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Rapid detection of Phytophthora cinnamomi using PCR with primers derived from the Lpv putative storage protein genes 总被引:1,自引:1,他引:1
Phytophthora cinnamomi is an ecologically and economically important pathogen. In this study, PCR assays were developed with primer pair LPV2 or LPV3 for rapid detection and identification of this organism. Both primer pairs were selected from putative storage protein genes. The specificity of these primer pairs was evaluated against 49 isolates of P. cinnamomi , 102 isolates from 30 other Phytophthora spp., 17 isolates from nine Pythium spp. and 43 isolates of other water moulds, bacteria and true fungi. PCR with both primer pairs amplified the DNA from all isolates of P. cinnamomi regardless of origin. The LPV3 primers showed adequate specificity among all other species tested. The LPV2 primers cross-reacted with some species of Pythium and true fungi, but not with any other Phytophthora species. PCR with the LPV3 primers detected the pathogen at levels of a single chlamydospore or 10 zoospores in repeated tests. The PCR assay was at least 10 times more sensitive than the plating method for detection of the pathogen from artificially infested soilless medium, and, to a lesser extent, from naturally infected plants. PCR with LPV3 primers can be a useful tool for detecting P. cinnamomi from soilless media and plant tissues at ornamental nurseries, whereas the LPV2 primers can be an effective alternative for identification of this species from pure culture. Applications of these assays for detection of P. cinnamomi in other environments were also discussed. 相似文献
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在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上,构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库,并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13.5kb大片段,酶切分析得到该片段的物理图谱,BamHI和EcoRI切完成了6.5kb含全长基因的亚克隆,并对这条6.5kb片段亚克隆、测序,序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686),并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB,扩增产物插入表达载体pET-21b中,诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性,LC50达到7.9μg/ml。 相似文献
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菜豆萎蔫病菌的种子检验鉴定技术研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究对我国一类检疫性有害生物菜豆萎蔫病菌Curtobacteriumflaccumfa-cienspv.flacumfaciens(Cf)进行种子检测鉴定技术的研究,发现523,NBY+TTC和NBY+刚果红三种培养基均可作为分离培养基;对带菌种子分离的灵敏度为1.8×102cfu/ml,病叶柄和茎是分离的最佳部位,病菌可通过种子传给种苗引起种苗发病,发病时间为7~20天,针刺接种是Cf最有效的接种方法,接种发病率为100%。使用标准化的Biolog鉴定系统鉴定病原,在种水平的鉴定准确率达98.5%。 相似文献
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长期施肥条件下菜田—蔬菜生态系统变化的研究( Ⅳ) 蔬菜生态系统的变化 总被引:4,自引:0,他引:4
以2002 年设施番茄栽培为代表计算其N、P、K投入量与携出量之间的表观平衡状态, 其结果基本上和14.5 年后的土壤实测值与设施栽培本底值之间纵向比较的增长关系一致, 前者只能说明系统养分变化的趋势, 后者才是实际的养分盈亏状态, 养分盈亏主要取决于有机肥的施用与养分元素的供给。5个代表性处理模拟了蔬菜施肥的不同现状, 从土壤肥力及产量等方面的变化真实反映出各自的系统变化及发展趋势, 在本试验条件下以ANK施肥下的系统最优。对有机肥施用、化学肥料的配施以及测土施肥等问题进行了探讨。 相似文献
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皮孔组织结构及密度与苹果枝干粗皮病发生的关系 总被引:9,自引:4,他引:9
通过对轮纹病菌(Botryosphaeria berengriana f.piricola)引起的枝干粗皮病不同感病程度的3个苹果品种富士、国光、鸡冠的树皮皮孔组织结构和密度的研究,发现高感品种富土、中感品种国光和免疫品种鸡冠在皮孔组织结构及密度上存在显著的差异。富士和国光的皮孔结构基本相似,均是先期开口,皮孔下无木栓组织,中后期开口加大,其下形成木栓组织。而鸡冠则是先期不开口,其下有木栓组织,中后期逐渐开口。鸡冠皮孔组织结构的这种特异性是其对枝干粗皮病免疫的主要原因。富士皮孔密度最大,国光次之,鸡冠最低。相关分析表明树皮皮孔密度与枝干粗皮病的病情指数间存在明显的正相关关系。 相似文献
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世界葡萄抗寒育种的成就与展望 总被引:9,自引:1,他引:9
近2个世纪,通过选种和杂交育种,世界葡萄抗寒育种在抗寒性与果实优质性状的结合方面取得了突破,育成许多抗寒性极强(耐-30~-40℃低温)、品质优良的鲜食、酿酒和制汁品种。由于葡萄的抗寒性是受多基因控制的数量性状,杂交后代的抗寒性基本呈以亲中值为峰顶的正态分布,所以我国应积极引进这些品种,在华北、西北等葡萄主产区试验、推广露地越冬栽培的同时,利用它们与现有抗寒性较弱的主栽品种(抗寒性-15~-18℃)杂交,培育适合我国冬季气候条件的抗寒品种(抗寒性在-25℃左右),迅速提高我国葡萄抗寒育种水平。 相似文献
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抗生素工业化生产中一级种子罐染菌原因及解决方法 总被引:1,自引:0,他引:1
抗生素工业化生产中,菌种往往需要扩大繁殖到一定的数量后再进入发酵罐.在一级种子制备过程中,引起染菌的因素很多,极大地影响了抗生素生产的产量和质量.解决一级种子罐染菌的方法,除制定科学的岗位SOP并不断提高操作者的技能外,更重要的是要加强工艺管理,树立以预防为主的思想,根据微生物特性,强化环境清洁,加强设备清洁、维修,操作时实行定人、定操作. 相似文献
70.
James F X Wellehan Maud Lafortune Darryl J Heard 《Journal of zoo and wildlife medicine》2004,35(2):197-202
Traumatic elbow luxation was diagnosed in a common squirrel monkey (Saimiri sciureus) and a bonnet macaque (Macaca radiata). In the common squirrel monkey, the luxation was complicated by an ulnar fracture and would not stay reduced when attempts at closed reduction were made. The luxation was surgically reduced and a transarticular type I external skeletal fixator was placed. In the bonnet macaque, closed reduction was performed and the elbow was stabilized using a cast. Both monkeys regained good function of the injured elbows. 相似文献