pVAX1/SjTSP2 DNA疫苗免疫预防小鼠日本血吸虫病的效果评估

为评估SjTSP2分子作为日本血吸虫DNA疫苗候选抗原分子的潜力,本实验扩增了编码该分子的DNA片段,构建了重组真核质粒pVAX1/SjTSP2,检测其在哺乳动物细胞中表达情况后,通过基因枪轰击法免疫小鼠,应用ELISA、流式细胞术等检测重组质粒诱导的免疫反应,计算减虫减卵率,评估对小鼠日本血吸虫病的免疫保护效果。间接免疫荧光试验结果显示该质粒能在293T细胞中表达。质粒免疫小鼠诱导了显著升高的特异性IgG抗体和IFN-γ、IL-4等细胞因子。小鼠免疫保护试验结果表明,免疫组小鼠虫荷数较PBS对照组增加12.4%(P=0.368),但肝组织虫卵减少10.01%(P=0.486)。说明制备的DNA疫苗能刺激小鼠产生较强的免疫反应,但诱导的免疫保护作用并不理想,为血吸虫DNA疫苗研究提供了参考数据。     

弓形虫MIC3基因真核表达质粒的构建及在 IBRS-2细胞内的表达

采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coliDH5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1。然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染IBRS-2细胞,在G418压力下进行筛选,利用SDS-PAGE、Western blot和ELISA检测表达情况。结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank上相应基因序列(AJ132530)的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒pcMIC3能在转染的IBRS-2细胞中表达分子量约为39.2ku的MIC3,且表达的蛋白质具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础。     

应用发光细菌法检测饲用抗生素单一及联合毒性的研究

以HgCl2为毒性参照,以等毒性配比法研究了饲用盐酸金霉素、吉他霉素、盐霉素和黄霉素对发光细菌的单一及联合毒性。结果表明:盐酸金霉素、吉他霉素、盐霉素、黄霉素对明亮发光杆菌的急性毒性EC50分别为9.21、146.13、4.24 mg/L和134.68 mg/L,发光细菌的相对发光强度(RLU)随着抗生素浓度的提高而降低,并分别在2~16、25~200、1~8 mg/L和25~200 mg/L范围内呈良好线性关系;多元饲用抗生素对发光细菌具有联合毒性的作用,吉他霉素与盐酸金霉素、盐霉素和黄霉素3种抗生素的二元组合对发光细菌的联合毒性表现为较强的协同作用,而盐酸金霉素、盐霉素和黄霉素两两分别组合对发光细菌的联合毒性表现为拮抗作用;三元及四元抗生素混合体系对发光细菌的联合毒性均表现为拮抗作用。     

自然感染日本血吸虫病耕牛血清循环抗原消长规律的研究

为了观察疫区自然感染日本血吸虫病耕牛血清循环抗原消长规律,本试验将血吸虫病非疫区的水、黄牛各１０头,转运至安徽省血吸虫病疫区,接受为期８周的自然感染。用斑点酶联免疫吸附试验测定牛血清循环抗原。结果,水、黄牛血清循环抗原滴度均于自然感染第４周后明显上升,水、黄牛自然感染第８周的血清循环抗原最高滴度分为１∶１０２４０和１∶５１２０,最低滴度则分别为１∶１２８０和１∶６４０,水牛循环抗原滴度高于黄牛。虫荷数与血清循环抗原滴度未见有相关性。     

臭氧对空气消毒效果试验观察

臭氧是一种高效环保的空气消毒剂,为了探讨臭氧消毒应用于畜牧业空气消毒的可行性,进行臭氧对空气消毒效果试验。结果表明,在相对湿度60%～70%,消毒60 min,臭氧消毒的杀菌率可达到99.84%,说明臭氧是畜舍空气消毒较为理想的新型空气消毒剂,值得推广应用。     

欧盟屠宰检疫检验规则研究

作者对欧盟有关畜禽屠宰检验检疫法规指令、英国实施屠宰检疫的具体做法进行的研究梳理,旨在为我国制定实施相关屠宰检疫检验法规制度,开展屠宰行业管理提供借鉴和参考。     

蛋鸭场鸭坦布苏病毒病的流行、诊断与防控

鸭坦布苏病毒病是严重危害养鸭业的传染病,给养鸭户特别是蛋鸭养殖户造成了巨大经济损失。本文结合江西省近年来的流行病学调查和国内外学者研究资料,对鸭坦布苏病毒病的主要流行病学特征、江西省蛋鸭场流行概况以及诊断方法与防控措施等进行了综述,以期为该病防控提供参考。     

日本乙誓脑炎病毒NS1基因及其疫苗的研究进展

日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患传染病。乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原,其中PrM和E蛋白是日本乙型脑炎病毒的结构蛋白,其结构和相关疫苗研究的报道较多。NS1蛋白是日本乙型脑炎病毒的非结构蛋白,其主要参与病毒复制的早期阶段,推测可能参与病毒组装和释放。可诱导补体依赖性溶细胞反应,不能产生中和抗体,能诱发机体在非中和性抗体存在的情况下产生保护性免疫。在接种乙脑病毒的细胞的细胞内、细胞表面及上清液中均含有大量的NS1蛋白。对小鼠接种NS1蛋白或NS1蛋白特异性抗体,均能让小鼠产生对乙脑病毒感染的保护性免疫作用。本文主要就乙型脑炎病毒非结构基因NS1及其免疫疫苗的研究进展进行综述,为其更进一步深入研究IEV NS1基因及其相关疫苗奠定基础。     

单一或复合植物精油添加对麻黄肉鸡生长性能、肉品质和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究饲粮中添加植物精油对麻黄肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质和抗氧化能力的影响。选取360只1日龄健康、体重均一的雌性麻黄肉鸡,随机分为3个组,分别为对照组、单一植物精油组（EO1组）和复合植物精油组（EO2组）,每组8个重复,每个重复15只鸡。试验期分为3个生长阶段,分别为1～21日龄、22～42日龄和43～65日龄,共计65 d。对照组饲喂基础饲粮;EO1组在1～21日龄时饲喂基础饲粮+300 mg/kg植物精油1（主要成分为肉桂醛）,在22～65日龄时饲喂基础饲粮+400 mg/kg植物精油1; EO2组饲喂基础饲粮+150 mg/kg植物精油2（主要成分为肉桂醛、香芹酚和百里香酚）。结果表明：与对照组相比,各试验组肉鸡各阶段平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异（P>0.05）;21日龄时,EO2组肉鸡血清总抗氧化能力显著高于对照组和EO1组（P<0.05）;65日龄时,EO2组肉鸡血清总超氧化物歧化酶活性显著高于对照组（P<0.05）;65日龄时,EO2组肉鸡胸肌红度值显著低于对照组和EO1组（P<0.05）。综上所述,饲粮添加复合植物精...     

基因芯片检测细菌耐药基因

根据已知的耐药基因序列设计出检测四环素耐药基因特异探针7条、β-内酰胺类耐药基因特异探针5条,阳性坐标探针1条,长度为18-21 bp.根据探针序列两侧的保守区域设计了耐药基因扩增引物,引物长度17-20bp.通过荧光聚合酶链式反应,从耐药菌株中获得四环素耐药基因7个,β-内酰胺类耐药基因5个.经过芯片制作过程优化试验和芯片杂交优化试验,结果表明,将探针以终浓度30 μmol/L溶于50%DMSO中,在温度为20 C、湿度为70%的条件下点印于Aldehydeslide表面.扩增出的荧光标记产物经纯化后与2×杂交液混合,再与基因芯片在42 C杂交5 h可检测到理想的杂交信号.芯片灵敏度试验结果表明,当模板拷贝数大于1×103个/μL时,可检测到较强的杂交信号.本试验最终研制出灵敏度高、特异性强的耐药基因检测芯片.