脑多头蚴湖南分离株线粒体nad5基因的克隆及进化分析

本试验旨在阐明脑多头蚴湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位5基因(nad5)基因部分序列(pnad5)的遗传变异情况.利用聚合酶链反应(PCR)扩增脑多头蚴的pnad5,用ClustalX 1.81程序对序列进行比对.结果显示,所获得的pnad5序列长度均为1 153 bp,湖南分离株与已知多头带绦虫位于同一分枝.由于脑多头蚴pnad5序列种内相对保守,种间差异较大,故均可作为种间遗传变异研究的标记,从而为脑多头蚴的分子流行病学和其相关疾病的诊断奠定基础.     

液相色谱-串联质谱法测定禽粪便中尼卡巴嗪的残留量

本试验建立了一种测定禽粪便中尼卡巴嗪(以DNC计)的残留量的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法.以甲醇:0.2％甲酸水溶液(75+25)为流动相,0.2 mL/min流速,30℃柱温下,超高效液相色谱分离,三重串联四级杆质谱多反应监测(MRM)扫描模式检测,DNC-D8同位素内标法进行定量.试验结果表明,DNC浓度在10～1000 ng/mL时,呈良好的线性关系,R2为0.9996;4组不同浓度各6个平行样的回收实验,回收率范围为84.8％ ～ 91.2％,平均回收率达到87.9％;相对标准偏差RSD范围为2.47％ ～ 5.45％.本方法特异性强、定性准确、灵敏度高,完全能满足禽粪便中尼卡巴嗪的残留检测.     

苯并芘对猪卵母细胞SHH信号通路影响的研究

如今空气污染问题仍广泛存在,其中苯并芘（Benzo （a） pyrene,BaP）是一种常见的空气污染物,对人和动物的健康具有严重影响。据报道,BaP可以显著降低卵母细胞IVM （卵母细胞体外成熟）能力,但机制尚不清楚。因此,本研究在猪卵母细胞IVM培养液中添加不同浓度BaP （50 μM、100 μM、200 μM）检测其对卵母细胞IVM能力的影响,并检测此过程SHH信号通路相关基因和蛋白的表达。结果显示50 μM BaP处理组卵母细胞IVM能力显著低于对照组（76.5 vs 68.1,P<0.05）,并随着BaP浓度增加进一步下降。同时,qPCR和免疫荧光染色检测发现,50 μM BaP处理组卵母细胞中SHH信号通路相关基因mRNA和蛋白表达量,均显著低于对照组（P<0.05）。因此,本研究初步证明BaP可能通过破坏SHH信号通路降低猪卵母细胞IVM能力。     

紫花苜蓿细胞质雄性不育恢复基因的初步定位

以紫花苜蓿(Medicago sativa)不育系MS-GN-1A为母本,恢复系MS178为父本组合构建BSA分离群体,获得的F1代均表现为雄性可育,在大田种植了221株F2代群体单株,盛花期将花粉颗粒染色后,显微镜下观察统计出,不育的F2代株数为57,可育F2代株数164,并没有观察到半不育植株。将所有植株划分为可育和不育两组,并构建可育和不育DNA混池,混池DNA从可育和不育植株组DNA中各随机抽取20个样品,以此对恢复基因定位。随机挑选160对已知的四倍体苜蓿SSR引物扩增基因池DNA,获得2个具有多态性的分子标记,分别是Mt2c12、AW166,初步定位Rf基因在类群Composite5上。将类群Composite5上的所有引物进行合成,进一步进行引物筛选,最终获得4个具有多态性的标记BI68、Mt2c12、BG267和AW776153,遗传距离分别为19.0、20.9、44.6和72.1cM。     

IBV AH1-99分离株N基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术成功扩增出IBV AH1-99分离株的N基因全长cNDA,将其克隆到pMD18-T载体上。经酶切分析、PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得该分离株N基因的重组质粒。序列分析结果表明,分离株N基因全长1 230个核苷酸,编码409个氨基酸。同部分IBV参考毒株相比,核苷酸同源性为85.8%~89.9%,氨基酸同源性为86.6%~91.0%,在进化关系树中,AH1-99与国内分离株X、LX4亲缘关系较近。     

Clenbuterol诱导载酯蛋白D在猪脂肪组织中表达加强

Clenbuterol(CLB,盐酸克伦特罗),俗称瘦肉精。由于其在动物体内广泛残留,可能导致食用此类产品的人中毒而被禁止使用,但已有研究表明该制剂可显著减少猪脂肪沉积,因此,对其分子机制进行深入研究将具有重要的理论与实践价值。本研究通过对家猪饲喂高剂量clenbuterol(≥1.5mg/kg体重),提高瘦肉率10%左右。通过实时荧光定量PCR技术对脂肪组织中与脂类代谢密切相关的4个基因研究发现,饲喂clenbuterol的猪脂肪组织内载酯蛋白D(apolipoprotein D,apoD)mRNA丰度增加超过2倍,而脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,lpl)、硬酯酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-CoA desaturase,scd)和激素敏感脂酶(hormone sensitive lipase,hsl)mRNA丰度变化不明显。因此,推断clenbuterol通过改变部分脂代谢关键基因的表达来实现减少脂肪积累。载酯蛋白D可能是CLB应答基因之一。     

大叶桉叶挥发油的抗炎活性研究

大叶桉叶为双子叶植物桃金娘科大叶桉（Eucalyptus robusta Smith）之叶,味辛、苦,性凉,具有疏风发表、清热解毒、祛痰止咳、杀虫止痒之功效。大叶桉是华南地区民间常用中草药,其叶水煎剂具清热解毒、消炎止痛、防腐止痒的功效,其总挥发油可用于治疗流行性感冒、上呼吸道感染和皮肤病等疾病。     

猪场常见繁殖系统疾病的临床区别诊断

布氏杆菌病、细小病毒感染、猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)、猪瘟、猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪附红细胞体病、衣原体、猪钩端螺旋体及饲料霉菌毒素中毒都共同出现流产症状,同时也有很多不同点。本文根据临床经验,将其归纳整理,系统地比较各病之间的不同点,为临床兽医正确区别诊断这类疾病提供宝贵的经验。     

改性蒙脱石对黄曲霉毒素B_1和玉米赤霉烯酮的吸附研究

本试验旨在探究4种不同改性蒙脱石对黄曲霉B1(AFB1)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的体外吸附性能。采用体外吸附试验,在霉菌毒素污染的喷浆玉米皮中添加4种改性蒙脱石,检测AFB1和ZEN的浓度变化,以探究不同种类及不同添加比例改性蒙脱石对AFB1和ZEN的吸附作用。结果表明:4种改性蒙脱石对AFB1和ZEN均有显著吸附作用,其中膨润土经十八烷基三甲基氯化铵改性制备的复合改性蒙脱石II型对AFB1和ZEN的吸附效果最好,在添加量为1%时,对AFB1和ZEN的吸附率分别为62.60%和43.38%。在本体外试验条件下,4种改性蒙脱石对喷浆玉米皮中AFB1和ZEN均具有吸附作用,可以降低喷浆玉米皮中的霉菌毒素含量,为改性蒙脱石在饲料脱毒剂的使用提供参考。     

Ecotourist trail-use affects the taxonomic,functional and phylogenetic diversity of mammals in a protected area: lessons for conservation management

Ecotourism, by definition, aims to engage peoples’ interest in wildlife and the environment. The use of tourist roads and trails to access sites within protected areas (PAs) can detrimentally affect the behavior and distribution of species. The way mammals respond to anthropogenic pressures may differ across taxonomic, functional, and phylogenetic groups; nevertheless, how ecotourist trail-use affects these different diversity remains under-investigated. Here, we assessed 6 metrics of taxonomic, phylogenetic, and functional diversity for a mammal community in a PA in central China, recording how Trail use (using Trail type as a proxy) and habitat variables affected sightings and signs of mammals across 60 replicate 0.5 km transects. We then examined how Trail use affected the taxonomic, functional, and phylogenetic diversity indices of species (>1 kg). Using generalized liner mixed modeling, we identified that more used trail types had a greater adverse effect on all diversity richness indices than did less used trail types. Consequently, tourist pressure was associated with a general tendency to homogenize the site's mammal community. In contrast, the effects of Trail Types on all diversity evenness indices were non-significant. Furthermore, more developed and more heavily used trail types had a greater, significant negative effect on taxonomic, functional, and phylogenetic richness, whereas these richness indices were unaffected by minor trail types, used less intensively. As a general principle, lower biodiversity indices reduce ecosystem resilience, and so it is vital to better understand these responses to balance public access against biodiversity management in PAs.