牛叠朊编码基因缺失突变体的构建及在大肠杆菌中的表达

本实验室已制备出多株针对牛叠朊的单克隆抗体,为充分鉴定这些单克隆抗体针对的抗原表位,通过基因克隆表达的策略获取牛叠朊基因缺失突变体的重组蛋白,以期为单克隆抗体的表位鉴定提供物质材料。经过对牛成熟叠朊编码基因及预测蛋白结构特征的分析,设计表达9个缺失突变体的引物。以PCR扩增出叠朊基因的缺失突变体,与pET-30a（＋）表达载体连接后转入E.coli DH5α中,经双酶切和测序鉴定后将重组质粒转入E.coliJM109和E.coli BL21表达宿主菌中,经IPTG诱导表达后,以SDS-PAGE、Western blot和ELISA检测表达产物的相对分子质量、相对表达量和反应原性。结果表明,成功构建了9个牛叠朊编码基因的缺失突变体,通过IPTG的诱导表达,其中有6个缺失突变体被大肠杆菌高效表达,并且具有较好的反应原性,这为其单克隆抗体表位的进一步鉴定奠定了物质基础。     

天然黄色茧蚕品种实验室比较与生产应用试验

经过对新育成的黄色茧品种与生产应用白色茧品种秋丰×白玉的对比试验及丝质鉴定,秋丰×黄,正反交、秋丰×HJ,正反交这两对黄色茧品种具有龄期短、抗病力强、虫蛹率高的优点;黄色茧品种的产茧量与对照种相比差距不显著;两对黄色茧品种的鲜茧出丝率等茧丝质指标略低于对照,解舒丝长达到750m左右,解舒率均在65％以上,净度优良,符合缫丝业对茧质的基本要求。对其中的秋丰×HJ7在农村进行规模化中秋蚕饲养与缫丝应用试验,符合生产应用要求。     

江河源区草地资源现状及其可持续发展

在分析青海省江河源区草地资源现状的基础上，进一步剖析了造成该区域草地生态环境恶化的综合因素，提出了合理利用和保护天然草地，优化草地生产结构，加强基础设施建设，建立饲草料生产基地，遏制草地退化，使草地生态进入良性演替，实现江河源区草地资源可持续利用和草地畜牧业可持续发展的对策。     

MC4R基因主效位点在中外猪种中的遗传多样性及其与生长肥育性状的关联性分析

采用PCR-TaqI-RFLP技术,检测了9个中国地方猪种、3个外来猪种和1个培育猪种的612个个体及白色杜洛克×二花脸资源家系418头F2个体在MC4R基因D298N主效位点的遗传变异,统计分析了MC4R基因型与日增重、腹脂率及肩、胸、腰、臀部膘厚等生长肥育性状的关联性。结果表明:(1)G等位基因在中国地方猪种、长白和杜洛克中呈高频分布,而大白和南昌白猪具有高频率的A等位基因;(2)GG基因型个体的胸、腰、臀部膘厚较AA基因型和AG基因型个体厚,GG基因型个体的240日龄重、至240日龄平均日增重大于AA基因型个体,GG基因型个体的腹脂率高于AA基因型个体,差异显著。试验结果进一步验证了MC4R基因对猪生长肥育性状的影响效应。     

牛场地表土壤中芽孢杆菌的分离与鉴定

以呼和浩特市某牛场地表土壤为研究对象,通过传统的微生物培养方法和基于16S r RNA基因序列的新型分子生物学方法对其中的微生物进行了分析。结果显示在牛场地表土壤中共鉴定出蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus lincheniformis)、产芽孢梭菌(Clostridium sporogenes)、纯黄肠球菌(Enterococcus gilvus)和拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)共40株,并通过16S r RNA基因序列的系统发育树研究得到蜡样芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌这三种优势芽孢杆菌之间的亲缘关系。该研究为后续开发应用于无抗饲料添加剂和生物农药的绿色、安全、高效的益生芽孢杆菌微生态制剂提供一定的数据基础。     

纳米氧化锌对AA肉鸡肝脏金属硫蛋白的影响

以AA肉鸡为试验动物,以硫酸锌(含锌40 mg/kg)为对照,分别设置含锌30、40、60 mg/kg的3个纳米氧化锌剂量组,观测纳米氧化锌对鸡肝脏金属硫蛋白(MT)含量的影响.结果发现,与对照相比,含锌40、60 mg/kg的纳米氧化锌组能显著提高肝脏中MT的生成量(P<0.05).     

猪瘟和链球菌病混合感染的诊治

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种高度接触性、传染性疾病,猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种人畜共患传染病。某猪场存栏基础母猪180头,于2005年4月起开始发病,并陆续死亡。根据流行病学调查,临床症状观察,病理剖检和实验室诊断,确诊为猪瘟和猪链球菌混合感染,采取相应的防治措施,于1周后控制了疫情。     

急性冰水应激对犬血清甲状腺激素、NO及Na、K、Cl离子含量的影响

通过测定急性冰水应激时犬血清甲状腺激素、NO及Na、K、Cl离子含量的变化,来评价急性冰水应激对犬体内能量代谢、氧化应激状态及电解质平衡的影响。试验选取8只成年杂种犬,保定躯干浸于冰水混合物中(0~4)℃,使其进行冰水浴30 min。分别于处理前0.5 h(-0.5 h)及处理后0、0.5、1、3、7 h进行桡静脉采血2 mL,分离血清后测定其甲状腺激素(T3、T4)、一氧化氮(NO)及Na^+、K^+、Cl^-的含量。结果表明:与-0.5 h(处理前)相比,处理后各时间点犬血清T3含量无显著变化(P>0.05),与-0.5 h及0、3、7 h相比,血清T4含量在0.5 h时显著降低(P<0.05);血清NO含量在处理后各时间点均显著高于处理前0.5 h(P<0.05),且1、3、7 h显著高于0、0.5 h(P<0.05);与-0.5 h相比,处理后3 h血清Na^+含量显著升高(P<0.05),血清K^+含量处理后0 h显著高于1、3、7 h(P<0.05),血清Cl^-含量处理前后差异不显著(P>0.05)。研究表明,急性短期冰水应激会扰乱机体的能量代谢状态、降低T4含量,同时造成氧化应激损伤、使NO含量大量升高;引起血清Na、K离子平衡紊乱、含量升高,提示临床上人或动物发生冰水应激时应及时纠正机体能量代谢、氧化还原平衡和电解质的紊乱。     

发酵乳清抗氧化活性及在冰淇淋中的应用

以还原力为指标,对经过唾液链球菌嗜热亚种cH9、保加利亚乳杆菌德氏亚种LB和植物乳杆菌LPC-37联合发酵后的乳清抗氧化活性进行研究。结果表明：CH9＋LB和LPC－37比例2：1、接种量3％、发酵时间10h的条件下还原力达到最大,在此条件下发酵的乳清在冰淇淋浆料中添加20％时感官评分最高,而添加量为25％时膨胀率达到最大。