TGF-β1基因真核表达载体的构建及在猪脐静脉内皮细胞中的表达

应用RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞扩增转化生长因子β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）全基因,构建含有TGF-β1基因及EGFP报告基因的真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β1。采用脂质体法转染体外培养的猪脐静脉内皮细胞（SUVECs）后,通过直接荧光观察pEGFP-C1-TGF-β1融合蛋白在细胞中的分布定位,并通过RT-PCR、间接免疫荧光方法检测TGF-β1基因在SUVECs中的表达。结果在转染后1周观察到绿色荧光,RT-PCR、间接免疫荧光法检测TGF-β1表达均为阳性。本研究成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP-C1-TGF-β1,且TGF-β1基因在SUVECs中获得表达。     

鸭肠炎病毒NP蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

设计一对特异性引物扩增出鸭肠炎病毒(DEV)核衣壳蛋白(NP)基因,并将其定向插入到原核表达载体pET32a上,构建了NP基因的原核表达载体pET-NP;将重组载体pET-NP转化表达宿主菌BL21后,经SDS-PAGE分离后行Western blot显示,获得的表达产物具有良好的免疫原性;应用His.Bind亲和层析柱纯化重组NP蛋白,并以此作为包被抗原,初步建立了检测鸭肠炎病毒抗体的iNP-ELISA;经方阵滴定确定,重组蛋白抗原的最佳包被浓度为5.0μg/L,血清最佳稀释度为1∶80,阳性判定标准为:待检血清OD405值≥1.2,且待检血清OD405和阴性血清OD405的比值≥2.0;应用iNP-ELISA对450份鸭血清样本进行检测,结果iNP-ELISA与全病毒包被的iDEV-ELISA符合率达90.9%。     

贵州香猪内源钙磷代谢及7～25kg生长阶段的钙磷沉积规律与需要量研究

为研究贵州香猪维持和生长的钙、磷需要量,选择3.5 ～4.0月龄,遗传来源相似,体重(11.06±2.61) kg的贵州从江香猪和剑白香猪去势公猪各6头,采用无钙无磷纯合饲粮法进行代谢试验,测定贵州香猪内源钙与内源磷的代谢规律.并选择60～75日龄贵州从江香猪34头,采用扣除蛋白质等消化能(DEpf)饲粮设计和比较屠宰...     

规模化养鸡场鸡舍内空气和饮水细菌含量检测

采用自然沉降法对现代化鸡舍内空气细菌含量进行检测,并对不同日龄鸡舍内外水质进行测定.结果显示:肉鸡饲养中期鸡舍内空气细菌含量明显高于生长前期和后期.带鸡消毒可以显著降低鸡舍内空气细菌含量;不同日龄鸡舍水质变化不大,饮水中细菌总数均较高,经过消毒处理后,饮水中细菌总数显著降低,与未消毒前比较,差异极显著(P＜0.01).     

膨化工艺对乳仔猪日粮养分及生长性能的影响

采用相同配方的膨化颗粒料和普通颗粒料进行哺乳仔猪和断乳仔猪日粮常规营养成分、氨基酸含量、细菌数量、脲酶活性、物理性状分析和乳仔猪生长饲养试验。结果表明 :两种制粒工艺的常规营养成分间差异不显著 :氨基酸总量、必需氨基酸和非必需氨基酸含量膨化料的比普通颗粒料高6.67 %～7.59 % ,差异不显著(P>0.05) ;两种饲料的卫生学和感官指标符合GB13278 -91 ,但膨化料的总细菌和大肠杆菌最可能数少于普通料 ,差异不显著(P>0.05) ;乳仔猪两料中的脲酶活性 ,膨化颗粒料比普通料分别降低56.25 %和28.57 % ,但差异不显著(P>0.05) ;膨化料与普通料相比 ,硬度明显增加 ,其中 ,哺乳仔猪料间差异显著(P<0.05) ,断乳仔猪料间差异极显著(P<0.01) ;膨化料与普通料相比 ,淀粉糊化度哺乳仔猪和断乳仔猪料分别提高32.86 %(P<0.05)和45.45 %(P<0.01)。饲养试验 ,膨化料育成率为96.77 % ,70日龄窝重203.76kg ,窝均盈利1040.83元 ,分别比普通料提高3.85 %(P>0.05)、13.01 %(P>0.05)和36.48 %(P<0.05)。     

46种杀菌剂对家蚕的毒性与风险性评价

采用浸叶法测定了46种常用杀菌剂对家蚕的急性毒性,结果表明:30％吡唑醚菌酯悬浮剂对家蚕的毒性等级为高毒(0.5200 mg/L).根据各种农药田间推荐施用浓度与LC50的比值(毒性比分级法),30％吡唑醚菌酯悬浮剂对家蚕具有极高风险性,50％氟醚菌酰胺水分散粒剂等6种杀菌剂对家蚕具有高风险性,430 g/L戊唑醇悬浮剂等20种杀菌剂对家蚕具有中等风险性,40％腈菌唑悬浮剂等19种杀菌剂对家蚕具有低风险性.田间喷药试验结果表明:7种对家蚕高风险性杀菌剂和325 g/L苯甲·嘧菌酯悬浮剂推荐浓度药液喷于桑叶后对家蚕具有不同程度的毒性残留,其中30％吡唑醚菌酯悬浮剂1000倍(300 mg/L)和42.4％唑醚·氟酰胺悬浮剂1000倍(424 mg/L)的残毒期均超过60 d.因此,桑园及附近农作物应避免施用对家蚕毒性强、安全风险大、在桑叶上残留时间长的杀菌剂品种,防止污染桑叶而导致养蚕中毒损失.     

关于动物医学专业少数民族学生教育的探析

分析了动物医学专业少数民族学生教育教学面临的困难及存在的问题,提出了调整少数民族班级的培养方案、民汉帮学提高少数民族学生汉语水平、提高少数民族学生的英语应用能力、提高动物医学专业少数民族学生就业质量等具体改革措施,从而达到提高少数民族学生对动物医学专业的理解、提升学生的主动学习意识、提高学生的综合能力、促进学生就业的目的。     

奶牛源MRSA菌株的分离鉴定和耐药性分析

本研究对部分奶牛场采集的502份隐性乳房炎试验（california mastitis test,CMT）检测呈阳性的奶样进行细菌分离、鉴定,运用多重PCR方法筛选出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）,并对分离出的MRSA用纸片扩散法进行药敏试验,检测其对19种抗菌药物的敏感性。结果显示,分离到细菌的奶样有452份,其中检出葡萄球菌338株,MRSA 89株;MRSA分离株主要对万古霉素、磷霉素、氯霉素和克拉霉素敏感,对青霉素、多黏菌素、大观霉素及头孢他啶具有较强的耐药性。本研究为指导奶牛乳房炎用药、MRSA菌株的快速鉴定及制定MRSA感染的防控措施提供参考。     

番鸭细小病毒安徽分离株结构蛋白基因的克隆及序列分析

为研究番鸭细小病毒(MDPV)安徽分离株的遗传变异特征,通过PCR扩增获得了MDPV结构蛋白(VP)基因全长序列AH-MDPV-VP,并将该序列与GenBank中登录的12条MDPV和鹅细小病毒(GPV)VP基因序列进行比对。结果显示,AH-MDPV-VP基因全长2 199bp,包括完整的VP1、VP2和VP3蛋白编码区。MDPV与GPV的VP基因部分序列一致,但具有明显的差异。进化分析显示,MDPV安徽分离株与基因重组型MDPV上海分离株SAAS-SHNH为同一分支,亲缘关系较近。同源性分析显示二者核苷酸序列同源性最高,为99.9%,且AH-MDPV-VP与GPV毒株SHFX1201的序列同源性也有89.5%。此外安徽分离株与其他MDPV的VP1、VP2和VP3基因同源性有逐步下降的趋势,而与GPV则相反呈上升趋势。进一步显示MDPV安徽分离株与基因重组型MDPV上海分离株SAAS-SHNH相似,可能为MDPV和GPV基因重组型水禽细小病毒。     

补饲青绿饲料对不同性别肉仔鸡皮肤色泽的影响

研究了在饲喂全价配合日粮基础上补饲青绿饲料对不同性别肉仔鸡全身不同部位皮肤色泽的影响。各组自由采食玉米-豆粕型基础日粮,分别于第1、15、29天开始补饲青绿饲料,比较分析42日龄时的全身各部位皮肤的色泽(L、a、b值)。结果表明,不同性别肉仔鸡各部位皮肤色泽间存在一定的差异性;补饲青绿饲料对肉仔鸡皮肤色泽的影响效应,以黄度最强和亮度最弱;补饲青绿饲料的时间越早,对肉仔鸡皮肤色泽的影响越明显;补饲青绿饲料对母肉仔鸡皮肤色泽的影响比对公肉仔鸡更显著。