一株疑似外来鸡致病性大肠杆菌的分离与鉴定

通过细菌分离培养、形态学观察、生化试验和O血清型鉴定证实从某批国外进口发病雏鸡体内分离出一株大肠杆菌(F株),并利用动物试验成功复制了疾病.药敏试验和动物试验的结果表明,该大肠杆菌分离株耐药谱与国内分离菌株明显不同,对国内分离菌普遍耐药的喹诺酮类药物十分敏感;该茵对雏鸡具有明显的致病性,通过注射途径感染后的临床症状和病理变化都与自然病例类似;结合进鸡后34 h就发病并且仅发生于4个系别雏鸡中1个系别这一临床发病的特殊性,表明该大肠杆菌很可能是从国外携带而来.     

文昌鸡产蛋性能的微卫星标记研究

选用20对微卫星标记对120只文昌鸡进行多态性检测,分析微卫星标记与产蛋性能的关系.结果表明:①文昌鸡群体内遗传差异较大,遗传多样性丰富;②位于4号染色体的标记LEI0119与55周龄蛋重显著相关(P＜0.05),位于2染色体的标记MCW0131及位于Z染色体的标记MCW0294与400日龄产蛋数呈显著相关(P＜0.05).研究结果可为文昌鸡的保种和选育提供理论依据.     

日粮中添加不同形式三价铬对肥育猪组织铬沉积的影响

本项目旨在研究不同形式三价铬对肥育猪组织铬沉积的影响.选用96头体重约65 kg的杜长大三元杂交猪,按体重相近、公母各1/2的原则随机分成4组,每组3个重复,每个重复8头猪.试验猪第Ⅰ组设为对照,饲喂基础饲粮,其余3组为试验组,分别于基础日粮中添加含200 ug/kg铬的氯化铬、吡啶羧酸铬、纳米铬.试验猪随意采食,自由饮水,试验为期40 d.饲养试验结束后,从每组中选择体重相近的8头猪进行屠宰和样品采集分析.结果表明,饲粮中添加200 ug/kg三价纳米铬显著提高了肥育猪日增重和饲料转化率(P<0.05),全血、背最长肌、心脏、肝脏、肾脏、空肠和回肠中铬沉积量显著提高(P<0.05).饲粮中添加铬显著增加了粪便中铬的排泄量(P<0.05),纳米铬和吡啶羧酸铬组尿铬含量显著上升(P<0.05).由研究结果得出,纳米粒径化可以显著提高铬在肥育猪组织器官中的沉积,纳米铬相比常规氯化铬和吡啶羧酸铬具有更高的吸收率.     

杂交苏丹草中CN-含量的测定

对传统的异烟酸－吡唑啉酮比色法测定CN^-的条件进行了优化，并用于测定杂交苏丹草体内CN^-的含量。结果表明，苏丹草在苗期体内CN^-含量较高，达163mg/kg，以后呈逐渐下降的趋势。     

犬猫3种冠状病毒基因克隆的构建与芯片检测技术

蔗糖密度梯度离心纯化浓缩犬冠状病毒(CCV)、猫冠状病毒(FCV)和猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的细胞培养物,分别设计7、17、11对引物,对病毒RNA进行反转录和PCR扩增,回收PCR产物连接pGEM-T载体并转化大肠杆菌TGI,构建35个基因片段的克隆。煮沸裂解法制备质粒DNA,回收PCR扩增产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,与芯片进行杂交检测,淘汰交叉的克隆片段,每种病毒只选择其4对引物克隆的基因片段。将特异克隆扩增片段重新点制基因芯片,与病毒样品PCR扩增产物杂交,未发现交叉现象。基因芯片检测比传统PCR敏感1000倍,可有效应用于3种病毒的检测与区分。     

大蒜素对断奶仔猪生长发育及其周围环境的影响

选用 10 8头 2 0日龄健康无病的杜× (长×大 )三元杂交断奶仔猪 ,按血缘、体重、性别一致原则随机分为 2组 ,每组设 3个重复。各组试验猪基础日粮一致、饲养管理条件一致 ,并由同一饲养员饲养。对照组饲喂带有抗生素的饲料 ;试验组在饲料中添加 2 5%大蒜素 2 0 0g t,试验期18d。结果表明 ,与对照组比较 ,试验组日增重提高 16 5% (P <0 0 5) ,料重比降低 13% (P <0 0 5) ,采食量无显著差异 ,未有试验猪发病 ,粪便颜色比对照组浅 ,粪便表面蚊蝇量较少 ,说明大蒜素对仔猪具有促生长作用 ,同时还具有抑菌和杀菌、减少仔猪发病率、驱除蚊蝇、改善舍内外环境等功效 ,从而提高了经济效益 ,是一种极具有开发价值的中草药添加剂     

多年生黑麦草高频再生体系的建立及优化

从外植体预处理方式、基本培养基、激素浓度等方面着手,对多年生黑麦草愈伤组织诱导、继代、不定芽分化及再生过程中的影响因素进行了研究,提高了再生频率。结果如下：切取胚端半粒种子,经75%乙醇处理1min,0.1%HgCl处理15min,在经无菌水清洗4～6次后接种方式较好;愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4—D 8.0 mg/L（或另添加甘露醇25 g/L）为佳;愈伤组织接种于MS＋2,4—D 8.0mg/L＋甘露醇25 g/L上进行1～2次继代后于NB＋6—BA2.0 mg/L上进行分化;不定芽转接至MS＋6—BA2.0 mg/L上进行扩繁或于1/2MS＋NAA0.5mg/L＋IAA0.5mg/L上进行生根。     

Real-time PCR方法和PCR方法检测虾白斑综合征病毒

由白斑综合征病毒引起的虾白斑综合征是国际兽医局（OIE）规定的必须上报的水生动物二类疫病。本研究首先通过设计新的PCR引物，提高了PCR检测白斑综合征病毒的阳性检出率。为进一步提高白斑综合征病毒检测的灵敏度，本研究采用TaqMan探针技术建立了快速检测白斑综合征病毒的real-time PCR方法，通过与常规PCR方法比较，证实其检测灵敏度显著提高。     

非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测技术的研究与评价

根据非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）K205R基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化引物浓度、退火温度和Mg²⁺浓度,建立基于K205R基因的ASFV实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,qPCR）检测方法。对在猪肝脏组织DNA中掺入重组质粒制备的模拟样品进行扩增来确定所建方法的实际检测效率,并将OIE推荐的基于p72的qPCR调整后作为评价该方法检测效果的对照。试验结果表明,基于K205R基因的检测方法在检测模拟样品时扩增效率要优于基于p72的方法,而且敏感性和特异性强,适用于非洲猪瘟的快速检测、监测。     

生鲜牛乳中产肠毒素大肠埃希菌环介导等温扩增技术的建立与应用

为了快速检测生鲜牛乳中的产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC),防止食源性产肠毒素大肠埃希菌给人类造成的危害,建立快速检测不耐热型产肠毒素大肠埃希菌的环介导等温扩增方法(LAMP)。敏感性和特异性试验结果表明,该方法敏感性高,特异性强,能够从生鲜牛乳中检测到1pg产肠毒素大肠埃希菌DNA,与其他型大肠埃希菌及细菌不发生交叉反应。利用建立的LAMP技术对来自西宁市奶牛场及自由市场的21份生鲜牛乳样品进行检测,6份样品呈阳性,阳性检出率为28.6%,从分子水平为生鲜牛乳中产肠毒素大肠埃希菌的检测提供了一种快速、准确的手段,对保障生鲜牛乳的食品安全有重要意义。