高通量测序技术结合传统方法筛选及鉴定奶酒中曲霉菌

奶酒含有丰富的营养,且具有驱寒活血、开胃消食等保健功效。但由于传统的可培养方法对其微生物全貌的认识具有一定的局限性。因此,本文采用高通量测序技术,对奶酒的真菌生物多样性进行检测。结果表明,酵母菌属(Saccharomyces)和曲霉属(Aspergillus)是奶酒最主要的真菌群落,其中,酵母菌属为第一丰度的真菌,丰度约为62%。第二丰度的真菌为曲霉属,丰度为33%。通过进一步分离并采用16S鉴定出了一株曲霉菌,这可为奶酒发酵剂的开发提供依据。     

“青大1号”紫花苜蓿叶蛋白提取条件优化

为了开发新的食用蛋白质资源,本试验以“青大1号”紫花苜蓿新品系青干草为原料,采用酸化加热法配合加盐法提取叶蛋白.单因素试验设计,分别考察料水比、加盐量、絮凝时间、pH、预浸时间、絮凝温度6个因素对粗蛋白质提取率的影响,并以单因素试验结果为依据,采用四因素（料水比、加盐量、絮凝时间、pH）三水平L9（34）正交试验设计进行提取工艺优化.试验结果表明：影响粗蛋白质提取率的因素,从大到小依次为料液比、絮凝时间、pH、加盐量.当絮凝温度为70℃、料液比为1∶10、加盐量1％、絮凝时间5min、pH为4时是叶蛋白提取的最优提取条件.     

桑树冬季锯桩切皮芽接方法的探讨

本文对桑树冬季锯柱切皮芽接方法作了详细介绍。通过试验,用冬季锯桩切皮芽接方法改良低产桑园,其成功率较春季锯桩剥皮芽接高30％左右,是改良低产桑园的行之有效方法之一。     

瑞香狼毒粗提取比较与成分分析

主要采用了不同提取液、不同提取液倍数、不同提取方法对瑞香狼毒进行了提取率的研究．同时对不同提取方法所得提取物的成分进行了分析。结果表明：以6倍95％乙醇作为提取液．采用75℃浸泡5d的提取方法提取率高,成分含量多,特别是针对其杀虫效果而言,采用乙醇作为提取液效果更佳。     

两种盐酸多西环素注射液在猪体内的药代动力学研究

研究制备了两种稳定的20％盐酸多西环素注射液,按10 mg/kg的剂量分别给猪肌肉注射,观察两个制剂在猪体内单剂量肌注的药代动力学特征.结果表明,多西环素在猪体内的药物动力学特征均符合一级吸收二室开放模型,其主要的药物代谢动力学参数:消除半衰期(T1/2β)分别为(3.246±1.04)和(9.631±1.12)h,药时曲线下面积(AUC)为(10.462±0.28)和(17.525±0.14)(μg/mL)*h,达峰时间(Tpeak)及达峰浓度(Cmax)分别为(1.427±0.16)h、(1.465±0.20) μg/mL和(1.694±0.15)h、(1.058±0.09) μg/mL.其中制剂一的血药浓度在给药2h后迅速降低,为普通注射液;与制剂一相比,制剂二能够缓慢释放药物,为长效缓释盐酸多西环素注射液.     

家蝇抗菌肽的研究进展马红霞

从家蝇抗菌肽的分类、结构特点、作用机理、诱变、活性检验以及分子生物学研究等方面介绍了家蝇抗菌肽的研究进展。家蝇抗菌肽独特的作用机理、成熟的诱导、分离纯化技术及其相关基因的克隆、表达等研究成果均为对家蝇抗菌肽进行更深入的研究奠定了基础。采用分子生物学技术有望筛选并制备大量的高效家蝇抗菌肽。     

奶牛干细胞多能性基因Nanog和Lin28克隆分析及其逆转录病毒表达载体的构建与包装

以50~60日龄的Holstein奶牛胎儿原始生殖嵴组织为材料,通过RT-PCR的方法克隆奶牛Nanog与Lin28基因开放性阅读框(ORF)全序列。序列全长分别为903 bp和618 bp。所克隆的奶牛Nanog与Lin28基因序列与GenBank中已经发表的参考序列进行比对同源性均为100%。将扩增的基因片段经过酶切后亚克隆到反转录病毒载体pMSCVneo的多克隆位点,经过酶切、PCR和测序鉴定正确后,应用lipofectamine2000介导转染PT67包装细胞,经过14 d G418连续抗性筛选,挑选抗性集落扩大培养。收集病毒上清经过RT-PCR与透射电镜检测,并用NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果表明,病毒上清中含有逆转录病毒颗粒,Nanog与Lin28基因在筛选后的包装细胞PT67细胞中均有转录,病毒上清感染滴度值分别达到7.5×107cfu/mL和9.19×107cfu/mL。结果表明,本试验已经成功克隆出奶牛Nanog与Lin28基因开放性阅读框全序列,并建立高效、稳定产生包含有pMSCV-Nanog与pMSCV-Lin28质粒的感染性病毒颗粒的包装细胞株,为进一步产生奶牛诱导性多能干细胞(Induced pluripotentstem cells,iPSCs)奠定基础。     

马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定

为了建立马耳他布氏杆菌M5-90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断,本研究以bp26基因作为重组靶位点,以M5-90为亲本,利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列,将卡那霉素抗性基因(Kan')整合到细菌基因组中,双交叉重组阳性菌株,经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29 ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别,而突变株M5-90-26反应结果为阴性,表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达.M5-90-26具备从血清学角度区分M5-90-26免疫与野生型布氏杆菌感染,对布氏杆菌病防制、监测及净化具有重要的意义.     

黄花苜蓿和紫花苜蓿分子核型比较

黄花苜蓿(Medicago falcata L. 2n=32)是一种重要的野生豆科牧草,由于其突出的抗逆特性,被认为是用来进行苜蓿改良的优异遗传资源。本研究利用染色体荧光原位杂交技术(FISH),以不同荧光物标记的3种重复序列(5S rDNA,45S rDNA和C₀t-1 DNA),对黄花苜蓿和和紫花苜蓿(Medicago sativa L. 2n=32)染色体进行了FISH分析和分子核型比较,以期在染色体水平上揭示二者之间的亲缘关系。结果表明:利用上述重复序列可以较好的将苜蓿32条染色体区分为16对特征不同的染色体。黄花苜蓿和紫花苜蓿绝大多数染色体FISH杂交特征表现一致或高度相似性,分子核型无显著区别,因此二者间在遗传上具有高度的相似性。     

血清中不同甘露(聚)糖结合凝集素浓度的绵羊感染绵羊肺炎支原体后免疫因子表达的变化

为研究中国美利奴羊不同甘露(聚)糖结合凝集素(MBL)浓度感染绵羊肺炎支原体(MO)的免疫因子水平变化,本研究选择血清中MBL高、低浓度的绵羊各6只(感染组和对照组各3只),感染组人工感染MO,分别在人工感染前和感染后不同时间,采用荧光定量PCR法检测血液中血清因子及补体表达水平。结果显示,不同MBL浓度的绵羊人工感染后MBL m RNA水平呈下降趋势,MBL高浓度促炎因子IL-2和IFN-γ的m RNA表达水平较高,抗炎因子IL-4的m RNA表达水平在感染后1 d升高,此后开始下降,而IL-4的m RNA水平在14 d后有所升高;MBL低浓度羊感染后其TNF-α的m RNA水平显著升高,随炎症的缓解,逐渐降低;补体C1和C3的m RNA在感染后表现出不同的变化,MO感染可以激活补体途径。本研究结果表明,低血清MBL浓度与绵羊支原体肺炎具有一定的相关性,MBL不同浓度组之间其IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ、补体C1、C3水平存在差异,低浓度MBL的绵羊更易发生比较严重的炎症反应。