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为建立适宜新疆野生樱桃李的SSR分子标记技术体系,通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、引物浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量)以及退火温度进行了探索,建立了适宜野生樱桃李的SSR-PCR反应体系。结果表明:在25μL反应体系中,Mg2+1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.0 U、模板DNA 30 ng、退火温度为60℃。SSR扩增程序:94℃预变性5 min,35个循环(94℃30 s,60℃1 min,72℃1 min),72℃延伸10 min,可筛选出稳定性好、多态性高的SSR引物。 相似文献
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AIM: To investigate the pattern of Th1/Th2 balance in systemic lupus erythematosus(SLE) patients and the relationship between CD28/CTLA-4(cytotoxic T-lymphocyte antigen-4) molecule expression and Th1/Th2 balance.METHODS: Eighteen SLE patients met the ARA 1997 updated SLE criteria were selected in the study. According to Bombardier's SLEDAI criteria, all patients were classified into two groups: active group(12 cases) and static group(6 cases). Fourteen normal individuals, matched for age and sex of the patients, served as controls. The peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) were isolated by density gradient centrifugation and cultured in RPMI-1640 culture medium. After treated with PMA(5 μg/L) and ionomycin(500 μg/L) for 72 h, the PBMCs were collected, the contents of IFN-γ and IL-10 in the supernatant of cultured PBMCs were detected using enzyme linked immunosorbent assay(ELISA). The expression of CD28 and CTLA-4 molecules on T cells were detected by flow cytometric technique with double staining by FITC or PE labeled monoclonal antibodies. RESULTS: The level of IL-10 was higher in the PBMCs of active and static SLE patients(351.29 ng/L±153.31 ng/L and 319.37 ng/L±153.39 ng/L) than that in controls(254.48 ng/L±120.69 ng/L), but the difference did not reach statistical significance(P>0.05). The level of IFN-γ was significantly lower in the PBMCs of active SLE patients(25.76 ng/L±16.09 ng/L) than that in controls(50.71 ng/L±27.92 ng/L, P<0.05). The ratio of IL-10/IFN-γ was significantly higher in active SLE patients(18.74±13.77) than that in controls(6.66±4.95, P<0.05). Either before or after culture, the expression of CD28 molecule on CD3+and CD8+ T cells from all SLE patients was not remarkably different from that in the cells of controls. Before culture, the expression of CTLA-4 molecule on CD3+T cells of active SLE patients(0.79%+0.37%) was significantly lower than that in the cells of controls(1.31%+0.61%, P<0.05). After culture, the expression of CTLA-4 molecule on CD3+ T cells of SLE patients was still lower than that in the cells of normal controls without statistical significance(P>0.05).The expression level of CD28 molecule on CD3+ or CD8+ T cells in active SLE patients and controls was not correlated with the levels of IFN-γ and IL-10 in the supernatants(P>0.05). The level of CTLA-4 molecule expression on CD3+ T cells of active SLE patients was positively correlated with IFN-γ level(r=0.681, P<0.05), while was negatively correlated with IL-10 levels(r=-0.624,P<0.05) and the ratio of IL-10/IFN-γ(r=-0.738, P<0.01). The level of CTLA-4 molecule expression on CD3+ or CD8+ T cells of controls showed no correlation with IFN-γ levels, while showed negative correlations with IL-10 level(r=-0.587, P<0.05; r=-0.563, P<0.05, respectively).CONCLUSION: There is a bias in the differentiation of Th0 cells towards Th2 in SLE patients. CTLA-4 probably plays an important role in this mechanism through suppressing the signal transmitted by CD28. 相似文献
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改善政府投资项目的投资决策体系具有十分重要的现实意义,这也是政府投资项目管理的重要组成部分。文章从政府投资项目全过程管理的角度,分析了我国现行的政府投资项目的审批制度和投资控制的全过程,针对存在的弊端,提出了建立政府项目投资决策体系的建议。 相似文献
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为了研究枯草芽孢杆菌菌剂在盐胁迫下对冬小麦生长与土壤水氮分布的影响,以盆栽冬小麦种植为试验手段,在8 g/kg的盐分质量比下,设置枯草芽孢杆菌菌剂质量比为0(CK),1(G1),3(G3),5(G5)和7(G7)g/kg等5种施加梯度处理,分析了冬小麦株高、叶面积、生物量以及土壤水分和硝态氮含量的变化情况.结果表明:①... 相似文献
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以直、弯两种穗型水稻各1份材料为试材,通过剪叶与疏花措施,改变灌浆进程,研究了源库关系对水稻籽粒灌浆特性的影响。结果表明,不同穗型水稻籽粒灌浆进程可用Richards进行拟合,从而可以用朱庆森等提出的有关参数对灌浆特性进行解释。剪叶降低水稻籽粒的灌浆速度和终极生长量,导致结实率低,籽粒充实度差,千粒重小而减产,而疏花(剪穗)则相反。 相似文献