为陕南蚕区夏秋用家蚕品种的更新换代品种。