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71.
目录     
为了表达牛环形泰勒虫(Theileria annulata)截短HSP70基因编码蛋白并研究该蛋白的结构与功能特性,本研究扩增牛环形泰勒虫HSP70目的基因并构建重组质粒pMD18-T-HSP70,选取其他种的同源HSP70蛋白序列构建系统进化树;利用生物信息学方法分析HSP70基因编码蛋白的氨基酸组成、基本理化性质、亲疏水性、跨膜区结构、信号肽、可能的磷酸化位点、亚细胞定位及蛋白的二级结构和三级结构;对重组蛋白HSP70进行蛋白互作网络分析;构建原核表达载体pET28a-HSP70,筛选诱导表达条件,镍柱纯化重组蛋白及检测反应原性。结果显示,牛环形泰勒虫HSP70蛋白序列与小泰勒虫的序列同源性较高,蛋白分子质量为42 ku,理论等电点(pI)为5.61,属于酸性亲水性蛋白,无跨膜区及信号肽;蛋白功能预测结果显示,HSP70包含32个可能的磷酸化位点,亚细胞定位分析显示该蛋白主要分布于细胞质。蛋白质二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占39.18%、8.51%、30.41%和21.91%。蛋白互作网络构建结果显示,与HSP70相互作用的蛋白主要为HSP90家族成员,另外还有伴侣蛋白GrpE同系物,预示着HSP70可能在细胞内与HSP90形成复合体发挥作用。本试验成功构建原核表达载体,获得了大小约为48 ku的融合蛋白,以0.6 mmol/L IPTG于37 ℃诱导5 h,蛋白表达较好;点状印迹及Western blotting结果表明,表达产物可被自然感染的牛环形泰勒虫阳性血清识别,具有良好的反应原性。本试验结果为进一步探讨牛环形泰勒虫HSP70功能机制提供了理论依据。  相似文献   
72.
运动场是保障奶牛生产力和动物福利的重要设施。2021年6—9月,频繁降雨导致北京地区多家奶牛场的运动场积水,为奶牛生产力、奶牛场生防安全、环境卫生、运动场舒适性和动物福利带来隐患。通过线上线下结合,调研了北京地区27 家规模化奶牛场的运动场防雨、排水及垫料现状。结果表明:调研奶牛场中,88.90%奶牛场配备了运动场,其中83.33%奶牛场通过设置地面倾角、设置挡雨棚、雨污分离槽及布设排水管道(沟渠)、雨后水泵排水等方式实现运动场防雨及排水。此外,针对运动场建设、运动场防雨、运动场舒适性展开讨论,以期改善运动场防雨现状,满足集约化奶牛场可持续发展需求和提升动物福利。  相似文献   
73.
为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪 HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western blotting检测ORF3蛋白过表达成功后,运用lncRNA高通量组学测序,筛选出差异表达的lncRNA并进行靶向差异基因预测,对lncRNA靶向差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,初步鉴定出与核黄素代谢信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络。Western blotting结果显示,在约为12 ku处出现目的条带,说明成功实现腺病毒介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中过表达。lncRNA高通量组学测序结果显示,共发现102个显著差异表达lncRNAs表达量上调,80个显著差异表达lncRNAs表达量下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,初步挖掘出lncRNA(MSTRG.13995.2)和lncRNA(MSTRG.1960.1)可能是与核黄素代谢信号通路相关的显著差异表达lncRNA,分别通过顺式调控其靶向基因APC-5和FLAD1来影响核黄素代谢信号通路。本试验初步鉴定出lncRNA(MSTRG.13995.2)-APC5和lncRNA(MSTRG.1960.1)-FLAD1可能是影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络。  相似文献   
74.
随着农业生产规模的扩大和机械化水平的提高,人们在进行农业生产的时候,已经普遍接受并采用机械化的生产模式,文章就农业机械化发展出现的问题进行了介绍,并提出了在我国进行农业机械化的推广的具体措施。  相似文献   
75.
This experiment was designed to study the complex of Lactobacillus rhamnosus fermented herbal and Bacillus subtilis on White Feather broiler immunity performance and impact of Escherichia coli infection.360 one-day-old broiler chickens were randomly divided into 3 groups with 4 replicates in each group and 30 chickens per replicate.The pretrial period lasted for 7 d,and the experiment lasted for 35 d.The chickens in the group Ⅰ(positive control group) and group Ⅱ(negative control group)were all only fed a basal diet,group Ⅲ was test group,by additive 1% fermented herbal preparations,groups Ⅱ and Ⅲ were intraperitoneal injection of 1 mL E.coli at 35 d,broiler mortality,immune organ index,cecalmicroflora content,immunoglobulin levels,IL-2 and IL-6 content were tested.The results showed that injection of E.coli caused massive death of chickens,group Ⅱtook up to 75.00%,it was significantly higher than groups Ⅰ and Ⅲ (P < 0.05),the mortality in group Ⅲ was significantly lower than group Ⅱ(P < 0.05),was only 23.33%.Injection of E.coli maked spleen index and thymus index of group Ⅱincreased significantly (P < 0.05),the spleen index and thymus index of groups Ⅰ and Ⅲ were no significant difference (P > 0.05).E.coli counts was significantly decreased after injectionin group Ⅲ (P < 0.05),but the number of intestinal Lactobacilli of group Ⅲ was significantly increased (P < 0.05),and inhibited the propagation of E.coli,the counts of E.coli in groups Ⅰ and Ⅲ were no significant difference (P > 0.05).At 42 d,the sIgA of the intestinal fluid in group Ⅲ were higher than that of groups Ⅰ and Ⅱ with 11.99% and 36.56%,respectively(P < 0.05).The serum IgG concentrations of group Ⅲ was higher than that of groupsⅠand Ⅱwith 14.68% and 28.15%,respectively(P < 0.05).At 42 d,the IL-2 content of group Ⅱ was the lowest,it was significantly lower than group Ⅲ(P < 0.05),the IL-6 of group Ⅲ was significantly lower than group Ⅱ(P < 0.05).  相似文献   
76.
In order to understand the main bacterial pathogen species causing dairy cow mastitis in Liaoning, as well as the characteristics of drug sensitivity of the pathogenic E.coli,the milk samples from 75 dairy cows with clinical manifestations for mastitis in certain large-scale dairy farm in Liaoning were collected.The bacteria in milk were cultured and isolated with biochemical methods and in vitro drug sensitivity tests were processed with the isolated E.coli strains.The results showed that the main bacterial pathogen for dairy cow mastitis were E.coli(separation rate 58.7%),S.aureus(64.0%)and S.agalactiae(54.7%),and multiple infection including double and triple infection were identified.The drug sensitivity tests on the isolated E.coli indicated that the E.coli isolates were highly resistant to sulfonamides(resistance rate>85%)and chloramphenicol(resistance rate>30%),and they were relatively low resistant to ampicillin(9.5%),ciprofloxacin(9.5%),ceftiofur(7.1%)and ofloxacin(4.8%).The results was able to provide reliable theoretical basis for prevention and control of dairy cow mastitis in Liaoning area.  相似文献   
77.
以3种不同基因型的羽衣甘蓝品种"皱叶红心"、"白鸥"和"红鸥"为试材,以MS培养基为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA、NAA、IBA激素,筛选不同品种真叶叶片不定芽的诱导频率,同时确定不同材料对除草剂双丙氨膦和抗生素壮观霉素的致死临界质量浓度,为羽衣甘蓝的叶绿体转化研究筛选受体材料。结果表明:影响羽衣甘蓝叶片诱导不定芽因素中,激素质量浓度的影响比品种的影响更大;当诱导培养基中的6-BA质量浓度为1.0mg/L、NAA质量浓度为0.1mg/L时,诱导效果最佳,是3个品种的最适培养基;按照由高到低的顺序排列,3个品种的不定芽诱导率依次为"红鸥"、"白鸥"和"皱叶红心",因此择优利用品种"红鸥"作为后续转基因研究的受体材料;分别利用双丙氨膦和壮观霉素的不同质量浓度梯度进行筛选,研究二者对"红鸥"品种叶片分化的影响,发现双丙氨膦和壮观霉素的最低抑制质量浓度分别为4mg/L和50mg/L。该研究结果对今后利用叶绿体遗传转化技术改良羽衣甘蓝品种提供了技术支持。  相似文献   
78.
设施蔬菜连作障碍及调控措施研究进展   总被引:6,自引:0,他引:6  
陈天祥  孙权  顾欣  王锐 《北方园艺》2016,(10):193-197
设施蔬菜生产中的连作障碍普遍存在,主要因素包括土壤的营养平衡被打破、次生盐渍化、生物学特性改变、化感物质的毒害作用等。调控措施包括轮作和间作套种、生物防治、增施有机肥料、选育抗性品种、嫁接栽培、添加吸附剂、合理灌水和施用化肥、土壤消毒处理等。现概述了设施蔬菜连作障碍成因和缓解措施研究成果,以期为调控设施蔬菜连作障碍提供借鉴,并对未来亟需研究解决的问题进行展望。  相似文献   
79.
以丹参为试材,采用土培盆栽法,于第1茬花开前进行高温胁迫处理,研究了高温胁迫对丹参生理指标、光合及叶绿素荧光特性的影响。结果表明:随着高温胁迫时间的延长,丹参叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性呈上升趋势,而过氧化氢酶(CAT)活性呈下降趋势;丙二醛(MDA)、游离脯氨酸(Pro)含量均呈上升趋势,且与胁迫时间呈极显著多项式关系。净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间二氧化碳浓度(Ci)和蒸腾速率(Tr)均呈下降趋势,且各指标均与胁迫时间呈负相关。最大光化学量子产量(Fv/Fm)、PSⅡ潜在光化学活性(Fv/Fo)、有效光化学量子产量(Fv′/Fm′)、光化学淬灭系数(qP)和表观光合电子传递速率(ETR)均呈下降趋势,且各指标均与胁迫时间呈负相关,非光化学淬灭系数(NPQ)呈先上升后下降趋势。研究表明,高温(40℃)对丹参生理指标、光合及叶绿素荧光特性有较大的影响,且各功能指标共同作用,以减轻植株所受伤害。  相似文献   
80.
以葡萄皮渣为试材,在单因素试验的基础上,采用L9(43)正交实验对葡萄皮渣原花青素的提取工艺进行了优化,并对纯化后的葡萄皮渣原花青素的抗氧化性进行了研究。结果表明:葡萄皮渣原花青素提取的最佳工艺参数为纤维素酶添加量0.4%,果胶酶添加量0.8%,酶解时间90min,酶解温度70℃。在此条件下,葡萄皮渣原花青素的得率为11.08mg·g-1。体外抗氧化试验结果表明,紫甘蓝原花青素表现出明显的抗氧化能力,对DPPH自由基和羟基自由基具有较好的清除能力,抗氧化能力优于维生素C。  相似文献   
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