犬在埃立克体病研究中的作用

随着新病原及病原新的致病性不断被发现 ,埃立克体及埃立克体病已经成为预防医学和兽医学研究热点。在已经发现的 1 1种埃立克体病原中 ,有 5种可以直接感染犬 ,引起不同的犬埃立克体病 ;另外 2种为早先分别从人单核细胞埃立克体病和粒细胞埃立克体病患者中分离的病原 ,在流行区的犬体内也可以分离到。资料表明犬对许多埃立克体都极为敏感 ,犬在埃立克体及埃立克体病研究上占有重要地位。鉴于这是我国近年才发现的新病原 ,许多兽医及研究工作者不认识它 ,文章就相关埃立克体对犬的感染和所致疾病以及在流行病学上的意义进行了综述。     

高致病性猪蓝耳病疫苗与口蹄疫、猪瘟疫苗同时分点注射对口蹄疫、猪瘟抗体效价的影响试验

试验采用高致病性猪蓝耳病、口蹄疫、猪瘟等三种疫苗同时分点注射,以探讨是否会产生相互干扰。试验选用猪瘟抗体在1∶256~1024之间的长嘉、长大母猪11头,所产仔猪130头,随机分为试验组93头,对照组37头。三种疫苗经分点注射,首免后28d检测,口蹄疫抗体合格率为39.29%,猪瘟抗体合格率为87.50%,蓝耳病抗体合格率为0;二免后20d检测,口蹄疫抗体合格率为46.43%,猪瘟抗体合格率为96.43%,蓝耳病抗体合格率为67.86%。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断及其分子特点

采用流行病学调查、临床症状观察、病理学检查、病毒分离、分离毒株测序以及遗传演化分析的方法,对北京及其周边地区4个猪场剖检的4头猪进行分析。结果:流行病学和临床症状表现为急性高热性传染病;病理学观察为非化脓性脑炎和间质性肺炎等多器官严重的病理变化;RT-PCR和病毒分离确定该疫情的主要病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。与典型PRRSV感染不同的是:成年猪感染率达50%以上,病死率达80%以上;PRRSV分离株全基因序列分析表明属于PRRSV北美洲型,特别是PRRSV NSP2不连续缺失30个氨基酸,说明此次流行的PRRSV毒株可能为高致病性毒株。     

含PRRS病毒ORF5的伪狂犬病病毒TK基因缺失转移载体的构建

提取伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）ＢａｒｔｈａＫ６１株基因组ＤＮＡ,用限制性内切酶ＫｐｎＩ充分消化,回收５．９ｋｂ片段（Ｊ片段）,将其克隆于质粒ｐＵＣ１１９ ＫｐｎＩ位点上,获得ｐＢＫＪ。用两对针对ＰＲＶ ＴＫ基因的特异性引物对重组质粒进行ＰＣＲ鉴定,证明其中含有ＰＲＶ ＴＫ基因。然后用ＫｐｎＩ、ＰｓｔＩ和ＢａｍＨＩ等限制性内切酶对其进行酶切分析,确定了克隆片段的物理图谱。进一步研究证实ＴＫ基因位于其中的     

捻转血矛线虫HLJ株15 ES抗原基因的原核表达

为了对羊源捻转血矛线虫(H.contortus)15 ES抗原基因进行原核表达,本研究利用RT-PCR技术从黑龙江省羊源H.contortus成虫总RNA中扩增得到相对分子质量15Ku ES蛋白基因(H15 ES),序列分析表明,其核苷酸序列与国外已发表的15 ku排泄分泌抗原基因的同源性为99.78%.将H15 ES克隆至pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a-H15 ES,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达蛋白相对分子质量约为35.2 ku.本研究为H.contortus病诊断抗原和保护性抗原的大量制备及H.contortus核酸疫苗的研究奠定了基础.     

人CD14信号肽介导卵清蛋白在HEK293T细胞的高效表达

本试验将人CD14信号肽序列与卵清蛋白（ovalbumin,OVA）基因融合,旨在提高OVA在非输卵管上皮细胞中的表达。提取鸡输卵管上皮细胞总RNA,经反转录合成的cDNA,再利用修饰的特异性引物,通过PCR从cDNA中分别扩增出5’端与人CD14信号肽序列融合和非融合的OVA基因,并将它们分别插入到真核表达载体pcDNA3.1A中,构建成表达载体pcDNA-CD14sp-OVA和pcDNA-OVA。经磷酸钙介导,将质粒转染至HEK293T细胞,使其进行表达,用鼠抗OVA单克隆抗体通过免疫印迹（Western blot）法检测OVA表达水平。结果表明:本试验扩增的OVA基因序列与GenBank中的序列（登录号NM₂05152）一致,构建的人CD14信号肽序列融合OVA基因的表达载体结构正确。经过在HEK293T细胞的表达,融合人CD14信号肽序列的重组蛋白OVA的表达水平明显得到提高。结果提示,融合人CD14信号肽序列后的重组蛋白OVA在非输卵管上皮细胞中的表达水平明显提高,为OVA基因作为DNA疫苗模式抗原的应用提供了必要的条件。     

浙江省中华蜜蜂形态特征研究

选择浙江省12个样点36群中华蜜蜂样本,每群随机抽取15只工蜂,每只工蜂测定27项形态特征指标。利用SPSS16.0对形态特征数据进行因素分析、聚类分析和变异分析。结果表明:浙江省境内的中华蜜蜂存在较大的形态差异及种群分化。因素分析结果提取3个特征值高(>3)的因素,包括了63.798%的变异。利用提取的主因子进行聚类分析,分为4个类群:永康、义乌、金华、杭州和丽水的样本为第1类;长兴、黄岩、慈溪的样本为第2类;江山、嵊州和舟山的样本为第3类;苍南的样本与其他地区样本的遗传距离最远,单独为一类。变异分析结果显示:浙江省12个样点中华蜜蜂除后翅钩数样点间差异不显著(P>0.05)外,其余26项形态指标样点间差异较大。其中,舟山中华蜜蜂的翅长、翅宽、第3、4背板总长、第4、7腹板总长及腿相关4项指标平均值最大,与其余地区中华蜜蜂形态差异性较大;苍南中华蜜蜂的蜡镜长、蜡镜间距离和蜡镜斜长指标均值最大,与其它地区中华蜜蜂形态差异显著(P<0.05)。     

不同收获期玉米青贮营养成分在奶牛瘤胃内降解率的研究

本文旨在研究不同收获期玉米青贮对奶牛的营养价值。用3头装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,采用3×3拉丁方设计对蜡熟期、乳熟期和乳熟前期的玉米青贮的主要营养成分进行了瘤胃降解率的研究。结果表明:(1)蜡熟期玉米青贮DM有效降解率(60.07%)分别比乳熟期(52.91%)和乳熟前期(45.13%)高7.16%(P<0.05)和14.94%(P<0.05);乳熟期比乳熟前期高7.78%(P<0.05)。(2)乳熟期玉米青贮NDF的有效降解率(30.77%)分别高于蜡熟期(28.59%)和乳熟前期(26.71%,P<0.05),蜡熟期和乳熟前期之间差异不显著。(3)蜡熟期ADF(25.73%)和乳熟前期玉米青贮(25.23%)没有明显差异,但都高于乳熟期(23.39%,P<0.05)。(4)蜡熟期玉米青贮CP有效降解率(81.93%)分别比乳熟期(76.43%)和乳熟前期(73.36%)高5.50%(P<0.05)和8.57%(P<0.05);乳熟期比乳熟前期高3.07%(P<0.05)。通过试验综合评价不同收获期玉米青贮对奶牛的营养价值是蜡熟期玉米青贮优于乳熟期,乳熟期玉米青贮优于乳熟前期。     

运用模型分类法分析9个地方鸡品种间遗传结构和亲缘关系

以16个中度或高度多态性微卫星标记,运用基于模型分类法的Structure程序推断9个地方鸡品种群体遗传结构,构建聚类图分析相互间亲缘关系,并鉴定群体中迁移个体和具有复杂遗传基础个体的分布。结果表明：Structure程序在预先未标明品种起源的条件下准确推断出9个地方鸡种群体所属类别,揭示按照体型外貌、地理分布等为依据划分的9个地方鸡品种类型,也真实反映了其在遗传上的差异。Structure聚类图在K=2时将9个地方鸡种分为轻体型的鸡种（包括茶花鸡、藏鸡、仙居鸡、固始鸡和白耳鸡）和重体型的鸡种（包括大骨鸡、北京油鸡、鹿苑鸡和萧山鸡）两个类别;K=4、5、6时北京油鸡、固始鸡、大骨鸡分离出来形成独立类群;仙居鸡与白耳鸡在K=6、萧山鸡与鹿苑鸡在K=7、藏鸡与茶花鸡在K=8时仍聚在同一类别中,这与9个地方鸡种的地理分布及形成历史相吻合。9个地方鸡品种群体中均有具有复杂遗传基础的个体分布,迁移个体只分布在藏鸡、萧山鸡和鹿苑鸡群体中。     

青藏高原不同垂穗披碱草居群营养品质季节动态比较

摘要:对青藏高原地区6个垂穗披碱草（Elymus nutans）居群8个不同生育期的可溶性糖(WSC)和粗蛋白质(CP)含量进行了测定。结果表明,居群间不同生育期WSC和CP含量存在显著差异(P<0.05),种源地来自青海共和县居群和甘肃临潭县居群WSC含量在整个生育期显著高于其他4个居群;CP含量甘肃玛曲县居群显著高于其他居群。整个生育期,WSC含量呈单峰曲线,初花至盛花期最高(P<0.05),初花期WSC含量最高为6.91%,最低为1.58%,CP含量整体表现为下降趋势,完熟期最低。不同居群间WSC和CP含量均表现出一定变异度,其变异系数变幅分别为36.47%～51.29%和4.76%～20.29%。相关性分析表明,WSC与CP含量呈显著负相关。