一株高病毒载量 PCV2 毒株的基因组特征及序列分析

【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒 2 型（Porcine circovirus type 2,PCV2）流行毒株的遗传进化情况,丰富 PCV2 分子流行病学数据,为当地 PCV2 疫苗候选株的选用和研发提供参考。【方法】使用 qPCR 方法对疑似 PCV2 的样品进行检测,发现 1 株具有高病毒载量的 PCV2 毒株,命名为 GD222858。通过 PCR 方法进行全基因组分子克隆及遗传进化分析。使用 MegAlign 软件将该毒株 ORF1、ORF2 基因编码的氨基酸序列与 PCV2 同亚型参考毒株进行比对,分析氨基酸序列的相似性;采用 DNAStar 预测该毒株的 Cap 蛋白二级结构及 B 细胞表位,并与 4 株疫苗株 DBN-SX07-2（HM641752）、LG（HM038034）、SH（HM038027）、ZJ（AY686764）的 Cap 蛋白抗原指数进行比对分析。【结果】GD222858 毒株基因组长度为 1 767 bp。遗传进化分析表明该毒株属于 PCV2d 亚型。与国内外 82 株参考毒株的核苷酸相似性为 91.4%~99.6%,与越南毒株 Han8（GenBank 登录号：JQ181600）的亲缘关系最近。在 ORF1 编码的 Rep 蛋白处发现多个特异性突变位点 F70Y、F77L、W202R、N256S;ORF2 编码的Cap 蛋白相对保守。Protean 预测 Cap 蛋白的氨基酸第 5~18、24~25、39~41、48~49、57~65、99、101、112~114、139~140、145~150、162~165、175~181、188~189、205~211、227~232 位 置 处 均 可 能 存 在 潜 在 的 B 细 胞 表 位。GD222858 毒株的 Cap 蛋白抗原指数与 4 株疫苗株均有差异,在氨基酸 45~57、124~132、223~233 位置处抗原指数明显高于 4 株疫苗株,且与疫苗株 HM038034 差异最大。【结论】GD222858 毒株感染猪群的原因可能是 Rep 蛋白多个位点发生特异性突变及疫苗株选用不当所致。     

辽宁绒山羊CSN3基因PCR-RFLP多态性分析

本试验以辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊为实验动物,采用PCR-RFLP技术对-酪蛋白基因(CSN3)片段的Ⅰ的酶切多态性进行分析,结果表明:辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊2个山羊群体中均存在CSN3基因Ⅰ酶切位点的多态性,且均有A、B两个等位基因。辽宁绒山羊群体等位基因A和B的基因频率分别为0.46和0.54;内蒙古绒山羊群体中等位基因A和B的基因频率分别为0.31和0.69。CSN3基因Ⅰ酶切位点的基因型分布在辽宁绒山羊群体中极显著偏离Hardy-Weinberg平衡定理(<0.01),在内蒙古绒山羊群体中符合Hardy-Weinberg平衡定理(>0.05),但两个群体间存在显著差异(<0.01)。     

关于退耕还林工程造林类型设计的探讨

本文主要介绍了长春净月潭旅游经济开发区退耕还林地的立地类型,设计了与之相应的工程造林类型,分析了不同工程造林类型的综合效益。     

复合微生物菌剂在猪粪无害化处理中的应用

为了研究微生物菌剂对粪便恶臭组分及微生物菌群的影响,选取猪粪和玉米秸秆作为堆肥原料进行28 d的堆肥试验.试验分为5组,A、B和C组分别用玉米秸秆调节堆体水分为40％、50％和60％,D和E组不加玉米秸秆,A、B、C和D组分别接种微生物菌剂,E组不添加菌剂.结果 显示,B组堆体的高温持续时间最长,粪便腐熟效果最好.与E...     

野生大豆种质资源对大豆疫霉根腐病抗性评价

由大豆疫霉菌引起的大豆疫霉根腐病是严重影响大豆生产的毁灭性病害之一.防治该病经济有效的方法是抗病育种,而抗性资源筛选又是抗病育种的基础.本研究采用下胚轴伤口接种法,用黑龙江省的大豆疫霉菌的1号优势生理小种对来自全国19个省份的415份野生大豆资源进行了抗性鉴定,表现抗病的有96份,占总鉴定资源的23.1%,表现中抗的资源有152份,占36.6%,表现感病的资源有167份,占40.2%.根据野生大豆的来源分析发现,在我国,抗性野生大豆资源分布较广泛.     

一种大豆SNP分型新方法

单核苷酸多态性(SNP)在大豆基因组中分布广泛,SNP分型是大豆SNP遗传作图,关联分析、分子标记辅助选择等研究的重要技术.本文以Rhg4基因开发的5个SNP为例,介绍了一种大豆SNP分型的新方法-片段长度差异等位基因特异性PCR(FLDAS-PCR).采用AS-PCR原理,针对某个SNP位点设计2条相差4-5bp的特异引物和1个公用引物,PCR产物约100bp或150bp,2种等位基因型PCR产物相差4-5bp,在2个特异引物3'端第3和4碱基位置分别人为引入错配碱基来提高PCR特异性,通过6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可将纯合和杂合基因型检测出来.探讨了特异引物浓度和退火温度对Rhg4-1592扩增效果的影响,研究表明,可通过调整特异引物浓度和退火温度优化扩增效果.FLDAS-PCR对18份种质分型结果与PCR产物克隆测序法一致,表明本研究建立的FLDAS-PCR法是一种简便、快捷、新型的大豆SNP分型方法.     

日本大豆种质十胜长叶对我国大豆育成品种的遗传贡献分析

日本大豆品种十胜长叶是引进种质在我国大豆育种中利用最多的品种之一.对2005年以前利用十胜长叶育成的195个大豆品种进行了系谱分析,旨在明确十胜长叶对各育成品种的遗传贡献率,总结其利用方式,为国外种质的利用提供依据.通过分析发现,利用十胜长叶衍生育成的品种分布在吉林、黑龙江、辽宁、北京4个省市,它所衍生的品种数分别为96个、89个、8个和2个;平均遗传贡献率分别为13.04%、14.99%、20.31%和7.81%.其中92.2%的品种是由杂交育成的.十胜长叶对这些品种的遗传贡献率范围为0.78%～50.00%,以遗传贡献率为12.50%、6.25%和25%的衍生品种数较多,占衍生品种总数的77.3%,说明十胜长叶的利用以至少三交效果比较好,通过复交有利于聚合国内外品种的优良特性.十胜长叶在我国大豆育种中的成功利用说明,通过与当地品种杂交选育创造优良中间材料是利用国外引进种质改良我国大豆品种的有效育种途径.     

不同土地利用方式对土壤惰性碳的影响

【目的】研究不同土地利用方式对草地土壤惰性碳的影响,对于客观认识草地在减少大气CO2排放中的作用,制定草地碳增汇策略,合理利用草地资源具有重要意义。【方法】在中国科学院海北高寒草甸生态系统研究站3种不同利用方式土地（冬季自由放牧—冬牧、围封禁牧—禁牧、开垦播种燕麦—燕麦）,采用梅花形5点采样法采集野外样品,结合室内酸水解等分析方法,对0～30 cm土层的土壤总有机碳和惰性碳进行分层研究。【结果】1)0～10 cm土层土壤有机碳含量以冬牧最高（95.15g/kg）,禁牧次之（70.56 g/kg）,开垦播种燕麦最小（54.44 g/kg）。冬牧土壤惰性碳含量比禁牧高27.77%,冬牧比燕麦高32.54%。2）与冬牧相比,禁牧16年土壤0～10 cm土层有机碳下降了25.84%,开垦30年0～10 cm土层土壤有机碳下降了42.79%。禁牧16年土壤0～30 cm土层有机碳下降了10.89%,开垦30年0～30 cm土层土壤有机碳下降了9.48%。0～30 cm土层惰性碳平均含量冬牧比禁牧高22.67%,冬牧比燕麦高3.60%;与开垦相比,禁牧使惰性碳降低了19.78%。3）不同土地利用方...     

养殖户对强制免疫“先打后补”政策满意度及影响因素分析

为探究养殖户对强制免疫“先打后补”政策的满意度及影响因素,以重大动物疫病强制免疫“先打后补”政策试点省份之一的河北省生猪产业为例,基于1 115份生猪养殖户调研数据,借助顾客满意度（CSI）模型,构建养殖户强制免疫政策满意度理论分析框架,运用多元有序Logistic、多元有序Probit和Heckman模型,深入研究了养殖户对强制免疫“先打后补”政策满意度评价的影响因素。结果表明：1）当前我国强制免疫补贴政策的规制作用大于激励作用。2）养殖户强制免疫政策满意度评价受到多种因素影响,且不同规模养殖户强制免疫政策满意度评价影响因素存在一定差异。鉴于此,要提高养殖户对强制免疫“先打后补”政策认知水平,完善强制免疫政策的规制和激励机制,提高养殖户组织化程度和创新“先打后补”政策宣传方式。     

黄皮种质资源果实糖组分及其含量特征分析

【目的】分析64份黄皮种质资源的果实单果质量、果形指数、可溶性固形物（TSS）含量、可溶性总糖含量、可滴定酸（TA）含量、糖组分及含量等指标,为选育优质黄皮品种（系）提供依据。【方法】采用蒽酮比色法和酸碱滴定法测定黄皮果实可溶性总糖和TA含量,同时利用高效液相色谱法（HPLC）分析可溶性糖的组成及含量,结合果形指数、TSS含量等数据,利用主成分分析方法综合评价筛选优质黄皮品系。【结果】64个黄皮品种（系）的单果质量介于3.82～13.17 g,果形指数0.94～1.57、平均值为1.1,TSS含量10.96%～24.55%、平均18.08%,可溶性总糖含量8.04%～16.96%、平均11.88%,TA含量0.11%～1.95%、平均1.01%,蔗糖含量18.65～74.85 mg/g、平均44.28 mg/g,葡萄糖含量.7～32.1 mg/g、平均20.00 mg/g,果糖含量11.15～46.85 mg/g、平均22.56 mg/g。鹰嘴黄皮（008）可溶性总糖含量最高、达16.96%,塔下甜皮（086）果糖占比高达35.41%、糖酸比达102.14。【结论】黄皮为蔗糖积累型,通...