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103.
ZHOU Yu-zhao MA Zhi-liang SUN Ting-ting YANG Jie ZHANG Xiao-miao CHAI Jun ZHANG Na-na ZHANG Yi-fang 《中国畜牧兽医》2015,42(11):2880-2887
The present study was designed to construct recombinant plasmids,which could express porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) ORF5 gene.RNA was extracted from spleen and lung samples of the suspected pigs which were infected with PRRSV.According to PRRSV ORF5 gene,a pair of primers was designed for RT-PCR amplification.The ORF5 target gene was cloned into pMD19-T vector and then the recombinant pMD19-ORF5 was achieved.According to the sequencing results and the characteristics of expression vectors,a pair of primers with NcoⅠand XbaⅠenzyme cleavage sites was designed.Target fragment dORF5 was amplified and then connected to pProEXHTb and pNZ8149 vectors,respectively.And recombinant HTb-dORF5/DE3 and pNZ8149-dORF5/NZ3900 was induced by IPTG and Nisin,respectively,and analyzed by SDS-PAGE and Western blotting.Recombinant HTb-dORF5/DE3 induced by 1.5 mmol/L IPTG was expressed in the highest quantity.There were specific band at about 22 ku with reactionogenicity when it was tested by SDS-PAGE and Western blotting.Recombinant pNZ8149-dORF5/NZ3900 induced by 20 ng/mL Nisin was expressed in the highest quantity.There were specific band at about 19 ku with reactionogenicity when it was tested by SDS-PAGE and Western blotting.The IFA result showed specific green fluorescence.This study successfully constructed recombinant plasmids HTb-dORF5 and pNZ8149-dORF5 and expressed,the result laid a solid foundation for further development of PRRS vaccines. 相似文献
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雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫后脂质过氧化物的变化 总被引:7,自引:0,他引:7
为了探讨柔嫩艾美耳球虫 (E.tenella)对感染雏鸡的损伤机制 ,本试验给 10日龄海兰白公雏鸡口服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊 8× 10 4个 /只 ,在感染后 2、4、6、7、9、12、16和 2 1d分别各取 5只雏鸡剖检 ,取盲肠并采血 ,观察盲肠病理组织学变化 ,测定盲肠组织及血清中的丙二醛 (MDA )、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)的水平。结果表明 ,雏鸡在感染 E.tenella后 2~ 4d,盲肠开始出现损伤 ,同时 SOD和 GSH- Px活性也开始下降 ;感染后 4~ 7d,盲肠粘膜上皮和肠腺上皮细胞大量变性、坏死崩解 ,发生严重损伤时 ,盲肠及血清中 MDA含量显著增加 ,并持续到 9d,同时 SOD和 GSH- Px活性也显著下降 ;感染 9d后 ,损伤的盲肠组织及 MDA、SOD和 GSH- Px水平逐渐恢复 ,至 2 1d基本达到正常 相似文献
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通过对西藏小型猪心电图分析,寻求西藏小型猪心电图变化的规律,并与人类和贵州小型猪心电图进行比较,以期为西藏小型猪实验动物化提供心电图基本资料。用ECG-9020K心电图仪,描记完全清醒状态的西藏小型猪45头,选择Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ标准导联和aVR、aVL、aVF单极加压肢体导联的心电图。结果显示:①心电图均为窦性心率;②P波在Ⅰ、Ⅱ、aVF导联均为直立,在Ⅲ、aVL导联大部分直立,在aVR导联均倒置;③QRS综合波形在Ⅰ导联以qR为主,Ⅱ导联以qRs、Rs为主,Ⅲ导联以Rs、qRs为主,aVL导联以qRr、sr’和qr为主,aVR导联以rsr’、Qr和Q为主,aVF导联以Rs和qRs为主;④T波在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVF导联中多为直立,在aVL、aVR导联中多为倒置;⑤各波间期时间(ms):P波(68.18±23.54),P-R间期(92.69±20.64),QRS间期(47.76±13.50),Q-T间期(225.93±45.03),Q-Tc间期(225.47±31.23)。西藏小型猪心电图特征与人心电图基本相似,但心率较快,P-R间期、QRS间期、S-T间期和Q-T间期较短及T波方向变化大;西藏小型猪心电图特征与贵州小型猪心电图很相似,但Q-T间期较贵州小型猪短。 相似文献
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近年来,转基因农作物及其副产品以其独有的优势在世界粮食和饲料资源中扮演了越来越重要的角色.但到目前为止,人们对于转基因作物的安全性仍然没有一个定论.围绕转基因农作物及其副产品用作食品及饲料的安全性问题,各国学者作了大量研究.本文综述了近年来转基因农作物及其副产品的安全性问题由来及其用作动物饲料时与非转基因作物相比的安全性和饲喂价值差异等方面的一些研究进展,并对未来转基因农作物饲用安全性的研究方向提出了作者的观点. 相似文献
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采用细菌分离技术、病理组织学观察、PCR鉴定及致病性试验对临床一例疑似雏蛋鸡皮肤型鸡痘混合感染进行了确诊。结果显示,病鸡眼分泌物及脚趾结痂处均分离到大肠埃希菌,内脏器官未分离到细菌。组织学观察发现,在皮肤痘痂和眼睑组织内发现上皮细胞呈水泡变性,空泡化,胞质内出现圆形嗜酸性包涵体,腺胃胃壁增厚,复管腺腺腔内可见局灶性的淋巴细胞样细胞聚集,肺脏淤血,散在的肝细胞和肾小管上皮细胞变性、坏死,其他内脏器官未出现明显病变。体表病灶内PCR扩增出1 358bp的禽痘病毒的特异性片段。将痘痂病料接种9日龄的SPF鸡胚可致鸡胚死亡,呈暗红色。确诊该起病例为皮肤型鸡痘伴大肠埃希菌局部感染。 相似文献